一个多世纪以来,科学界一致认为,终末分化细胞的细胞核无法控制后代的发育。多莉的诞生推翻了这一理论,多莉是第一只使用成年体细胞作为核供体通过核移植产生的动物。随着这一范式转变,各种各样的动物都通过体细胞核移植被克隆出来。再加上现代基因组工程技术,体细胞核移植已成为生产转基因农场动物的首选方法。这为研究基因功能开辟了新的机会,并促成了各种人类状况和疾病的动物模型的建立,或改善了牲畜的健康。生殖 (2021) 162 F1–F10
摘要 本文致力于开发一种对脑肿瘤(包括胶质瘤、脑膜瘤、垂体瘤和非肿瘤)的 MRI 图像进行分类的模型。数据集是从 Kaggle 收集的。然后,它被组织起来并上传到 GitHub。这项工作利用了 Python 的不同库,即 Matplotlib、NumPy 和 Sci-Kit Learn。Google Collaboratory 已用于执行环境,存储要求有限,为 108 GB。图像从名为“Brain-Tumor”的 GitHub 存储库克隆到 Google Collaboratory。该存储库包含一个对应于所有指定类型肿瘤图像的数据集。支持向量机算法已用于分类。所提出模型的准确率在 84% 到 92% 之间。关键词:Google Collab、图像分类、MRI 图像、机器学习、存储库、支持向量机 (SVM)
大规模并行报告基因检测 (MPRA) 是一种高通量方法,用于评估数千个候选顺式调控元件 (CRE) 的体外活性。在这些检测中,候选序列被克隆到由独特 DNA 序列标记的报告基因的上游或下游。然而,标签序列本身可能会影响报告基因的表达,并导致测量的顺式调控活性出现重大潜在偏差。在这里,我们提出了一种基于序列的方法来校正标签序列特异性效应,并表明我们的方法可以显著减少这种变异源并提高 MPRA 对功能性调控变体的识别。我们还表明我们的模型可以捕获与 mRNA 转录后调控相关的序列特征。因此,这种新方法不仅有助于提高 MPRA 实验中对调控信号的检测,而且还有助于设计更好的 MPRA 协议。
姓氏“ Sectionin”源自Sectionin受体,该受体是该家庭中首次克隆的。3,1975年,Sasaki等。33求解了胰高血糖素的第一个X射线晶体结构,一个家族B GPCR。34 The family corresponds to group B of the A – F system of classi cation, 3 and comprises 15 members including: vasoactive intestinal peptide receptors (vIPR1, vIPR2), glucagon- like peptide receptors (GLP1R, GLP2R), adenylate cyclase acti- vating polypeptide receptor (PAC1/ADCYAP1R1), growth- hormone-releasing hormone receptor (GHRHR), calcitonin and calcitonin-like receptors (CALCR, CALCRL), gastric inhibi- tory polypeptide receptor (GIPR), secretin receptor (SCTR), corticotropin-releasing hormone receptors (CRHR1, CRHR2), glucagon receptor (GCGR), and parathyroid hormone受体(PTHR1,PTHR2)。3,31这15个受体共享21和
这种转变还通过对系统硬件(包括集成电路、无源元件(电阻器、电容器、电感器)和印刷电路板)的攻击,为我们的通信基础设施带来了新的漏洞。硬件漏洞可能包括:• 在设计过程中插入恶意功能,• 通过因硬件设计弱点或架构缺陷而存在的非法接入点更改系统行为,• 通过非预期的通信(侧)通道提取敏感或秘密信息,• 通过逆向工程窃取知识产权,• 伪造,包括回收、克隆或重新标记的组件或声称是正品的系统,• 修改以插入隐藏功能。硬件安全性一直是一个问题,并且正在开发许多缓解策略。没有一种方法可以解决这个问题,但新方法可以增强或改进现有方法。
尽管意大利反对转基因产品,但意大利农业、食品和林业政策部长以及主要农民协会(Coldiretti、Confagricoltura 和 Cia)、农业食品行业参与者和科学家都支持创新生物技术,例如基因组编辑。意大利专注于基因组选择以改善动物育种。意大利不生产用于商业目的的克隆动物。转基因动物和克隆主要用于医疗或制药应用。克雷莫纳 (CR) 有一家基因研究中心 Avantea Ltd.,专门从事实验和研究目的的动物克隆。Avantea 还对猪进行基因组编辑,用于生物医学研究。意大利商业化生产源自微生物生物技术的食品成分。意大利公司致力于研究各种细菌、酵母、真菌和酶,用于食品和饮料、制药、生物工业和兽医领域。
系统和JAVA Codon Adaptation Tool 进行密码子适配。优化后的序列由上海生工生物工程有限公司通过 BamH1 和 XhoI 酶切位点合成并克隆到来自 pGEX-6p-1 质粒(美国 Novagen)的表达载体中。将重组质粒 pGEX-6p-1-Mpro 转化的 E. coli BL21(DE3)细胞(美国 Invitrogen)在 2 L Luria-Bertani 培养基中于 37 ℃ 下生长至 OD600 达到 0.6 后,加入 0.2 mM IPTG,16 ℃ 诱导重组蛋白表达过夜。将菌体悬浮在 PBS 中,超声波破碎。离心收集上清液并与谷胱甘肽 Sepharose 4B 琼脂糖(美国 GE Healthcare)混合,4 ℃ 下孵育 3 h。然后用 PBS 清洗珠子,并加入 preScission 蛋白酶 (GE) 以切割 GST 标签。含有
