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末端修饰长双链 DNA 供体的综合分析
。CC-BY-NC 4.0 国际许可，根据 提供（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 6 月 29 日发布。；https://doi.org/10.1101/2024.06.28.601124 doi：bioRxiv 预印本
利用捐献者进行成人心脏移植...
器官移植仍然是治疗晚期终末期心力衰竭的金标准和治愈方法 (1)。患者死亡后器官捐献有两种方式，从医学和法律上可定义为 (I) 所有脑功能不可逆停止，即脑死亡后捐献 (DBD) 或 (II) 循环永久停止，即循环死亡后捐献 (DCD) (2)。传统上通过一系列神经系统检查来确定脑死亡，并要求提供脑干反射消失的必要文件或脑灌注消失的放射线图像 (2)。体格检查或动脉内压监测用于确定脉搏消失并确认循环死亡，由开具证明的医生确认 (2)。
钌（II）polypyridyl络合物作为粮食供体：结构
摘要：从金属到配体电荷转移（MLCT）发射的氟吡啶基复合物（RPC）已开发为DNA探针，并正在研究为潜在的抗癌药物。在这里，我们报告了结合DNA的MLCT释放性RPC与Cy5.5标记的DNA进行FO fo rster共振能量转移（FRET），形成了Mega-Stokes Shift Fret Fret Pairs。Based on this discovery, we developed a simple and rapid FRET binding assay to examine DNA-binding interactions of RPCs with diverse photophysical properties, including non-“light switch” complexes [Ru(dppz) 2 (5,5 ′ dmb)] 2+ and [Ru(PIP) 2 (5,5 ′ dmb)] 2+ (dppz = dipyridophenazine, 5,5 ′ dmb = 5,5'-dim甲基-2,2'-二吡啶，PIP = 2-苯基 - 米达佐[4,5- f] [1,10] - 苯拥olththroline）。与双链体，G-四链体，三向连接和不匹配DNA的结合亲和力，并确定了衍生的FRET供体 - 受体接近，提供了有关潜在结合位点的信息。分子表明，令人鼓舞的抗癌特性，包括与PARP抑制剂Olaparib协同作用，机械研究表明，[RU（PIP）2（5,5'DMB）] 2+ ACTS以阻止DNA复制的进展。■简介
死者捐赠者器官移植的临床指南
Appendix A TSANZ Advisory Committees & Working Groups, terms of reference 168 Appendix B Process report 169 Appendix C Kidney allocation algorithms 174 Appendix D Liver donor allocation flow diagram 177 Appendix E Guidelines for lung donor bronchoscopy & CT chest 178 Appendix F National notification for lung transplantation 180 Appendix G Heart matching algorithm 181 Appendix H Currently recognised transplant units 182 Appendix I Summary of recommendations for infectious disease screening in deceased donors 185 Appendix J Further resources for assessing risk of donor-derived malignancy 189 Appendix K Family history of cancer and cancer genes 191 Appendix L Information on Australian and New Zealand cancer registries 192 Appendix M Recommendations on the use of organs from donors with CNS tumours 197 Appendix N肾脏/胰腺和胰腺分配算法199
死者捐赠者器官移植的临床指南
Appendices 174 Appendix A TSANZ Advisory Committees & Working Groups, terms of reference 175 Appendix B Process report 176 Appendix C Kidney allocation algorithms 182 Appendix D Liver donor allocation flow diagram 185 Appendix E Guidelines for lung donor bronchoscopy & CT chest 186 Appendix F National notification for lung transplantation 188 Appendix G Heart matching algorithm 189附录h移植单位 - 澳大利亚和新西兰190 Appendix I关于死者捐助者的感染性疾病筛查的建议摘要193附录J 193 A附录附录N肾脏/胰腺和胰腺分配算法207附录o儿科发行原理209
CN 03-2025-丙型肝炎的供体检测...
强制性1。不得捐赠：捐赠者在任何时候都有：a）在一个特有疟疾或南美锥虫病的国家中收到或认为他们可能收到的血液或血液成分的输血。b）接受了血液衍生的凝结因子浓缩物的治疗。这包括凝血酶原络合物以逆转过度凝聚。2。Must not donate if: Since January 1st 1980: a) Anywhere in the world the donor has received, or thinks they may have received, a transfusion with red cells, platelets, fresh frozen plasma (FFP), cryoprecipitate, cryodepleted plasma, convalescent plasma, granulocytes, buffy coat preparations, intravenous or subcutaneous human normal immunoglobulin.这包括母亲，他们的婴儿需要输入输血。b）进行了血浆交换。
