致病细菌造成许多医疗保健和安全问题,包括传染病(He等,2023),食物中毒(Hussain,2016年)和水污染(Some等,2021)。由于其感染性和快速增殖,需要快速,准确的细菌检测和鉴定方法,以减少决策的时间段,从而最大程度地减少医疗保健风险,生态系统影响以及与微生物病原体相关的经济损失。基于琼脂平板上细菌细胞培养的病原体检测和鉴定已经存在不同的方法(Van Belkum和Dunne,2013年),免疫学检测(例如,酶联免疫吸附测定法) ),DNA微阵列(Colle等,2003),生物传感器(Boehm等,2007; Ahmed等,2014),或使用特定试剂敏感的使用,例如,细菌代谢(Ghatole et al。,2020; Hsieh等人,2018年)或lie of eDeNos of AdeNose(Et) ),等(Chen等,2018; Dietvorst等,2020)。然而,由于其简单性,低成本,稳健性和可靠性,传统的板块培养方法仍然是病原体检测和识别的金标准(Rohde等,2017),是细菌污染评估法规中的一种(Word Health Organisation,2017年)。实际上,板培养涉及琼脂平板的细菌生长,直到可以观察到单克隆菌落的形成为止。因此,板块培养在某种程度上容易受到人类错误的影响。菌落在形态,颜色,光泽和不透明度上等等,在仔细观察之后,有时在显微镜下,专家可以区分专家。除此之外,这项技术的主要限制是其持续时间。通常,直到菌落形成的细菌增殖需要超过18小时,对于缓慢增殖的细菌而言,必须超过3 - 4天(Franco-Duarte等,2023; Rajapaksha等,2019; Lee等,2020)。一种极端情况是军团菌,它需要非标准治疗和第二盘培养以进行适当的诊断,从而将细菌识别延迟到几周内(Tronel和Hartemann,2009; McDade,2009)。减少测量时间和加速决策的一种可能性是实施能够检测菌落并在形成的早期阶段识别的先进成像系统(Wang等,2020)。从这个意义上讲,高光谱成像是有利的,因为它以3D数据矩阵或超立方体格式提供了高分辨率图像,其中二维对应于空间信息(x,y坐标),而第三个维度对每个单独的像素(λ坐标)的光谱数据(Gowen等,2015,2015,2015; arrigoni; arrigoni et al arrigoni; arrigoni et al and arrigoni; arrigoni et al and arrigoni et al and arrigoni et al and arrigoni et al and arrigy and and and and。通常使用化学计量学来处理大量信息,以识别数据集中的模式,这些模式在裸眼中并不明显,并创建了能够对新数据进行分类的预测模型(Huang,2022)。然后可以使用这些PC进行基于PCA的判别分析(PCA-DA)(UDDIN主成分分析(PCA)通常与高光谱成像结合使用,以将光谱图像数据集减少为称为主成分(PCS)的代表变量(Abdi和Williams,2010年)。
目标:本研究对三维(3D)培养方法在富集和分离乳腺癌干细胞(BCSC)中的功效进行了比较分析。该研究比较了在母质和悬浮液中生长的多细胞球体与常用的二维(2D)单层培养方法。方法:实验涉及9天3D多细胞球体培养物,然后使用两种乳腺癌细胞系进行24小时单层培养,即MCF7和MDA-MB-231。为了评估BCSC,该研究评估了包括CD44/CD24,Vimentin和Aldh1在内的各种表面标记的表达,以及多能干细胞基因(如SOX2,OCT4,KLF4和Nanog)。另外,测量了阿霉素的耐药性和从每种方法中得出的单个细胞的能力,以在无血清悬浮培养中形成球体。结果:研究结果表明,在悬浮液中生长的3D培养多细胞球体显示出干细胞标记物和阿霉素耐药性的显着增加。此外,这些球体在无血清培养基中形成具有超过50 µm的单细胞球体具有更高的能力。结论:总的来说,与2D单层和3D单基质甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酯和3D Matrigel Meths相比,这种3D培养方法在悬浮液中具有增强的BCSC,具有增强的自我更新和增殖能力。因此,这种方法可以使用任何可用的BCSC隔离方法从细胞系中隔离BCSC的关键初步步骤。关键词:乳腺癌,抗癌性,癌症干细胞,阿霉素,3D培养
