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两栖肥大细胞：chytrid真菌感染的障碍
隶属关系：美国华盛顿特区乔治华盛顿大学生物科学系1。2史密森尼国家动物园和保护生物学研究所，美国华盛顿特区，史密森尼国家动物园和保护生物学研究所。3美国华盛顿特区乔治敦大学伦巴第综合癌症中心肿瘤学系。 4病理学，微生物学和免疫学部门以及儿科，范德比尔特大学医学院，美国田纳西州纳什维尔。 5生物科学系，美国田纳西州纳什维尔市范德比尔特大学 *通讯作者：Suite 6000，800 22 ND ST NW，华盛顿特区，20052年，美国。 电话：202-994-8076电子邮件：leon_grayfer@gwu.edu。3美国华盛顿特区乔治敦大学伦巴第综合癌症中心肿瘤学系。4病理学，微生物学和免疫学部门以及儿科，范德比尔特大学医学院，美国田纳西州纳什维尔。 5生物科学系，美国田纳西州纳什维尔市范德比尔特大学 *通讯作者：Suite 6000，800 22 ND ST NW，华盛顿特区，20052年，美国。 电话：202-994-8076电子邮件：leon_grayfer@gwu.edu。4病理学，微生物学和免疫学部门以及儿科，范德比尔特大学医学院，美国田纳西州纳什维尔。5生物科学系，美国田纳西州纳什维尔市范德比尔特大学 *通讯作者：Suite 6000，800 22 ND ST NW，华盛顿特区，20052年，美国。 电话：202-994-8076电子邮件：leon_grayfer@gwu.edu。5生物科学系，美国田纳西州纳什维尔市范德比尔特大学 *通讯作者：Suite 6000，800 22 ND ST NW，华盛顿特区，20052年，美国。电话：202-994-8076电子邮件：leon_grayfer@gwu.edu。
杀蛙壶菌 Batrachochytrium dendrobatidis 的遗传转化
蛙壶菌 ( Bd ) 是壶菌病的病原体，正在毁灭世界各地的两栖动物种群。Bd 属于壶菌谱系，这是一类早期分化的真菌，被广泛用于研究真菌进化。与所有壶菌一样，Bd 会从运动形态发展为固着生长形态，这一转变会导致其细胞骨架结构发生剧烈变化。由于缺乏用于检验有关潜在分子机制的假设的遗传工具，研究 Bd 细胞生物学、发育和致病性的努力受到限制。在此，我们报告了一种 Bd 瞬时遗传转化系统的开发。我们使用电穿孔将外源 DNA 递送到 Bd 细胞中，并在异源和天然启动子下检测到长达三代的转基因表达。我们还调整了转化方案以使用抗生素抗性标记进行选择。最后，我们使用该系统表达荧光蛋白融合，并作为概念验证，表达了肌动蛋白细胞骨架的遗传编码探针。利用活细胞成像，我们可视化了 Bd 生命周期每个阶段以及关键发育转变期间聚合肌动蛋白的分布和动态。该转化系统可以直接测试有关 Bd 发病机制的关键假设。该技术还为解答壶菌细胞、发育和进化生物学的基本问题铺平了道路。