5' - 改性提高了精确基因组编辑的DNA供体的效力和功效
1美国伍斯特大学马萨诸塞大学医学院的RNA治疗学院； 2美国伍斯特大学马萨诸塞大学医学院基因与发展部儿科系； 3美国伍斯特的马萨诸塞大学医学院生物信息学和综合生物学计划； 4美国伍斯特大学医学院分子，细胞和癌症生物学系； 5美国伍斯特的马萨诸塞大学医学院生物化学与分子生物技术系； 6美国马萨诸塞州医学院，美国伍斯特大学的Li Weibo稀有疾病研究所； 7分子医学计划，马萨诸塞大学医学院，美国伍斯特，美国； 8马萨诸塞大学医学院霍华德·休斯医学院，美国伍斯特，美国
在哺乳动物干细胞中利用通用供体进行高效、快速的荧光蛋白敲入
摘要 荧光蛋白 (FP) 标记是细胞生物学的基础方法，因为它可以观察活细胞中的蛋白质分布、动态和与其他蛋白质的相互作用。然而，使用标记蛋白过表达的典型方法可能会扰乱细胞行为并引入定位伪影。为了保持天然表达，可以将荧光蛋白直接插入内源基因中。这种方法在酵母中已经是标准做法几十年了，最近随着 CRISPR/Cas9 的出现，在无脊椎动物模型生物中也成为标准做法。然而，由于同源定向修复 (HDR) 效率低下，内源荧光蛋白标记尚未在哺乳动物细胞中广泛使用。在这里，我们描述了一种简化的方法，用于通过小鼠胚胎干细胞中的非同源末端连接 (NHEJ) 将 FP 标签高效快速地整合到天然基因座中。我们的方案最大限度地减少了使用通用供体的克隆，允许对内源蛋白进行 N 端或 C 端标记，并且从转染到成像只需不到 2 周的时间，从而提高了 FP 敲入在哺乳动物细胞中的适用性。简介荧光蛋白（FP）敲入能够实现内源性标记，从而实现蛋白质可视化，而不会产生过表达伪影1。敲入策略可以让研究人员准确观察和测量活细胞中蛋白质表达、定位和相互作用的动态。自20世纪90年代以来，FP敲入一直是酵母中的标准做法，因为这种生物可以通过同源重组有效地整合FP供体2,3。最近，由于CRISPR/Cas9技术的出现10，FP敲入已在秀丽隐杆线虫4-7和果蝇8,9中得到广泛采用。当由单向导RNA（sgRNA）编程时，Cas9会引入靶向的DNA双链断裂（DSB），细胞可以通过同源定向修复（HDR）或非同源末端连接（NHEJ）11进行修复。HDR因其高保真度而受到青睐12-15。然而，HDR 仅在某些细胞周期阶段 16 活跃，并且需要与靶标匹配的同源臂。因此，基于 HDR 的标记效率要低得多 17,18，并且需要在哺乳动物细胞中费力地克隆。为了规避这些限制，最近已引入 NHEJ 来在哺乳动物细胞中进行 FP 敲入 18–26 。一种名为 CRISPR 辅助插入标记 (CRISPaint) 22 的方法特别精简，因为它使用通用供体质粒，因此唯一需要的克隆是构建基因特异性 sgRNA。供体质粒通过转染引入细胞，与靶基因并行被 Cas9 切割，并通过 NHEJ 以非序列特异性的方式整合到靶基因中。为了允许使用任何基因特异性 sgRNA 同时保持正确的阅读框架，CRISPaint 使用通用的“框架选择器”在三种可能的阅读框架之一中切割通用供体 22 。尽管有这些优势，到目前为止，CRISPaint 仅在少数细胞系中进行了测试。此外，目前形式的 CRISPaint 系统仅可进行 C 端插入，这限制了其应用于蛋白质产物可耐受 C 端标记的基因。在这里，我们描述了一种基于 CRISPaint 的改进方法，该方法可在哺乳动物细胞中灵活、快速地在基因的任一端进行 FP 标记。我们的方法高效，需要的克隆最少，并且可以产生在天然调控元件的控制下表达的功能性内源性标记蛋白。我们在小鼠胚胎干细胞 (mESC) 中测试并优化了这种方法。我们在第一次尝试中成功标记了 5/5 个目标，从转染到成像的时间只有 2 周。此外，我们还构建了一组用于多色标记的质粒。总之，这些进展将促进 mESC 和其他哺乳动物细胞中的细胞生物学研究，并可能提供更快、更简单的快速创建敲入小鼠的途径。
使用 CRISPR/Cas9 系统和双链 DNA 供体标记荧光报告基因蛋白
Sylvain Geny、Simon Pichard、Alice Brion、Jean-Baptiste Renaud、Sophie Jacquemin 等人。使用 CRISPR/Cas9 系统和双链 DNA 供体标记带有荧光报告基因的蛋白质。Arnaud Poterszman。多蛋白复合物，2247，Springer；Humana，第 39-57 页，2021 年，分子生物学方法，978-1-0716-1125-8。�10.1007/978-1-0716-1126-5_3�。�hal-03092017�
建造桥梁：关于捐助者与发展金融机构之间成功合作的案例研究
1 ARIA（2024）增长基础3：建筑桥梁：DFI和捐助者合作在促进Frontier Markets的私营部门投资方面的案例。BII和FMO：https：//www.ariainvests.org/news-insight/foundations-of-growth-3 2 BII和盖茨比非洲（2022）。弥合差距：解锁私营部门发展与发展金融之间的协同作用。London: British International Investment and Gatsby Africa: https://www.gatsbyafrica.org.uk/insight/bridging-the-gap-unlocking- synergies-between-private-sector-development-and-development-finance/ 3 Bilal, S., Karaki, K., Dufief, E., Keijzer, N., Olivié, I., & Santillán O'Shea，M。（2022）。增强欧洲捐助者，发展机构和DFIS/PDB之间的协调：见解和建议。欧洲智囊团集团（ETTG）。4 CasadevallBellés，S.，Pleeck，S.，Calleja，R。，＆Gavas，M。（2024）。 发展金融机构和双边机构在发展方面的发展如何？ 全球发展中心。 5 ARIA（2024）增长基础3：建筑桥梁：DFI和捐助者合作在促进Frontier Markets的私营部门投资方面的案例。 BII和FMO。4 CasadevallBellés，S.，Pleeck，S.，Calleja，R。，＆Gavas，M。（2024）。发展金融机构和双边机构在发展方面的发展如何？全球发展中心。5 ARIA（2024）增长基础3：建筑桥梁：DFI和捐助者合作在促进Frontier Markets的私营部门投资方面的案例。BII和FMO。BII和FMO。