Haemonchus contortus是一种高度致病且经济上重要的寄生虫,它影响了全世界的小型反刍动物。虽然OMICS研究具有巨大的希望,但可用于分析随后的基因功能研究的研究工具较少。RNA干扰(RNAI)技术为该问题提供了解决方案,因为它特别允许敲除或关闭特定基因的表达。结果,RNAi技术已被广泛用于探索基因功能和疾病治疗研究。在这项研究中,我们回顾了中国Haemonchus contortus RNAi研究的最新进展,目的是为鉴定参与生长和发育,驱虫抗性,诊断标记物和诊断药物的关键基因的识别提供参考,以治疗Haemonchus fortortus。
Haemonchus contortus是小型反刍动物中最致病的线虫,而驱虫抗性(AR)阻碍了其有效的控制。需要早期检测AR状态才能减少AR的选择,并且无法使用表型测试来实现。对于苯二唑唑(BZ),在同种型1β-微型蛋白基因中以单核苷酸多态性(SNP)为特征的AR相关等位基因的检测允许Stron Gyles的早期AR检测。在抗BZ的种群中已经描述了F200Y,F167Y,E198A和E198L多态性,区域之间的频率有明显变化。一种新型的数字PCR(DPCR)可以检测H. contortus中所有上述多态性。测定进行了验证。然后,分析了26个奥地利人和10个意大利绵羊农场的幼虫,并在农场一级合并。对于所有测定,证明了15份/μL电阻等位基因的检测极限和高度准确性,从而可以在大多数样品中检测1%的等位基因频率。在奥地利的样本中,在所有农场都检测到了F200y等位基因的频率升高。第一次在奥地利的H. tortus中发现了密码子167和密码子198中的多态性。在意大利样品中,电阻等位基因的频率仍然相对较低,但F200Y抗性等位基因可追溯。总而言之,我们首次开发了DPCR分析,该测定目标是针对H. contortus中与BZ抗性相关的所有相关性SNP。对AR开发的未来研究可能会受益于基于SNP的监视,其中包括所有相关性SNP的开发测定法。改进的监视将包括其他重要的,尽管病原体较少的线虫属。
近年来,2% MOX(长效注射剂)越来越多地被用作产羔前后母羊的治疗方法。然而,一个复杂的因素是,该产品也被越来越多地用作羊疥癣的控制措施,这导致对蠕虫种群造成显著的无意选择压力,通常是在冬季避难所较少的时候。由于不仅蠕虫而且疥螨也对 MOX 具有抗药性,SCOPS 和 Zoetis(制造商)举行了一次联合研讨会,以商定最佳实践指南,从而保护 MOX 的功效。SCOPS 网站上提供了会议成果和对处方者和农民的建议的摘要以及完整的会议记录。对于硝苯腈(不再可用),当只针对 H. contortus 物种进行控制时,使用窄谱驱虫剂来控制 H. contortus 几乎总是比使用广谱药物更好。然而,在避难所中的血矛线虫数量较少的时候(例如秋季/冬季),使用硝苯腈或氯氰碘柳胺可能会对 AR 产生高度选择性,因此应慎重考虑。
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尚未实现驱虫治疗的靶向分娩,从而导致过量药物和治疗疗法的副作用。为此,使用脂质摄入作为食物来源的脂质制成了载有药物的生物相容性纳米颗粒。该制剂显示出优秀的药物(阿苯顿唑)载荷效率为83.3±6.5 mg/g,具有持续释放性能,并且在24小时内显示了86.4±3.9%的药物释放。此外,在用Haemonchus contortus摄入若丹明B负载颗粒后,在消化道中观察到染料的时间依赖性释放,然后在整个蠕虫中分布。由颗粒显示出高达50倍的阿苯达唑效力的颗粒显示肠道持续释放特性。因此,这种配方具有巨大的潜力作为驱虫药物递送车,不仅可以减少剂量,而且还可以通过增强药物的生物利用度来减少药物诱发的副作用。