该课程旨在为学生提供生物技术的基本原理,范围和应用。发酵行业,包括隔离,工业微生物的保存,发酵罐的类型和建造,发酵模式,用于工业用途的微生物培养基,用于微生物的大规模增长的不同培养方法,上游,下游,下游,向上和下降过程,制备和进行形成的生产,诸如生产和进行分类的生产,诸如构造过程,例如疫苗,主要生物技术产品,例如生物量,抗生素,有机酸,生物传感器,生物转化,生物修复,生物磷酸化,生物启动,生物抑制剂,生物性抗激素和生物聚合物的产生。
教学大纲:植物组织培养实验室的要求;植物组织培养的技术;媒体组件和准备工作;各种外植体的灭菌技术和接种;各种外植体的无菌操纵;愈伤组织诱导和植物再生;重要农作物的微型传播;花药,胚胎和胚乳文化;再生植物的硬化 /适应;体细胞胚发生和合成种子的产生;分离原生质体;培养原生质体的演示;隔离DNA的证明;基因转移技术的演示,直接方法;基因转移技术的演示,间接方法;证明遗传转化的确认;凝胶电泳技术的演示。纳米颗粒的绿色合成及其大小的表征。
Ken Nagai 进一步指出:“虽然我们已经建立了强大的 2D 培养制造工艺,但我们认识到在早期阶段从商业角度预测 iPS 细胞的全部可扩展性潜力的重要性。为了满足这一需求,我们致力于实施更具可扩展性的制造解决方案。Cellistic 凭借其独特的 3D 平台以及在 iPSC 分化和各种细胞类型扩大方面的丰富经验,完全有能力满足这一关键要求。”我们很高兴与 Cellistic 合作,他们在使用 3D 生物反应器培养 iPS 细胞方面拥有最丰富的经验。与 Cellistic 的合作使我们能够利用他们最先进的开发和制造能力来加速我们 BCMA CAR-NKT 产品的开发。”
Ken Nagai 进一步指出:“虽然我们已经建立了强大的 2D 培养制造工艺,但我们认识到在早期阶段从商业角度预测 iPS 细胞的全部可扩展性潜力的重要性。为了满足这一需求,我们致力于植入更具可扩展性的制造解决方案。Cellistic 凭借其独特的 3D 平台以及在 iPSC 分化和各种细胞类型扩大方面的丰富经验,完全有能力满足这一关键要求。”“我们很高兴与 Cellistic 合作,他们在使用 3D 生物反应器培养 iPS 细胞方面拥有最丰富的经验。与 Cellistic 的合作使我们能够利用他们最先进的开发和制造能力来加速我们 BCMA CAR-NKT 产品的开发。”
在第五学期或第六学期1。发酵技术的职业课程基础知识(课程代码:VC-BT-1A)编号信用:2单位 - I(CR-0.5)微生物及其在生态系统中的作用。简要介绍了他们的培养,维护和保存。灭菌和消毒。单元 - II(CR-0.5)发酵及其类型简介。微生物生产工业重要的食品,酒精饮料,酶和抗生素。单元 - III(Cr-0.5)工业发酵的媒体配方。前体,诱导剂,媒体添加剂和媒体优化的要求。单位 - IV(Cr-0.5)引入生物反应器,其类型和应用。生物过程参数的测量和控制。关于下游处理的简短想法。建议的读数:
我们表明,从细菌菌落开始,在一次 Illumina NextSeq 2000 运行中可以对数千个质粒进行测序,并在第二天完成生物信息学分析。我们利用可扩展的模块化流程,包括菌落挑选、液体处理、DNA 测序和生物信息学分析。滚环扩增 (RCA) 或菌落直接 PCR 取代了传统的细菌培养和质粒纯化。集成自动标准化、一步式文库制备技术可在方便的 384 孔、可立即测定的配置(384 孔 x 16 板)中提供 6,144 个索引。我们与其他工作流程的基准比较表明,这种自动化流程将典型的合成生物学 DBTL 周期从几周缩短到几小时。
