用途:EpiNext™ CUT&RUN Fast Kit 旨在从低输入细胞/染色质中快速富集与蛋白质(组蛋白或转录因子)复合的特定 DNA,并通过 Illumina 平台的下一代测序或 qPCR 等其他方法识别或绘制体内蛋白质-DNA 相互作用。该试剂盒的创新工作原理、优化的协议和组件允许在最小化非特异性背景水平的情况下捕获目标蛋白质/DNA 复合物。捕获的 DNA 特别适合构建非条形码(单重)和条形码(多重)文库,以更少的偏差和更高的分辨率绘制目标蛋白质-DNA 相互作用区域。输入量:对于细胞,通常,每个反应的量可以是 2 x 10 3 到 2 x 10 5 个细胞。为了获得最佳制备效果,细胞输入量应为 1 x 10 5 ,尽管从 EpiNext™ CUT&RUN Fast Kit 获得的修饰组蛋白测序数据只需 500 个细胞即可获得。对于从细胞或组织中分离的染色质,每个反应的量可以是 0.1 µg 至 5 µg 的染色质。为了获得最佳制备效果,染色质输入量应为 2 µg。起始材料:起始材料可以包括各种哺乳动物细胞样本,例如来自烧瓶或培养皿的培养细胞、原代细胞或从血液、体液、新鲜/冷冻组织(预制备的染色质)中分离的稀有细胞群,以及从整个细胞群和胚胎细胞中分选出的特定细胞等。抗体:抗体应为 ChIP 级,以便识别与 DNA 或其他蛋白质结合的蛋白质。如果您使用的抗体尚未经过 ChIP 验证,则应使用适当的对照抗体(例如抗 RNA 聚合酶 II、抗 H3K4me3 或抗 H3K27me3)来证明抗体适用于 ChIP。内部对照:此试剂盒中提供了阴性和阳性 ChIP 对照。注意事项:为避免交叉污染,请小心地将样品或溶液移入 PCR 管中。使用气溶胶屏障移液器吸头,并在液体转移之间始终更换移液器吸头。整个过程中都要戴手套。如果手套和样品接触,请立即更换手套。
我们将follistatin(FST)344基因的聚乙烯胺(PEI)复合质粒注射到43位男女的43名成年人类志愿者,年龄23-88岁,中位年龄为46岁,以测试这种传递方法和靶基因的安全性和效果,作为反效率longe longe longe lorge longe longe longe longe longe longe longe longe longe longe longe interivessenty。患者在质粒载体中接受皮下注射到50 r g fst的腹部脂肪中。我们在治疗前和三个月后立即评估了几个指标:血清FST,身体组成,炎症的血液生物标志物,葡萄糖代谢,脂质代谢和表观遗传年龄的估计。血清FST,通过酶联免疫测定法测量,在第三个月的基线平均值从8.58 ng/ml的基线平均值增加到24.03 ng/ml(p = 0.001),后者在很大程度上是Suprypaperagyologicaly值。通过双能X射线吸收量扫描测量的身体成分,显着改善,平均无脂肪质量增加1.96磅(P = 0.001),平均体贴降低为-0.87%(P = 0.01)。最大无脂肪质量增加为12.15磅。高敏感性C反应蛋白和同型半胱氨酸,两种常见的炎症标志物,均显示出潜在降低的迹象,以改善。葡萄素代谢标记物趋向于临床上的不足增加。脂质面板的变化很小,在统计学上没有显着性,尽管少数受试者的低密度脂蛋白经历了很大的增加。端粒长度趋向增加,在老年阶段逐渐逐渐逐渐增加,但DunedInpace的衰老率没有明确的变化证据。内在的表观遗传年龄趋向于减少,外在表观遗传年龄(EEA)在统计学上显着降低了-7。10年的显着降低(p = 0.004);两种结果在老年阶段逐渐明显,最大EEA降低了-27.91岁。至关重要的是,没有据报道与治疗有关的严重不良反应。这项临床试验将FST的PEI复合物递送为PEI复合质粒递送,作为在接近最大的成人年龄范围内的男性和女性人类受试者的潜在安全,抗毛细管寿命疗法。
炎症是对不同刺激的复杂,自然的保护反应,其特征是血管扩张和渗透,而血管中的白细胞激增。目前的治疗方法涉及使用抗炎药,皮质类固醇和非甾体类抗炎药(NSAID),这些药物与不良副作用有关,尤其是胃肠道溃疡。因此,越来越需要探索药用植物的替代来源。在本研究中,我们研究了使用体内和硅分子对接的肯尼亚叶子叶片叶片的抗炎活性。基于DNA条形码进行植物样品的分子鉴定。粗提物,并分别使用Folin-Ciocalteu和氯化氯化铝colori公制方法对总酚类和类黄酮进行了初步鉴定。carlageenan诱导的PAW水肿的经典模型用于测试提取物的体内抗炎活性。