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全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
（a）实验设置和集成的概述。（b）1p染色体上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi主题用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。（c）所有修复频率≥10％的ASISI位点的条形图，每个位点的修复频率（目标蛋白质和方法）颜色为颜色。通过增加绝对修复频率（即任何数据集中的最高频率）来订购（在X轴上）。每个站点，通过增加每个数据集的维修频率（前后；即未堆叠栏）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。（d）一个代表性核的共聚焦图像显示DAPI，RAD51 DAMID M6 A-TRACER和内源性γH2AX免疫荧光染色。（e）信号共定位（Manders的A和B每个核）的定量，n = 33核。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
crispr/cas9综合HIV-1的消融累积前病毒DNA圈，具有改革的长期重复
抽象基因编辑可用于从宿主细胞基因组中切除人类免疫障碍病毒1型（HIV-1）病毒，可能消除感染。在这里，使用急性或潜在地感染HIV-1并用长末期重复（LTR） - 靶向CRISPR/CAS9处理的细胞，我们表明切除的HIV-1病毒持续了几周，并且可能在圆形分子中重新排列。尽管在HIV-1复制过程中自然形成了循环前病毒DNA，但我们观察到基因编辑可能会增加恢复的LTR的病毒DNA圆圈。通过未感染的细胞转染，回收了这些外染色体元素并探测残留活性。我们发现它们可以在Tat和Rev.尽管确定基因编辑是消除HIV-1感染的强大工具，但这项工作突出了，为了实现这一目标，必须将LTR裂解几个部分，以避免残留活动并最大程度地减少基因组不稳定性的重新启动的风险，这可能是由CAS9的cas9 cas9 cas9 of cas9造成的。
检测大肠菌群的新标准
1.00850Chromocult®Coliform琼脂ES用于食品和动物饲料中大肠菌菌和大肠杆菌的检测。e是提高选择性的，因为食品基质中的预期细菌背景菌群较高，例如生碎牛肉，生碎鸡肉和生牛奶（经AOAC验证）。44657 ECD杯琼脂此大肠杆菌直接琼脂中的胆汁盐混合物广泛抑制伴随植物群的非渗透性肠道。荧光底物杯子的裂解和阳性测试证明了大肠杆菌的存在。1.10620Fluorocult®LMX肉汤，用于通过发色和荧光过程同时检测水，食物和乳制品中大肠菌细菌和大肠杆菌。81938 Hicrome™大肠菌琼脂推荐用于同时检测水和食物样品中的大肠杆菌和总大肠菌群。发色混合物含有两个发色底物，鲑鱼 - 盐和X-葡萄糖苷。大肠菌群产生的酶β-D-半乳糖苷酶裂解了鲑鱼，从而导致鲑鱼变成大肠菌群的红色。大肠杆菌裂解X-葡萄糖醛酸的酶β-D-葡萄糖醛酸苷酶（深蓝色至紫色的菌落与两种活性结合使用）。70722 Hicrome™大肠杆菌琼脂B hicrome E. Coli琼脂B用于食品中大肠杆菌的检测和枚举，而无需在膜过滤器上或通过吲哚试剂进行进一步确认。大多数大肠杆菌菌株可以通过存在高度特异性大肠杆菌的酶葡萄糖醛酸酶来区分其他大肠菌菌。大肠杆菌细胞吸收X-葡萄糖醛酸酯，细胞内葡萄糖醛酸酶分裂发色团和葡萄糖醛酸苷之间的键。释放的发色团给出了菌落的蓝色。73009 Hicrome™ECC琼脂Hicrome ECC琼脂是一种差异培养基，用于推定大肠杆菌和其他大肠菌群中的食品和环境样品中的其他大肠菌群。发色混合物包含两个染色体，作为X-葡萄糖醛酸和鲑鱼 - 盐。X-葡萄糖醛酸是由大肠杆菌产生的酶β-葡萄糖醛酸酶裂解的。鲑鱼 - 盐 - 由大多数大肠菌群（包括大肠杆菌）产生的酶半乳糖苷酶裂解。大肠杆菌菌落的颜色：蓝色/紫色85927 Hicrome™ECC选择性琼脂hicrome ecc选择性琼脂是一种选择性（tergitol作为抑制剂）培养基，建议同时检测水和食品样品中的大肠杆菌和大肠杆菌。成分甚至有助于共同受伤的大肠菌群迅速生长。发色混合物包含两个发色底物，作为鲑鱼 - 果胶和X-glucuronide。大肠菌群产生的酶β-D-半乳糖苷酶裂解了鲑鱼，从而导致鲑鱼变成大肠菌群的红色。大肠杆菌裂解X-葡萄糖醛酸酶产生的酶β-D-葡萄糖醛酸苷酶。大肠杆菌由于鲑鱼和X-glucuronide的裂解而形成了深蓝色至紫色的有色菌落。
Sidhu, N. S.、Pathy, T. L. 和 Likhithashree, T. R. 2025. MicroRNA 生物发生、机制及其在作物改良中的作用概述。Vigyan Varta