姓氏“ Sectionin”源自Sectionin受体,该受体是该家庭中首次克隆的。3,1975年,Sasaki等。33求解了胰高血糖素的第一个X射线晶体结构,一个家族B GPCR。34 The family corresponds to group B of the A – F system of classi cation, 3 and comprises 15 members including: vasoactive intestinal peptide receptors (vIPR1, vIPR2), glucagon- like peptide receptors (GLP1R, GLP2R), adenylate cyclase acti- vating polypeptide receptor (PAC1/ADCYAP1R1), growth-激素释放激素受体(GHRHR),降钙素和类钙蛋白样受体(CALCR,CALCRL),胃抑制性多肽受体(GIPR),分泌蛋白受体(SCTR),cortropin-释放激素受体受体(CRHR1,CRHR1,CRHR1,GLCGOGAGON),GCRONORN HYRORS(GLCGOGANER)(GLCGOGAGON HYRORS HYRORS(GLCGRANER))(CRHR1,GLCGOGANS,GLCRONER HYRORS HYRORS(GLCRONER))受体(PTHR1,PTHR2)。3,31这15个受体共享21和
摘要。在澳大利亚昆士兰州北部爆发的中期死亡综合症期间,对 24 只濒死对虾进行了调查,首次从中培养出 14 株支原体分离株。从对虾的鳃附属物、大脑和眼睛中分离出支原体。支原体在含有 0.5 至 3.0% 氯化钠和 20% 胎牛血清的改良 Frey 培养基中,在有或没有 CO2 的情况下在 20 至 37°C 之间生长。在 37°C 和 5% CO2 下观察到最佳生长。所有菌株都经过大小过滤和克隆,并将它们的形态、生化和生物分子特征与以前描述的支原体种的特征进行了比较。结果表明,这些菌株属于 2 个新种,为其指定了临时名称支原体 P1 (MPI) 和支原体 P2 (MP2)。两种支原体都能发酵大多数测试的碳水化合物,但不能水解精氨酸和尿素。MP1 产生薄膜和斑点,具有高磷酸酶活性,但 MP2 不会产生薄膜或斑点,也没有磷酸酶活性。两种物种都能裂解绵羊红细胞。从 MP1 DNA 中制备基因组文库(Mbol 消化)并克隆到 pUC19 中。使用从纯化的 MPI 制备的探针进行菌落杂交,以识别感兴趣的菌落。通过用 EcoRI 和 HindIII 消化从重组质粒中回收 MP1 DNA 片段。该 DNA 用于制备随机引物探针,用于与来自 MP1、MP2、M. bovis、M. dispar、M. agalactiae、M. bovjyenitalium、M. ovipneumonjae、支原体组 7、M. aryinini 和属于不同属的细菌的固定 DNA 进行点印迹杂交分析。该探针仅与来自 MP1 的基因组 DNA 发生反应。为了进一步提高灵敏度,设计了一种 MP1 特异性聚合酶链反应 (PCR) 检测方法,并产生了 254 bp 扩增子,可将 MP1 与所有其他测试的支原体 DNA 区分开来。使用 DNA 探针和 PCR 检测方法,从患病虾中分离出的大多数支原体可指定为菌株 MP1 (11/14,-80%)。
摘要 动机:CRISPR/Cas9 技术已被开发为最有效和最广泛使用的基因组编辑工具,用于修改众多植物的基因组,其中双链 DNA 中的 cas9 切割由单个向导 RNA(sgRNA)中包含的 20 个核苷酸序列驱动。然而,使用 CRISPR/Cas9 同时编辑多个目标仍然是该领域的技术挑战(Ma 等人,2014 年)。方法:在本研究中,使用 Golden Gate Assembly 克隆策略生成多个 CRISPR/cas9 编辑结构以用于蓖麻植物。模块化克隆系统使用 IIS 型酶在其识别位点外切割,从而允许有效组装具有兼容突出端的 DNA 片段,从而同时促进多个序列的正确取向(Engler 等人,2014 年)。我们的主要目标是获得一种遗传构建体,允许在同一个质粒载体中表达两个 sgRNA 和 cas9 核酸酶,以便通过农杆菌感染转化蓖麻。选择了两个针对 FAH12 蓖麻羟化酶的 CRISPR 靶标以避免可能的脱靶。这些靶标包含在 sgRNA 中并克隆到 0 级质粒中,每个质粒两侧都有 BsaI 酶的限制位点。Golden Gate 1 级反应包括几个 BsaI 消化和连接循环,将 U6 启动子与两个 sgRNA 分别组装到 1 级质粒中,两侧都有 BpiI 限制位点。同时,cas9 酶在双强 35S 启动子的控制下克隆,随后是来自 0 级质粒的胭脂碱合酶 (nosT) 终止子,包括这些元素,克隆到另一个 1 级质粒中,两侧也有 BpiI 限制位点。然后,用 BpiI 消化所有 1 级元件(U6-sgRNA1、U6-sgRNA2、2x35S-cas9-nosT)时,会出现兼容的突出端,这些突出端可以以正确的顺序和方向组装成 2 级结构。最终结果是 2 级质粒,其中包括 FAH12 羟化酶的 CRISPR/cas9 多重基因组编辑所需的所有元件。该构建体将转移到农杆菌中,以便以后进行蓖麻胚转化。