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CRISPR/Cas 与核糖核蛋白复合物和瞬时选择端粒载体可在灰葡萄孢菌中实现高效的无标记和多重基因组编辑
CRISPR/Cas 已成为多种生物体中遗传操作的最先进的技术，能够以前所未有的效率进行有针对性的遗传改变。本文中，我们报告了在重要的坏死性植物病原体灰霉病中首次建立强大的 CRISPR/Cas 编辑，该方法基于将优化的 Cas9-sgRNA 核糖核蛋白复合物 (RNP) 引入原生质体。通过开发一种将 RNP 递送与含端粒的瞬时稳定载体共转化相结合的新策略，进一步提高了编辑产量，从而允许临时选择和方便地筛选无标记编辑事件。我们证明，与现有的基于 CRISPR/Cas 的丝状真菌方法（包括模型植物病原体稻瘟病菌）相比，这种方法提供了更高的编辑率。编辑菌株的基因组测序显示很少有额外的突变，也没有 RNP 介导的脱靶证据。端粒载体介导编辑的高性能通过随机诱变 sdhB 基因的 272 个密码子得到证实，该基因是琥珀酸脱氢酶抑制剂 (SDHI) 杀菌剂抗性的主要决定因素，方法是将 272 个密码子批量替换为编码所有 20 种氨基酸的密码子。在没有选择的情况下，所有交换的频率都相似，但 SDHI 选择允许识别新的氨基酸替换，这些替换赋予了对不同 SDHI 杀菌剂的不同抗性水平。基于 RNP 的共转化效率提高且易于操作，有望加速 B . cinerea 和其他真菌的分子研究。
过敏抗原混合物清单|全球免疫疗法
Prior Mold Mix: Absidia Ramosa, Acrothecium robust, Aspergillus (yellow, smoky, black, nidulants), curvature, epicoccecium, alternaria Botrytis cinerea, Chaetomium, Geotrichum white, gliocladium edges, Helminthosporium, humílmosporium Grisea, Microsporum Audouinii, Monilia spp。 div> microsporum aging, mucus (Mucedo, plumbeus, racemosus), Mycogene, Neurospora (gross, intermediates, Neurospora, Nigrospora oryzae, Papularia, Penicillium, Chrysogenum, expansum, Italian, Market, Roquefortiva), Pullularia, Phoma Destructiva, Phycomyces, Phoma destructiva, Phycomyces Blakesleeanus, Rhodoturola Saccharomyces, Rhodoturola Saccharomyces cerevisiae, Scopulariopsis brevical, Spondylocladium, Sporotrichum pruinosum, stachybotrys of paper, stemphylium, streptomycesgriseus, Syncephalastrum racemosum,四孢子虫，毛植物schoenleinii，trichoderma，verticillium白黑。 div>Prior Mold Mix: Absidia Ramosa, Acrothecium robust, Aspergillus (yellow, smoky, black, nidulants), curvature, epicoccecium, alternaria Botrytis cinerea, Chaetomium, Geotrichum white, gliocladium edges, Helminthosporium, humílmosporium Grisea, Microsporum Audouinii, Monilia spp。 div>microsporum aging, mucus (Mucedo, plumbeus, racemosus), Mycogene, Neurospora (gross, intermediates, Neurospora, Nigrospora oryzae, Papularia, Penicillium, Chrysogenum, expansum, Italian, Market, Roquefortiva), Pullularia, Phoma Destructiva, Phycomyces, Phoma destructiva, Phycomyces Blakesleeanus, Rhodoturola Saccharomyces, Rhodoturola Saccharomyces cerevisiae, Scopulariopsis brevical, Spondylocladium, Sporotrichum pruinosum, stachybotrys of paper, stemphylium, streptomycesgriseus, Syncephalastrum racemosum,四孢子虫，毛植物schoenleinii，trichoderma，verticillium白黑。 