寡脱氧核苷酸的杂交特性已经以多种技术为特征(1-4)。在适当条件下,寡核苷酸与DNA中的特定位点杂交(4,5)。此外,可以将完美的碱基配对的核苷酸双链体与包含单个不匹配的碱基对(4-6)的复式区分开。我们利用寡核苷酸的杂交特性在开发一种分离特定克隆的DNA序列的方法中(5)。我们的一般方法是化学合成寡核苷酸的混合物,这些寡核苷酸代表给定蛋白的一小部分氨基酸序列的所有可能的密码子组合。在该混合物中必须是与蛋白质该部分编码的DNA相结合的一个序列。这种互补的寡核苷酸将与来自蛋白质的编码区域的DNA形成完美的基础复式,而混合物中的其他寡核苷酸将形成不匹配的双链体。在严格的杂交结合下,只有完美匹配的双链体将形成,从而允许将寡核苷酸的混合物用作特定的杂交探针。混合序列寡核苷酸探针应允许分离出已知氨基酸序列的任何蛋白质的克隆DNA序列。我们已将这种方法应用于人A2-微球蛋白(AM)的克隆cDNA序列的分离。AM是一种从尿液中分离出来的小蛋白(分子量11,800)。随后,发现A3〜m与主要组织相容性基因座的细胞表面抗原相关(8、9)。A2M的确切功能尚不清楚,尽管最近的证据表明该分子可以稳定辅助蛋白的三级结构(10)。氨基酸序列已从包括人类在内的四个物种中定位为F2M(11)。我们已经使用氨基酸序列来设计探针,以分离到人类2M的克隆cDNA。
我们具有编码PDE4B4的孤立cDNA,这是一种新的营地磷酸二酯酶(PDE4),具有新的特性。PDE4B4的氨基酸序列表明它是由PDE4B基因编码的,但它与先前隔离的PDE4B1,PDE4B2和PDE4B3同工型不同,它通过存在17个氨基酸的新N端区域而存在。PDE4B4包含上游保守区域1(UCR1)和UCR2调节单元,它们是“长” PDE4同工型的特征。RNase保护表明,PDE4B4 mRNA优先在肝脏,骨骼肌和大脑的各个区域中表达,这与其他已知的PDE4B长形式,PDE4B1和PDE4B3的组织分布模式不同。在变性条件下,PDE4B4 cDNA在COS7细胞中的表达产生了85 kDa的蛋白质。重组,COS7细胞表达的PDE4B4的亚细胞分级表明该蛋白质位于
全身治疗仍然是晚期肝细胞癌 (HCC) 的主要治疗方法。尽管如此,其在控制肝内病变方面的疗效有限。肝动脉灌注化疗 (HAIC) 是一种将局部治疗与全身抗肿瘤作用相结合的治疗方法,旨在有效控制肝脏内癌性病变的进展,尤其是对于门静脉肿瘤血栓形成 (PVTT) 患者。将 HAIC 与抗程序性细胞死亡蛋白 1 (抗 PD-1) 单克隆抗体 (mAb) 免疫疗法相结合有望成为一种新型治疗方法,旨在增强局部肿瘤部位内的反应并实现延长生存期的优势。为了评估各种治疗方式的有效性、安全性和适用性,并解决 HAIC 增敏免疫疗法疗效的潜在分子机制,我们回顾了有关 HAIC 与抗 PD-1 mAb 疗法相结合的文献。
摘要:本文介绍了一个软件套件,可用于在网格气候数据中客观评估热带气旋(TCS)。使用从6小时数据得出的旋风轨迹,将一组全面的指标定义为系统地比较和对比产品。除了年度TC气候外,还要注意风暴发生和强度的空间和时间模式。可以在全球范围或区域领域进行评估。简单地将“记分卡”简单地化允许快速评估。我们展示了该套件启用的三个键文件。首先,我们比较了七个电流新一代重新分析中TC的表示,并得出结论,高分辨率模型和TC特定同化的模型包含更准确的风暴气候。第二,使用自由运行的地球系统模型(ESM),我们发现在可变分辨率的配置中需要进行完整的盆地修复来充分模拟北大西洋TC频率。上游对北非的修复对模拟风暴的发生几乎没有好处,但是空间的起源模式得到了改善。我们还表明,由ESM模拟的TCS可以对气候模型中的单个参数化高度敏感,北大西洋TC指标根据所使用的Morrison -GetTelman Microphysics包的版本而变化很大。
肿瘤抗原必须具有足够的免疫原性来诱导抗体产生,并且免疫原性是由主要的组织相容性复合物(MHC)编码的组织相容性抗原的表现强度确定的。并非每种肽都具有与每个MHC抗原相对于每个MHC抗原的强度强大,因此抗原表现和随后的免疫反应取决于宿主动物中存在的组织相容性抗原。通过增加有效表现的可能性和产生的免疫反应,组织相容性抗原的杂合性增强了最初在动物模型(1)和人类中所示的感染性疾病和癌症的保护机会(2)。在这里,我们希望强调这些事实,这是为了通过动物的免疫接种,随后是杂交瘤技术,他们希望提高其单克隆抗体开发计划的效率。对实验动物的免疫,通常是小鼠,具有已知或未知的免疫原子(如癌症抗原)是最常见的单克隆抗体来源,用于诊断或治疗目的(3,4)。一旦动物产生了单克隆抗体,杂交瘤技术最常见的生产(5)。这不是一种故障方法,已经描述了许多修改,导致不同的免疫方案旨在刺激动物的免疫反应(6)。重点是增加抗原的免疫原性(7)和成功(8)。