使用激光拉曼光谱和液相色谱质谱法(LC-MS)筛选提取物,以及通过分子停靠物进行的环氧酶-2(COX-2)的结合位点所鉴定的化合物之间的分子相互作用,该化合物是通过分子停靠物进行的,作为In Vivo实验的确认工具。基于DNA条形码分析,将植物样品鉴定为尿布种。水提取物显着(p <0.05)减少了炎症的角叉菜胶模型中的爪水肿。这些发现暗示了尿布sp。水和甲醇的总酚类含量:二氯甲烷提取物为3.75 mg食酸等效物(GAE)/G干燥样品和6.26 mg GAE/G干燥样品,而总黄酮类含量为0.3872 mg槲皮素/g干样样品和1.76 mg quercetin/g dryplice/g drame cribetin/g drame含量。LC-MS证实了19种植物化学物质的存在,其中10和9是酚类和类黄酮化合物。与这些鉴定的化合物槲皮素与COX-2复合时达到了最低的结合能,其次是鼠李糖蛋白,Quer cetin rhamnoside,epigallocatechin Gallate和氯酸酸。分子对接研究支持了体内发现,并确认了尿布sp的抗炎潜力。是可以在
使用基于有机的解决方案Jinghua Sun,Eric Dahlgren,Dian Tang,Thomas O'Keefe和Matthew O'Keefe Missouri-Rolla大学,材料研究中心,Mo Keryn Lian and Manes Eliacin eliacin Surformation Schaaumburg,Ilversicer Eleptial Centrip for SchoChem eimption for Schaemchem apperiation Formation Eleption Forroction Eleption Forroctial Eleptial Centruity Eleastro apperiation Fermation Eleption Ferromation Eleption Forrosic for SchoChem,在研究电镀浴时,正在研究环境良性,基于有机的解决方案。电镀浴溶液由萃取剂和稀释剂组成,用于常规有机溶剂提取中的类型。有机物是非常差的电解导体,只能维持短范围的电化学反应。沉积机制涉及溶解不太高贵的基板金属,同时在基板表面上同时沉积了更贵重的金属颗粒,类似于在水溶液中浸入的浸入。通过以复合离子的形式加载有机提取物,可以证明该概念的可行性。然后将金属轴承有机液体与印刷电路板行业常用的空白或图案铜和镍表面接触。在适当的加工条件下实现了有机液体的连续,粘附的金和银表面饰面的沉积。金膜仅沉积在底物的裸露金属表面上,这表明选择性区域沉积过程类似于浸入板。扫描电子显微镜(SEM)表明膜由纳米大小的颗粒组成。引言基于有机溶剂提取溶液的新沉浸式电镀工艺,可以替代正在开发应用程序中使用的现有过程,例如电子镍 - 浸入金(ENIG)。该过程的独特方面是,板是在有机培养基中而不是在常规的水性培养基或诸如酒精之类的极性有机液体中进行的。有机培养基在长时间内具有良好的稳定性,低波动率,低毒性,高闪光点,低电导率,低表面张力,水相中的低溶解度,低成本和商业可用性。有机浸入过程中使用的有机溶剂最初是用于用于将金属离子与水溶液分离的溶剂提取过程开发的。有机液体通常由混合稀释剂混合的金属萃取剂组成。提取物有三种主要分类:阴离子交换,阳离子交换和溶剂化提取物。通常构成有机液体的主要部分的稀释剂可能从本质上是脂肪族到基本芳香化合物。萃取剂和稀释剂在水相中都不溶于溶解。选择萃取剂和稀释剂是溶剂提取过程成功的关键因素。对于金属沉积过程同样重要。当前正在开发的有机沉积过程源自较早称为电流剥离的过程。1该过程最初是为了从金属恢复行业商业上使用的有机溶剂中去除杂质而开发的。电剥离是一种自发的电化学过程,其中固体金属被用作还原剂,以去除有机液体中的更高贵的金属离子。在先前的研究中,成功证明了使用固体金属还原剂从有机溶剂中的Fe 3+,Cu 2+,Pb 2+和Au 3+的阳离子的电剥离。2-4利用传统有机溶剂的独特特性,利用电化学驱动的反应将技术扩展到金属沉积过程。关于从有机液体中沉积的金属沉积的初步研究,这些金属集中于产生Cu或Pd纳米级颗粒作为种子层,以随后在薄扩散屏障材料上沉积电铜。5-6的其他研究导致了将黄金和白银沉积到印刷电路板行业常用的镍和铜表面上的过程。金或银离子可以通过与含有溶解金或银色化合物(例如AUCL 3或Agno 3)的水溶液混合到有机浴中。然后,在将金属轴承相分开以用于沉积过程之前,有机相和水相可以沉降。将金属离子加载到有机浴中的另一种方法是将金属盐直接溶解在有机溶液中。