div>microsporum aging, mucus (Mucedo, plumbeus, racemosus), Mycogene, Neurospora (gross, intermediates, Neurospora, Nigrospora oryzae, Papularia, Penicillium, Chrysogenum, expansum, Italian, Market, Roquefortiva), Pullularia, Phoma Destructiva, Phycomyces, Phoma destructiva, Phycomyces Blakesleeanus, Rhodoturola Saccharomyces, Rhodoturola Saccharomyces cerevisiae, Scopulariopsis brevical, Spondylocladium, Sporotrichum pruinosum, stachybotrys of paper, stemphylium, streptomycesgriseus, Syncephalastrum racemosum,四孢子虫，毛植物schoenleinii，trichoderma，verticillium白黑。 div>
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欧洲绿色协议旨在减少农药的使用，特别是开发生物防治产品以保护农作物免受疾病的影响。的确，使用显着量的化学物质对环境产生负面影响，例如土壤微生物生物多样性或地下水质量以及人类健康。葡萄藤（Vitis Vinifera）被选为第一个目标作物之一，因为其经济重要性及其对杀菌剂的依赖，以控制全球主要的破坏性疾病：灰色霉菌，柔软和白粉病。壳聚糖是一种从甲壳类外骨骼中提取的生物聚合物，在包括葡萄藤在内的许多植物物种中已被用作生物防治剂，以针对多种隐脂性疾病，例如唐尼霉菌（plasmopara viticola），粉状降落（elysiphe necator）和灰色霉菌（bilyea）和灰色霉菌（Brighodis）（byeaea）。但是，其作用方式的确切分子机制尚不清楚：它是直接的生物农药效应还是间接启发活性，还是两者兼而有之？在这项研究中，我们研究了六个具有不同程度的聚合（DP）（DP）的壳聚糖，范围从低到高DP（12、25、33、44、100和470）。我们通过评估其抗真菌特性及其诱导葡萄藤免疫反应的能力来仔细检查其生物学活性。为了研究其启发性活性，我们分析了它们诱导MAPK磷酸化的能力，防御基因的激活和葡萄藤中代谢物变化的能力。我们的结果表明，DP较低的壳聚糖在诱导葡萄的防御能力方面更有效，并且具有针对灰果芽孢杆菌和viticola的最强生物农药作用。我们用DP12将壳聚糖识别为最有效的抗性诱导剂。然后，在过去三年中进行的葡萄园试验中，壳聚糖DP12已针对柔软和白粉病进行了测试。获得的结果表明，当病原体接种量很低时，基于壳聚糖的生物防治产物可能会有效地有效，并且只能与两个
大麻潜在病原体抗性的分子机制
摘要：大麻（Cannabis sativa L.）是最早栽培的作物之一，因其可生产多种用于药用的化合物以及作为食物和纤维的来源而受到重视。尽管大麻的基因组序列是可用的，但很少有研究探索病原体防御所涉及的分子机制，而且潜在的生物学途径在某些地方定义不明确。在这里，我们概述了大麻对常见病原体的防御反应，例如 Golovinomyces spp.、Fusarium spp.、Botrytis cinerea 和 Pythium spp。对于每种病原体，在总结其特征和症状后，我们探索了识别大麻抗性机制基因的研究。许多研究侧重于抗病基因的潜在参与，而其他研究则涉及其他植物，但其结果可能对大麻研究有用。重点介绍了允许识别候选防御基因的组学研究，并讨论了基于 CRISPR/Cas9 技术的产生抗性大麻物种的基因组编辑方法。根据新发现的结果，最终提出了一种大麻植物-病原体相互作用中包括免疫和防御机制的潜在防御模型。据我们所知，这是首次对大麻病原体抗性的分子机制进行综述。
大豆病原真菌的土壤田分析
本研究的主要目的是分离和形态学鉴定与大豆植株相关的真菌以及乌兹别克斯坦大豆种植田土壤层中的真菌。通过对从田间调查中采集的 160 个大豆植株部分进行真菌学研究，分离出 95 种腐生和植物病原真菌菌株，根据种类分配，其分布如下：链格孢属 3%、菊池尾孢 3%、毛霉属 3%、炭疽菌 3%、灰葡萄孢 3%、F. Heterosporum 4%、Penissulium spp. 7%、镰刀菌属。 8%、链格孢属9%、木霉属9%、黑曲霉10%、黄色镰刀菌11%、尖镰孢菌13%、镰刀菌14%。通过对土壤样品进行真菌学研究，共回收了40个真菌分离株，其种类分配如下：链格孢属、镰刀菌属、木霉属、尖镰孢菌、黄色镰刀菌、链格孢菌、镰刀菌、黑曲霉、Penissulium sp. 毛霉属。本研究获得的真菌分离株可用于促进乌兹别克斯坦大豆病害有效综合管理的发展。
将橄榄果渣升级为果胶诱导剂，用于植物免疫和疾病防护
橄榄油生产会产生大量的果渣，这些果渣通常被丢弃在土壤中，对农业和环境产生不利影响。此外，气候变化加剧了植物病害，并促进了有毒植物化学物质在农业中的使用。然而，橄榄磨坊废料具有作为可重复使用和宝贵的生物资源的巨大潜力。我们使用稀释乙醇（一种环保溶剂）提取了含有短和长寡半乳糖醛酸苷、短阿拉伯寡糖和多糖的级分。获得的提取物引发了拟南芥幼苗中植物先天免疫的关键特征，包括丝裂原活化蛋白激酶 MPK3 和 MPK6 的磷酸化以及防御基因（如 CYP81F2 、 WRKY33 、 WRKY53 和 FRK1 ）的上调。值得注意的是，用橄榄果渣提取物对成年拟南芥和番茄植株进行预处理可启动防御反应，增强其对植物病原菌灰葡萄孢和丁香假单胞菌的抵抗力。我们的研究结果强调了在橄榄油生产后期收集的两相橄榄果渣在低成本和可持续的聚糖诱导剂中进行升级再造的机会，有助于减少化学合成农药的使用。
