我们研究了几何结构对热环境下自旋簇中量子相干性保存的影响。假设自旋间耦合较弱,我们探索了可以嵌入平面的各种缓冲网络配置。我们的研究结果表明,缓冲网络的连通性对于确定单个中心自旋中量子相干性的保存时间至关重要。具体而言,我们观察到,对于给定数量的缓冲自旋,最大平面图可产生最长的保存时间。有趣的是,我们的结果表明,保存时间并不会随着缓冲自旋数量的增加而持续增加。在我们的模拟中采用量子主方程,我们进一步证明由四自旋缓冲网络组成的四面体几何结构可提供对环境影响的最佳保护。
50-200μL缓冲液或直接到膜中心的蒸馏水。 在室温下孵育2-5分钟,然后在12,000 rpm(〜13,400×g)下离心2分钟。 注意:如果洗脱缓冲液的体积小于50μL,则可能会影响恢复效率。 洗脱缓冲液的pH值将在洗脱中产生一定影响。 我们建议选择缓冲液或蒸馏水(pH 7.0-8.5)以洗脱gDNA。 对于长期存储DNA,建议在缓冲液中洗脱并在-30〜 -15°C下存储,因为存储在水中的DNA会接受酸水解。 为了提高gDNA产量,可以将洗脱液重新加载至CB3,在室温2分钟下孵育,然后以12,000 rpm(〜13,400×g)的速度离心2分钟,以获得最终的洗脱。50-200μL缓冲液或直接到膜中心的蒸馏水。在室温下孵育2-5分钟,然后在12,000 rpm(〜13,400×g)下离心2分钟。注意:如果洗脱缓冲液的体积小于50μL,则可能会影响恢复效率。洗脱缓冲液的pH值将在洗脱中产生一定影响。我们建议选择缓冲液或蒸馏水(pH 7.0-8.5)以洗脱gDNA。对于长期存储DNA,建议在缓冲液中洗脱并在-30〜 -15°C下存储,因为存储在水中的DNA会接受酸水解。为了提高gDNA产量,可以将洗脱液重新加载至CB3,在室温2分钟下孵育,然后以12,000 rpm(〜13,400×g)的速度离心2分钟,以获得最终的洗脱。
本索引并非旨在详尽列出分区条例中的所有关键词条目。相反,它的作用是引导读者到文本中引用主题的位置,以引导读者获取更多信息。大多数引用都是条例的章节编号,其他引用是条例第三条中的定义。索引访问区域,特拉华河和拉克瓦克森河:535; 536.7 附属公寓:513 附属结构和用途:503 附属结构,附属:503.1 附属结构,集群开发:510.6 附属结构,非住宅:503.1 附属结构,独立:503.1 成人商店:528 空气污染:514.10 修正案:710 动物,饲养:525.4 动物,饲养:525 动物,滋扰:525.5 天线:539 公寓,附属:513 上诉:709 批准到期:406.1 汽车销售:523 住宿和早餐机构:524.3 船只通道,特拉华河和拉克瓦克森河:535; 536.7 边界:403 缓冲区:514.1 缓冲区、集群开发:510.7 缓冲区、特拉华河走廊:536.2 缓冲区、湖泊:508.2 缓冲区、多户住宅:511.5 缓冲区、池塘:508.2 缓冲区、溪流:508.2 缓冲区、水体:508.2 建筑物颜色:514.13 建筑物高度:407、III 建筑物高度例外:501.2 露营地:请参阅本索引中的“休闲车公园”独木舟通道、特拉华河和拉克瓦克森河:535; 536.7 独木舟涂装,特拉华河走廊:536.7 使用证书:参见本索引中的“使用证书”使用证书:705 清晰视线三角形、交叉点:502.3 皆伐木材,特拉华河走廊:536.6