量子信息理论与密码学的婚姻已经引起了一系列规程,这些方案利用了独特的量子现象,最著名的是无关原则[1,2,3],以实现在经典环境中无法实现的安全性。这样一个概念,即无法统一的加密,可以利用量子状态的不可分割性,以防止对手复制加密消息。术语“无统治加密(UE)”于2003年首次出现在Gottesman [4]的论文中。爱丽丝将经典消息加密到量子状态。引入了一个安全定义,基本上指出“如果鲍勃决定解密有效,那么夏娃,鉴于钥匙,只有关于宣传的信息可忽略不计。”安全定义是根据不同消息的加密之间的痕量距离提出的。在同一框架中,Leermakers和škorić通过钥匙回收设计了UE方案[5]。Broadbent和Lord [6]基于克隆游戏引入了修改的安全定义,并在随机的Oracle模型中构建了UE。在[7、8、9]中引入了几个UE方案,并在[10,11]中给出了UE的可行性和局限性结果。到目前为止,UE已在离散变量(DV)量子系统中专门研究。,在量子密钥分布(QKD)领域,连续变量(CV)量子系统已成为DV的有吸引力的替代品[12、13、14、14、15、15、16、17、18、19、20、21]。在本文中,我们提出了与连续可变状态一起使用的第一个不封合的加密方案。CV不需要昂贵的单光子探测器,并且可以使用低损失的电信波长(1310nm,1550nm)的优势,这使得可以利用数十年的连贯光学通信技术经验。超出QKD,实用的优势更普遍地用于其他量子信息处理应用程序,这引起了人们对将基于DV的加密思想转化为简历域的重大兴趣。我们在[6]的UE框架中提供了安全证明。事实证明,将UE从离散变为连续变量具有许多非平凡方面。在构造方面,需要调整方案的参数,以使得可以满足解密性和不荡情性。在验证技术方面,我们引入了许多“游戏啤酒花”,以将克隆游戏(在UE安全定义中具有特色的克隆游戏)连接到CV一夫一妻制的游戏中,最近证明了获胜概率上的上限[22]。此外,有必要稍微修改
*相应的作者。sahan@mskcc.org(N。Saha),nikolovd@mskcc.org(d.b.Nikolov)。信用撰稿人贡献声明Nayanendu Saha:概念化,方法论,调查,验证,写作 - 审查和编辑。du-san Baek:方法,调查,数据策划,验证。Rachelle P. Mendoza:资源,数据策划,调查。Dorothea Robev:调查,方法论。Yan Xu:调查,方法论。 Yehuda Goldgur:方法,软件,验证。 M. Jason de la Cruz:资源,数据策划。 Elisa de Stanchina:监督,方法论,调查。 Peter W. Janes:正式分析。 Kai Xu:方法,软件,验证。 Dimiter S. Dimitrov:监督,正式分析,资金获取。 Dimitar B. Nikolov:正式分析,资金获取,写作 - 原始草案,监督,项目管理,验证。Yan Xu:调查,方法论。Yehuda Goldgur:方法,软件,验证。M. Jason de la Cruz:资源,数据策划。Elisa de Stanchina:监督,方法论,调查。Peter W. Janes:正式分析。Kai Xu:方法,软件,验证。 Dimiter S. Dimitrov:监督,正式分析,资金获取。 Dimitar B. Nikolov:正式分析,资金获取,写作 - 原始草案,监督,项目管理,验证。Kai Xu:方法,软件,验证。Dimiter S. Dimitrov:监督,正式分析,资金获取。Dimitar B. Nikolov:正式分析,资金获取,写作 - 原始草案,监督,项目管理,验证。
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基,并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶,使用3-5毫升PBS,对于T75烧瓶,使用5-10毫升。然后,使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞,T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后,将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们,然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液,将细胞重悬于新鲜培养基中,然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
C11D5.3是一种特异性BCMA的IgG1小鼠单克隆抗体,它是多发性骨髓瘤和淋巴瘤免疫疗法的靶标。C11D5.3 SCFVC11D5.3 SCFV
基因改造单细胞的同质性对于许多应用(例如细胞系开发、基因治疗和组织工程,尤其是再生医学应用)而言是必需的。缺乏有效分离和表征 CRISPR/Cas9 工程细胞的工具被认为是这些应用中的一个重大瓶颈。尤其是蛋白质检测技术不兼容,无法在没有先决条件大规模克隆扩增的情况下确认蛋白质表达变化,这在许多应用中造成了僵局。为了改善工程细胞的表征,我们提出了一种改进的工作流程,包括基于高产量荧光特性的单细胞打印/分离技术、基因组编辑筛选(测量测定)、评估改变的基因表达的 mRNA rtPCR 和一种称为乳化偶联的多功能蛋白质检测工具,以提供高含量、统一的单细胞工作流程。该工作流程以 RANKL 敲除永生化间充质干细胞的工程和功能验证为例,这些细胞的骨形成能力发生了改变。由此产生的工作流程经济实惠,无需大规模克隆扩增细胞,整体克隆效率高于 CRISPR/Cas9 编辑细胞的 30%。尽管如此,由于单细胞克隆在细胞发育的早期高度并行阶段得到全面表征,包括 DNA、RNA 和蛋白质水平,因此该工作流程可提供更多成功编辑的细胞以供进一步表征,从而降低开发过程中后期失败的可能性。