I.不要将样品带入离心管中。将散装样品带入烧杯,烧瓶等。II。 技术官员将在加载离心机之前评估散装样品的等分试样(约10毫升)。II。技术官员将在加载离心机之前评估散装样品的等分试样(约10毫升)。
细胞培养的最新进展显着影响了各种领域,包括药物发现和再生医学。因此,越来越需要最大程度地减少细胞培养过程中涉及的污染风险和劳动力。传统的细胞脱离方法通常采用蛋白水解酶,然后采取离心酶以在细胞脱离后去除这些酶。此过程通常需要大量的手动干预,这可能导致细胞质量的潜在污染和恶化。在这项研究中,我们提出了一种新型的细胞脱离方法,即使在胰蛋白酶化时间较少的情况下,也消除了离心的需求。我们的方法涉及减少胰蛋白胰蛋白酶的持续时间,在完整细胞脱落之前收集胰蛋白酶,然后在培养基中使用强制振动脱离细胞。我们进行了实验以优化酶处理时间和振动条件。我们的结果表明,该方法达到了从培养表面的82.8%的细胞脱离率。这些发现表明所提出的细胞脱离技术可有效从培养基底物中去除细胞和以下亚培养过程,而无需离心。
细胞在细胞外环境中释放各种类型的膜囊泡。这些称为细胞外囊泡(EV),包括外泌体和微泡。外泌体是相对较小的细胞外膜囊泡(30-150 nm),并通过转移生物分子(例如核酸,蛋白质,酶和脂质)在细胞之间转移了一种重要的细胞对细胞通信方式。此外,它们可以用作各种疾病的生物标志物,还被研究为下一代治疗剂的天然药物输送车系统。在这里,我们通过高速和超速离心的组合描述了从脂肪来源的干细胞中的小细胞外囊泡(EV)的快速隔离过程。将细胞培养在Bioblu®0.3C单使用生物反应器中,并由DASBOX®迷你生物反应器系统控制。DASBOX迷你生物反应器系统允许大量干细胞培养,因此高产量
系统是一种逆流离心系统,与手动离心相比,具有提高的分离效率。通过将离心力与流体的反流相结合,旋转系统可以根据其密度和尺寸来精确地分离细胞悬浮液中的不同组件。这项技术提供了增加的吞吐量,减少的处理时间以及改善的可重复性。Rotea系统的多功能性以其处理大量起始材料和更高的处理流速的能力突出显示,使其适合工业规模的生产。它与多种细胞类型和应用兼容,使其成为生物制药公司,研究机构和临床实验室的宝贵工具。
图1显示了稀释方法对Mibefradil(Posicor®)评估CYP3A4 MDI可逆性的影响。图1A表明,当30分钟的预孵育步骤与低浓度的HLM(0.05 mg/ml)连接时,低浓度的Mibefradil(0.1 µM)In- in-biN-In-biN-In-inbiTs CYP3A4活性以时间依赖性方式且无稀释。图1b显示,当与HLM(1.25 mg/ml)的25倍高25倍的HLM(1.25 mg/ml)预孵育时,Mibefradil(0.1 µM)几乎不会抑制CYP3A4,然后进行25倍稀释,然后在测量残余CYP3A44444的稀释之前。图1c表明,对于稀释方法,CYP3A4抑制在增加Mibefradil的浓度以与HLM浓度相同的比例(即。25倍至2.5 µm)。