接头组蛋白H1调节植物中的防御启动和免疫力
接头H1组蛋白在肛门和人类的发病机理中起着重要作用，但是它们在植物免疫中的功能知之甚少。在这里，我们对拟南芥H1组蛋白的三种规范变体的突变体，即H1.1，H1.2和H1.3。我们观察到双H1.1.2和三重H1.1.2H1.3（3H1）突变体对假单胞菌和灰灰灰灰静脉感染具有抗性。对3H1突变植物的转录组分析表明，H1s在调节病原体挑战的早期和晚期防御基因的表达方面起着关键作用。此外，3H1突变植物显示出活性氧的产生，并在与病原体相关的分子模式（PAMP）治疗上激活了有丝分裂原活化蛋白激酶的激活。然而，3H1突变植物对含量G22（一种众所周知的细菌pAMP启动，可诱导WT植物的耐药性增强）不敏感。启动时3H1中的防御反应与DNA甲基化的改变相关，并导致全局H3K56AC水平。我们的数据将H1作为分子网守定在植物病原体相互作用期间防御基因染色质景观的控制中。
喷雾诱导的疾病控制基因沉默取决于病原体RNA摄取的效率
最新发现表明，真菌可以占据环境RNA，然后可以通过环境RNA干扰沉默真菌基因。这一发现促使开发用于植物疾病管理的喷雾诱导的基因沉默（SIGS）。在这项研究中，我们旨在确定在各种真核微生物中SIG的效率。我们首先检查了多种致病性和非致病真菌和卵形病原体中RNA摄取的效率。我们观察到了真菌植物病原体中有效的双链RNA（dsRNA）摄取，果仁酸酯，硬化菌核，根瘤菌索拉尼，索拉尼菌，尼日尔和佛罗里达州的黄瓜和佛罗里西亚果皮，但在浓度较弱真菌，Trichoderma Virens。对于卵植物病原体，植物疫霉菌，RNA吸收有限，并且在不同的细胞类型和发育阶段有所不同。靶向毒力相关基因的DSRNA局部应用在具有高RNA摄取效率的高效率的病原体中显着抑制了植物性疾病症状，而DSRNA在低RNA效率效率低的病原体中的应用不会抑制感染。我们的结果表明，在真核微生物物种和细胞类型之间，DSRNA摄取效率各不相同。SIG在植物性疾病管理方面的成功可以在很大程度上取决于病原体的RNA摄取效率。
确定与马铃薯变质相关的真菌
GSM：0803652009抽象粮食安全是世界上最重要和最有价值的秘密。因此，这项工作审查了与马铃薯生产有关的最具挑战性的问题。调查并隔离了与爱尔兰土豆块茎索相关的有趣。以下真菌； Alternta alternaria, Aspergillus candidus, A. fumigatoides, A. Nidulans, A. Niger, A. Terreus, Aureobasidium Pullullans, Botrytis Ceinerea, Chaetomium Globosum, Cladosporicum Herbarum, Currularia Lunata, Fusarium Moniliforme, F. Oxysporicum, F. Roseolum, F. Solani-tuberosi, Mortierlla Wolfi, Mucor Pusillus, Myceliopthhora thermophila, R. Stolenfer, Rhizophus Oyzae, Pennicilium Chrysgen, Paecilmyces Varioti, Rhizopus nigricans, scopuropsis breakaulis, syncephalastrum racemosmosum, Trichothecium Roseum and Ulacladium从腐烂的块茎中分离出宪章。根茎偷窃者的百分比最高，其次是尼日尔曲霉和替代品替代品。释放的致病性测试是，R。stolenfer是最有毒的，其次是F. oxyspoum，而Racemosmos M. caremosmos是最不毒的fangus。应鼓励使用良好的存储设施，适当的控制措施和改善爱尔兰的马铃薯量片，以减少储存的爱尔兰马铃薯交易的破坏。这样，在世界上进行粮食安全不仅将不仅尼日利亚，而且撒哈拉以南非洲将是一个忘记的问题。关键字：土豆块茎，牙齿，储存，腐烂，市场，预防，挑战，安全
通过对脂质膜的差异影响，脂肽和表面素的不同生物防治活性
脂肽具有化学农药的有希望的替代品，用于植物生物防治目的。我们的研究通过检查它们与脂质膜的相互作用，探讨了脂肽表面蛋白（SRF）和富霉素（FGC）的独特植物生物防治活性。我们的研究表明，FGC具有直接的拮抗活性，对辣椒粉，并且在拟南芥中没有明显的免疫吸收活性，而SRF仅表现出刺激植物免疫力的能力。它还揭示了SRF和FGC对膜完整性和脂质堆积的影响。SRF主要影响膜的物理状态，而没有明显的膜通透性，而FGC透化膜而不会显着影响脂质堆积。从我们的结果中，我们可以提出脂肽的直接拮抗活性与它们透化脂质膜的能力有关，而刺激植物免疫的能力更可能是它们改变膜的机械性能的能力。我们的工作还探讨了膜脂质成分如何调节SRF和FGC的活动。固醇对两种脂肽的活性产生负面影响，而鞘脂会减轻对膜脂质填料的影响，但会增强膜泄漏。总而言之，我们的发现强调了考虑膜脂质填料和泄漏机制在预测脂肽的生物学作用中的重要性。它还阐明了膜组成与脂肽的有效性之间的复杂相互作用，从而提供了靶向生物控制剂设计的见解。