抗寄生虫药物伊维菌素在全球人类和动物健康中发挥着重要作用。然而,伊维菌素耐药性在兽医蠕虫中普遍存在,人们越来越担心人类相关蠕虫对治疗的反应不佳。尽管经过了几十年的研究,但人们对寄生蠕虫对伊维菌素耐药性的遗传机制仍知之甚少。这反映了伊维菌素在寄生蠕虫中的作用方式以及这些生物的遗传复杂性存在很大的不确定性;寄生蠕虫具有庞大且快速进化的基因组,进化历史和遗传背景的差异可能会混淆耐药性和易感种群之间的比较。我们对一种具有多重耐药性的绵羊胃肠道线虫——捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)的敏感参考分离株进行了受控遗传杂交,并用伊维菌素选择了 F2 种群,以便与未经治疗的 F2 对照进行比较。所有种群的雌性和雄性成虫的 RNA 测序分析发现,亲本分离株之间的转录组分化程度很高,但在 F2 中这种分化显著降低,从而可以识别出与伊维菌素抗性特别相关的差异。在所有抗性种群中,单个基因 HCON_00155390:cky-1(一种假定的咽部表达的转录因子)均在 V 染色体上的一个狭窄位点上呈组成性上调,而该位点此前已被证明受到伊维菌素的选择。此外,我们检测到了抗性和易感种群之间基因表达的性别差异,包括仅在抗性雄性中 P 糖蛋白 HCON_00162780 : pgp-11 的组成性上调。在伊维菌素筛选后,我们确定了在神经元功能和氯离子稳态中发挥作用的基因的差异表达,
引入2010年报道的土壤感染的蠕虫感染的全球人群的比例为14.5亿(1)。胃肠道线虫(杜松子),例如stercoralis,asscaris lumbricoides,Trichuris trichiura,necator Americanus,Ancylostoma duodenale和Enterobius vermicularis,考虑到它们的流行和潜在的疾病,其潜力和疾病具有巨大的公共卫生意义,并引起了人类的疾病的潜力,并具有肠道的潜力。上述GIT线虫具有直接的生命周期,这意味着只涉及一个宿主(6)。也有其他潜在的感染以人畜共患病的方式传播,例如弓形虫病,钩虫感染肝癌和caninum caninum caninum和can虫病(7、8、9)。For the sake of treatment, the recommended anthelmintics in humans mass drug administration (MDA) campaigns are benzimidazoles, albendazole (400 mg), and mebendazole (500 mg) while the recommended drugs against nematodes in veterinary use are probenzimidazole, benzimidazole, avermectins and milbemycinsn (10, 11, 12).随着驱虫药物使用的增加,人类和牲畜都报道了驱虫抗药性(13)。用于打击驱虫抗药性和更有效的治疗方式,疫苗和其他替代控制策略可以针对GIT线虫发挥至关重要的作用(14)。针对GIT线虫对蠕虫的疫苗发育中的当前挑战通常通过信号CD4+ T助手2(TH2)细胞遵循2型反应,该响应会产生多种细胞因子,包括白介素-4(IL-4)和IL-13(IL-13)和IL-13(15)。重组蛋白,A133和SS-IR,但疫苗发育中发生的挑战是不同阶段不同组织中线虫的成熟和迁移。它们是一个大尺寸,这意味着它们需要持续且延长的免疫反应。他们还具有复杂的生命周期以及基因组和蛋白质组(16)。其他挑战是由于多态性,诱导部分免疫力而引起的抗原变异,而目标蠕虫则不会随着时间的流逝而充分表达自己。此外,以前的感染可能会导致疫苗抗原的过度反应性或显示抗原特异性免疫耐受性(17)。在GIT线虫疫苗研究中的进步寄生虫对公共卫生和粮食安全造成的损害在发展中和已发达的地区都是一个重大问题(18)。以下是胃肠道线虫疫苗研究的进步:抗原选择基于抗原的疫苗的开发是一种广泛使用的技术。进行了替代方法,该方法集中在抗原上,这些抗原提供了针对单个线虫的保护,而不是对自然抗原(如寄生虫的分泌/排泄产物)的广义多面反应和利用。这些方法包括使用抗原H11,H-GAL-GP位于H. contortus肠腔和OPA的刷子边界上的H-GAL-GP和Optertagi多蛋白过敏原的使用(19)。重组蛋白的治疗性使用重组蛋白(如复杂的糖蛋白和抗体)的使用,由于其效力的高产量需求高(20)。