1。样品制备 - 将20 µL纯化的DNA与130 µL闪电转换试剂混合。样品然后在热循环器上进行转换反应。建议这些步骤手动执行 - 甲板。2。仪器设置 - 试剂被装入槽中,并将实验室放在液体处理程序仪器上。翠鸟™Flex用户将手动将所有试剂装入深井板中。3。样品转移 - 步骤1的样品板被加载到液体处理程序仪器上,将其转移到包含600 µL M结合缓冲液和10 µL EZ EZ-EZ-甲基化的Magprep珠子的结合板中。翠鸟™Flex用户将在加载仪器之前手动将样品转移到装订板中。自动化脚本从这里开始。4。ez-甲基化的magprep珠子结合和缓冲液的去除 - 包含样品的深井板进行混合5分钟,而DNA与珠子结合。然后使用磁铁将珠子聚合4分钟,然后去除/分离结合缓冲液。5。m洗涤1 - 400 µL M洗涤缓冲液,并将深井板混合1-2分钟。然后使用磁铁将珠子聚合2分钟,然后去除/分离洗涤缓冲液。6。l-脱硫化孵育 - 添加200 µL L-脱硫化缓冲液并允许孵育15分钟。然后使用磁铁将珠子聚合2分钟,然后去除/分离脱硫化缓冲液。7。8。9。m洗涤2和3 - 步骤5重复两次以彻底洗涤珠子。残留洗涤缓冲液仔细去除以改善干燥。翠鸟™Flex用户可以在这里停止并手动执行剩余的步骤,以确保最小的收益率损失。珠干 - 将珠子在55°C下干燥20-30分钟或在室温下持续30分钟。洗脱 - 将25 µL的M液压缓冲液添加到珠子中并混合5分钟。然后使用磁铁将珠子聚合2分钟,然后将洗脱器转移到新的96孔微板板中。脚本在这里结束。
• 方法 2(亲和纯化) 1. 洗涤 4 o C(冰上)用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 2. 添加样品溶液 将 1000ul HeLa 细胞提取物添加到珠子中。 3. 反应 4 o C 孵育 240 分钟。 4. 洗涤 除去样品溶液。4 o C(冰上)用洗涤缓冲液洗涤珠子 3 次。 5. 洗脱 伏立诺他洗脱: - 添加 40ul 洗脱缓冲液并重新悬浮珠子。在 98 o C 下煮沸 5 分钟并除去珠子。 伏立诺他洗脱: + 在洗涤缓冲液中加入 30ul 25mM 伏立诺他并重新悬浮珠子。将管放在冰上一小时,通过间歇轻拍使结合的蛋白质洗脱。旋转后,磁性分离。将上清液转移到新的干净管中98 o C 煮沸 5 分钟。 6. 通过 SDS-PAGE 和银染分析样品
注意6·通过添加能够破坏二硫键键的还原剂(例如ß-甲醇(ß -me)或二硫代硫醇(DTT))的减少剂,从而污染了污染的RNass。为了促进二硫键的还原,使用前,每1 mL缓冲液DRP加入10 µLß -ME。添加ß -ME后,DRP缓冲液保持稳定1个月。使用前,每1 ml缓冲液在使用前,在RNase无rNase无水中添加10 µl [1 m] DTT的毒性但更昂贵的替代品。dtt在缓冲区DRP中不稳定,因此不得存储DTT-供应的DRP缓冲液等分试样。[1 M] DTT储备溶液在RNase无水酶中的工作等分试样必须存储在-20°C下,以保持稳定性。设置[1 M] DTT储备溶液(MW = 154.25 g mol -1),溶解1.54 g DTT每10 ml RNase无rNase无水,并将其存储在等分试样中以进行一次使用。
* 提供的两种反应缓冲液均可与 TaqNova DNA 聚合酶一起使用。对于需要高特异性的应用,建议将 10x TaqNova KCl 缓冲液作为首选方法。对于需要高灵敏度和扩增效率的应用(例如扩增多个 DNA 片段),建议使用 10x TaqNova (NH4,) 2SO2 缓冲液。可以评估这两种缓冲液以确定最适合特定应用的缓冲液。
注:对于劳埃德银行和 NatWest,O-SII 缓冲适用于其隔离实体的级别。上述 O-SII 缓冲反映了集团级别的要求。截至 2023 年第三季度的总资本要求(%)
该地点位于林伍德路的尽头,其前西边界面向街道。南部和东部边界由具有邻居特性的木栅栏形成。北部边界面向住房开发和黑水河之间的缓冲区。理事会的互动地图显示了任何名称之外的缓冲区,河流及其河岸属于专业科学重要性的地点。此缓冲区内也有许多树。