从利雅得的一个花园收集了活的Samsum蚂蚁。群。通过在4°C下摇动12小时,在可口可乐溶液中使用1:10(w/v)研磨了冷冻的samsum蚂蚁并使用1:10(w/v)提取。在4°C离心30分钟后收集上清液。提取物使用Millipore细菌滤液通过0.8µm,0.45 µm进行灭菌,最后用0.22 µm的过滤器对提取物进行灭菌。不育和纯度测试。在皮肤刺测试中,添加了50%的甘油,以使提取物保持稳定长达一年。对于急速免疫疗法,还可以在可口可乐的溶液中制备提取物,但苯酚晶体的量减少到一半(仅0.2%)。
检测靶基因表达水平的方法。Western印迹细胞,并且可以在离心后取出细胞上清液以确定靶蛋白的浓度。然后可以获得过表达细胞和对照细胞之间蛋白质表达的差异。rt-PCR可以根据核酸提取试剂盒提取细胞RNA的过程,并且可以在逆转录和PCR扩增后获得靶基因产物。通过琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像系统检测并观察靶基因的表达结果。流式细胞仪接种细胞(5×10 5细胞/ml)成6孔板,并将其培养24小时。在细胞中添加实验所需的抗体或刺激因子,并孵育几个小时。最后,流式细胞仪可用于检测细胞周期和凋亡等。统计分析实验数据可以使用SPSS,GraphPad Prism,Flow JO和Excel等软件进行分析。
摘要:纳米囊化已成为药物输送,增强稳定性,生物利用度以及使受控的,有针对性物质递送到特定细胞或组织的最新进展。但是,传统的纳米颗粒交付面临诸如短期流通时间和免疫识别之类的挑战。为了解决这些问题,已建议将细胞膜包被的纳米颗粒作为实际替代方法。生产过程涉及三个主要阶段:细胞裂解和膜破碎,膜分离和纳米颗粒涂层。细胞膜通常使用均匀化或超声处理的低渗裂解来碎片。随后的膜片段通过多个离心步骤隔离。可以通过挤出,超声处理或两种方法组合来实现涂层纳米颗粒。值得注意的是,该分析揭示了缺乏普遍适用的纳米颗粒涂层方法,因为这三个阶段的程序在其程序上有显着差异。本综述探讨了当前的开发和细胞膜包裹的纳米颗粒的方法,强调了它们作为靶向药物递送和各种治疗应用的有效替代方案的潜力。
NucleoMag ® 质粒程序利用改良的碱性裂解方案,并在适当的缓冲条件下将核酸可逆地吸附到顺磁珠上。沉淀的细菌在缓冲液 A1 中重新悬浮。通过裂解缓冲液 A2 从细胞中释放质粒 DNA,随后使用缓冲液 S3 中和并沉淀裂解物。粗裂解物可以通过离心或使用 NucleoMag ® 清除珠(专门用于裂解物清除的顺磁珠)来清除。为了将核酸与顺磁珠结合,将结合缓冲液 PAB 和 NucleoMag ® M-Beads 添加到清除的裂解物中。磁分离后,通过专利解毒缓冲液 ERB 去除内毒素和蛋白质。使用洗涤缓冲液 AQ 和风干去除其他污染物(如盐或残留乙醇)。纯质粒 DNA 用低盐洗脱缓冲液或水洗脱,可用于任何常见的下游应用,包括转染(仅供研究使用)。NucleoMag ® 质粒试剂盒专为在自动磁棒系统上使用而设计。
1. 进化及其机制 2. 生物分子的结构和功能、原核和真核细胞结构、细胞周期、细胞信号传导和信号转导 3. 生化原理:pH、缓冲液、生物能学、糖酵解、氧化磷酸化、偶联反应、基团转移、生物能量转换器、酶学、碳水化合物、脂质、氨基酸核苷酸和维生素的代谢。 4. 孟德尔遗传、核酸的结构和功能、原核生物和真核生物的复制、转录、翻译及其调控机制 5. 免疫学:先天、体液和细胞介导免疫;抗原;抗体的结构和功能、免疫学原理的应用、疫苗、诊断学。 6. 应用生物学:重组 DNA 技术:限制和修饰酶;载体;质粒、cDNA和基因组DNA文库、聚合酶链反应、转基因动物和植物、分子诊断和菌株鉴定方法7.生态学及其原理:环境、生态系统生态学保护生物学、污染8.基本技术的原理和应用:显微镜、离心、电泳、色谱法
NucleOmag®质粒程序利用了修饰的碱性裂解方案,并结合了适当的缓冲条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。颗粒细菌被重悬于缓冲液A1中。质粒DNA通过裂解缓冲液A2从细胞中解放出来,然后使用缓冲液S3进行中和和沉淀。粗裂解物可以通过离心或使用NucleOmag®清除珠(用于裂解液清除的专门的顺磁珠)清除。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液和核瘤®M珠结合的结合添加到清除的裂解物中。磁分离后,通过获得专利的排毒缓冲液ERB去除内毒素和蛋白质。用洗涤缓冲液和空气干燥除去盐或残留乙醇等进一步的污染物。纯质粒DNA用低盐洗脱缓冲液或水洗脱,并准备好用于任何常见的下游应用(包括转染)(仅研究)。核对®质粒试剂盒已设计用于自动磁杆系统。