与编码基因类似，miRNA 由 RNA 聚合酶 II 从 miRNA/MIR 基因转录成长的初级转录本，称为初级/pri miRNA（图1）。此后，pri-miRNA 被 RNaseIII 样酶（称为 DICER-LIKE (DCL 1)）与其他蛋白质一起切割成前体/前 miRNA。这些前 miRNA 进一步由 DCL1 加工成 20-24 个核苷酸长的 miRNA：miRNA 双链体。然后，双链体在 3' 端被 HUA 增强子 1 甲基化，并通过 EXPORTIN-5 输出到细胞质中。然后将双链体加载到含有 ARGONAUTE (AGO) 蛋白的 RNA 诱导沉默复合物 (RISC) 中。来自 miRNA：miRNA 双链中只有一条 RNA 链被加载到 RISC 上，而另一条链被小 RNA 降解核酸酶降解。最后，加载的 miRNA 将 RISC 靶向其互补的 mRNA，因此，根据其与目标 mRNA 的互补程度，它可能导致两种结果。如果 miRNA 与目标 mRNA 高度同源，则可能导致 mRNA 的位点特异性裂解，而与目标 mRNA 的弱碱基配对则导致翻译抑制（图1）。
DNA 测序
Sanger 测序或链终止或双脱氧方法基于 DNA 聚合酶的两个特性：聚合酶合成单链 DNA 模板的精确正确的互补拷贝，并且它们可以使用 2'，3'- 双脱氧核苷酸三磷酸 (ddNTP) 作为底物。双脱氧核苷酸的 3' 端缺少羟基并且只有氢，因此一旦该核苷酸在生长点被掺入链中，链的延长就会停止在 ddNTP 处并且不再充当链延长的底物。在实践中，使用 DNA 聚合酶 I 的 Klenow 片段，因为它不具有 5'- 3' 外切酶活性，这是完整酶的特性。所有 DNA 合成都需要引物，因此化学合成的寡核苷酸被用作引物，该引物退火到靠近需要测序的序列的位置。 （克列诺片段是大肠杆菌的DNA聚合酶I被蛋白酶枯草杆菌蛋白酶酶切时产生的一个大的蛋白质片段，它保留了5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，用于去除预编码核苷酸并进行校对，但失去了5'→3'外切酶活性，即引物去除活性）。
OPA1处理在小鼠发育中是可赋予的，但在线粒体心肌病中具有保护性
线粒体融合和裂变伴随着压力和代谢需求改变的适应性反应。内膜融合和CRISTAE形态发生取决于视觉萎缩1（OPA1），它以不同的同工型表达，并从膜结合的裂解，长到可溶的短形式。在这里，我们通过生成仅表达一种可裂解的OPA1同工型或不可裂解的变体来分析OPA1同工型和OPA1处理的物理学作用。我们的结果表明，单个可裂解或不可裂解的OPA1同工型的表达可保留胚胎发育和成年小鼠的健康。OPA1处理在代谢和热应力下是可分配的，但可以延长寿命，并预防缺乏OXPHOS缺陷COX10 - / - 小鼠中的线粒体心脏肌病。从机械上讲，OPA1处理的损失会破坏线粒体生物发生和线粒体之间的平衡，从而抑制了Cox10 - / - 心脏中心脏肥大的生长。我们的结果突出了OPA1加工，线粒体动力学和心脏肥大的代谢的关键调节作用。
核糖核酸酶A（rnase a）（冻干形式）
RNase A是一种用于分子生物学应用的牛胰腺内切核酸酶。RNase A的主要应用是从制备质粒DNA以及提取质粒DNA中去除RNA。它也用于去除非特异性结合的RNA； RNase保护分析； RNA序列的分析以及蛋白质样品中包含的RNA的水解。rNase A在嘧啶核苷酸的3¢磷酸盐处攻击。PG-PG-PC-PA-PG的序列将被裂解以得到PG-PG-PCP和A-PG。最高的活性用单链RNA表现出来。RNase A是一个包含4个二硫键的单链多肽。 rnase a可以通过烷基化12或119的烷基化来抑制，这些烷基化存在于酶的活跃部位中。 RNase A的活化剂包括钾和钠盐。 Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质RNase A是一个包含4个二硫键的单链多肽。rnase a可以通过烷基化12或119的烷基化来抑制，这些烷基化存在于酶的活跃部位中。RNase A的活化剂包括钾和钠盐。 Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质RNase A的活化剂包括钾和钠盐。Molecular mass: 13.7 kDa (amino acid sequence) Extinction coefficient: E1% = 7.1% (280nm) Isoelectric point: pI: 9.6 Optimum temperature: 60°C (activity range of 15 - 70°C) Optimum pH: 7.5 (activity range of 6 - 10) Inhibitors: Ribonuclease inhibitor Activity (Kunitz): ≥60 units/mg蛋白质