NTU Singapore scientists invent a coin-sized device to rapidly isolate blood plasma for diagnostics and precision medicine Scientists at Nanyang Technological University, Singapore (NTU Singapore) , have developed a coin-sized chip that can directly isolate blood plasma from a tube of blood in just 30 minutes, which is more convenient and user-friendly as compared to the current gold standard, multi-step centrifugation process.命名为Exoarc,仅在一步之内就可以通过清除超过99.9%的血细胞和血小板来实现高血浆纯度。这将大大加快对无细胞DNA和RNA分子以及通常称为细胞外囊泡的纳米颗粒的临床分析。这些颗粒通常用于筛选出是特定于某些癌症和疾病的明显标志的生物标志物。当前,分离血浆的唯一方法是使用离心机,该离心机以高速旋转血液样本,将血细胞与血浆分开。然而,即使在离心机中进行了两轮旋转后,血浆中仍然存在一些细胞和血小板,可能会分解或降解,从而释放出额外的生物含量,从而导致不需要的材料影响诊断测试的准确性。作为概念验证,该团队建造了一个便携式原型设备(尺寸为30厘米x 20厘米x 30厘米),以容纳Exoarc芯片(3.5厘米x 2.5厘米x 0.3厘米),该芯片具有大型触摸屏界面,以调整泵和烟雾的处理,以调整泵和管道,以便进行血液的群体和收集鲜血的处理。与来自新加坡国家癌症中心(NCCS),Tan Tock Seng医院(TTSH)和科学,技术与研究机构(A*Star)的临床医生 - 科学家一起,该团队通过使用Biomarkarker Panel 通过分析临床验证的EXOARC
Hermle 离心机既不防爆,也不采用气体保护,因此切勿在有爆炸危险的场所操作。离心过程中,切勿停留在离心机周围 30 cm 的安全区内,也不要在此区域内存放危险物品。不允许对易燃、易爆或放射性样品进行离心。此外,不要旋转在空气中爆炸时会以高能量相互发生化学反应的样品。切勿在没有充分安全预防措施的情况下旋转有毒或致病材料,即不允许对没有或密封有缺陷的桶/管进行离心。如果危险物品污染了离心机或其附件,最终用户应执行适当的消毒程序。如果对感染性材料进行离心,应遵守一般的通用实验室预防措施。如有必要,请联系您当地的安全官员!禁止使用不适合此离心机型号的转子运行离心机。在任何情况下,都不应在转子仍在旋转或以每秒超过 2 米的速度运转时打开离心机的盖子。
我们的新丹南微生物组粪便DNA试剂盒比我们的原始微生物组粪便技术更有效,并且旨在将纯微生物DNA的高产量与粪便样品分离,用于微生物组和宏观分析。该套件具有新型的微生物DNA柱和优化的化学性质,以更有效地去除PCR抑制剂(例如多糖,血红素化合物和胆汁盐),使用新型的微生物组裂解缓冲液和微生物组降水缓冲液在这种过程中,在这种过程中,微型机构是有效地使用了散热器的,并且是由热量进行的。蛋白质和抑制剂通过降水使用新的专有抑制剂去除缓冲液消除,随后通过离心与珠子和未溶解的样品材料结合。将纯化的裂解物与结合缓冲液混合,然后应用于微生物DNA柱。与柱结合的DNA经历了两个洗涤步骤。在干燥步骤后,可以用DNA进行NG,PCR和其他下游应用,可以用洗脱缓冲液(5 mm Tris/HCl,pH 8.5)洗脱。
核酸纯含阳离子和富集对于在遗传pro,临床试验和食品安全方面进行可靠的研究至关重要。1 - 3个核酸提取是一个复杂的过程,因为细胞中的蛋白质和多糖干扰核酸的纯阳离子,并且酶的高浓度也会降解核酸。4常规DNA puri puri cation方法(例如苯酚 - 氯仿液体 - 液体提取)需要广泛使用不环保的有机溶剂。5个商业化的DNA提取试剂盒需要重复洗脱和离心步骤,这可能导致DNA丢失。因此,开发新的DNA puri cation and Sepapairation技术非常重要,这些技术经济,有效,环保且易于操作是非常重要的。水性两相系统(ATPS)是温和的,生物相容性的,并且环保的液体 - 液体提取,分离和纯化技术,这些技术已广泛用于生物技术应用。6,7聚合物/聚合物,聚合物/盐和小分子醇/盐成分用于开发