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工程永生的细胞快速启动指南
1。Editco建议尽快（在1-3个段落内）尽快对细胞进行基因分型。要评估您编辑的单元格的基因型，您可以使用下一代测序（NGS）或Sanger测序。用于单个指南淘汰赛和CRISPR编辑，如果您想使用NGS分析基因型，我们建议使用Crispresso。ngs启动序列可在质量控制报告中为您的项目提供，您可以使用Editco的CRISPR编辑（ICE）工具来分析单指，多指定和敲门CRISPR编辑，该工具依赖于Sanger测序。值得注意的是，Editco的ICE工具是目前唯一用于分析多指南派生CRISPR编辑的公开选项。对于Sanger测序，将根据要求提供PCR引物。您可以联系technicalsupport@editco.bio，以获取有关您的订单的Sanger Primer建议。 请注意，我们的Sanger底漆建议是使用标准生物信息学算法计算的。 它们未通过Editco在功能上验证。 有关如何隔离基因组DNA，PCR扩大靶向区域以及为Sanger测序准备的说明，可以在我们的基因分型方案中获得。 分别在我们的ICE基因敲除和敲入分析方案中详细介绍了使用ICE评估敲除或敲入编辑效率的说明。 对于小敲门剂，我们建议通过Sanger测序和冰分析来识别细胞的编辑基因型。 对于大型敲击，可以使用PCR产物的Junction PCR和Sanger测序来识别插入的序列。您可以联系technicalsupport@editco.bio，以获取有关您的订单的Sanger Primer建议。请注意，我们的Sanger底漆建议是使用标准生物信息学算法计算的。它们未通过Editco在功能上验证。有关如何隔离基因组DNA，PCR扩大靶向区域以及为Sanger测序准备的说明，可以在我们的基因分型方案中获得。分别在我们的ICE基因敲除和敲入分析方案中详细介绍了使用ICE评估敲除或敲入编辑效率的说明。对于小敲门剂，我们建议通过Sanger测序和冰分析来识别细胞的编辑基因型。对于大型敲击，可以使用PCR产物的Junction PCR和Sanger测序来识别插入的序列。
激光加工净成形AISI 1025钢热处理工艺的数值模拟与分析
退火和淬火等热处理工艺对于确定金属材料的残余应力演变、微观结构变化和机械性能至关重要，残余应力在部件性能中起着更大的作用。本文研究了热处理对使用 LENS 制造的 AISI 1025 中残余应力的影响。开发并模拟了有限元模型以分析残余应力的发展。适用于熔融沉积成型 (FDM) 长丝生产中的工具和模具应用的 AISI 1025 样品是使用激光工程净成型 (LENS) 工艺制造的，然后进行热处理，即进行退火和淬火工艺。将所研究的热处理样品的材料微观结构、残余应力和硬度与原始样品进行了比较。结果表明，与原始样品相比，退火后，拉伸残余应力降低了 93%，导致裂纹扩展速率降低，尽管硬度显著降低了 25%。另一方面，淬火后记录到 425±14 MPa 的高拉伸残余应力，硬度提高了 21%。
工程T细胞制造
除非另有明确说明，否则 Miltenyi Biotec 产品和服务仅供研究使用，不可用于治疗或诊断。CliniMACS 系统组件（包括试剂、管组、仪器和 PBS/EDTA 缓冲液）均根据通过 ISO 13485 认证的质量体系进行设计、制造和测试。在欧盟，除非另有说明，CliniMACS 系统组件可作为 CE 标志的医疗器械用于各自的预期用途。CliniMACS 试剂和生物素结合物仅供体外使用，不用于治疗用途或直接输注到患者体内。CliniMACS 试剂与 CliniMACS 系统结合使用旨在分离人体细胞。作为 CliniMACS 系统的制造商，Miltenyi Biotec 不就将分离细胞用于治疗目的提供任何建议，也不就临床益处做出任何声明。对于靶细胞的制造和在人体中的使用，必须遵守国家法律法规，例如欧盟的 2004/23/EC 指令（“人体组织和细胞”）或 2002/98/EC 指令（“人体血液和血液成分”）。因此，任何靶细胞的临床应用均完全由 CliniMACS 系统的用户负责。在美国，CliniMACS CD34 试剂系统（包括 CliniMACS Plus 仪器、CliniMACS CD34 试剂、CliniMACS 管道套件 TS 和 LS 以及 CliniMACS PBS/EDTA 缓冲液）已获得 FDA 批准作为人道主义用途设备 (HUD)，由美国联邦法律授权用于治疗首次完全缓解的急性髓细胞白血病 (AML) 患者。该设备对此适应症的有效性尚未得到证实。 CliniMACS 产品线的其他产品仅在获得批准的新药临床试验 (IND) 申请、临床试验设备豁免 (IDE) 或 FDA 批准的情况下才可使用。MACS GMP 产品仅用于体外细胞处理，不适用于人体体内应用。如需了解美国的监管状态，请联系您当地的代表。MACS GMP 产品是根据 ISO 13485 质量管理体系设计、制造和测试的，符合相关的 GMP 指南。它们是根据 USP <1043> 关于辅助材料的建议设计的。MACS GMP 生物来源产品的制造和测试符合 EP 第 5.2.12 章“用于生产细胞和基因治疗药物的生物来源原材料”的规定。Vectofusin 是 Genethon 的注册商标。 CliniMACS、CliniMACS Prodigy、MACS、MACSQuant、StainExpress、TexMACS、TransAct 和 Miltenyi Biotec 徽标是 Miltenyi Biotec 和/或其附属公司在全球各个国家的注册商标或商标。版权所有 © 2024 Miltenyi Biotec 和/或其附属公司。保留所有权利。
诱导休眠的 3D 工程基质揭示了......
尽管进行了局部和全身治疗，实体癌仍经常复发并出现远处转移。细胞休眠已被确定为导致晚期复发的耐药性的重要机制。因此，看似无病的患者出现不可见的、微小残留癌症复发需要适合药物发现的体外休眠细胞模型。在这里，我们探索了休眠诱导的 3D 工程基质，这些基质产生机械限制并诱导癌细胞生长停滞和化疗存活。我们通过 P-ERK 低：P-p38 高休眠信号比以及 Ki67 − 表达来表征单细胞的休眠表型。作为潜在机制，我们确定了四个半 LIM 结构域 2 (FHL2) 蛋白的硬度依赖性核定位，导致 p53 独立的高 p21 Cip1/Waf1 核表达，这在小鼠和人类组织中得到了验证。休眠诱导基质中的细胞在 FHL2 下调后对化疗变得敏感，这暗示了其具有抗药性作用。因此，我们基于生物材料的方法将能够系统地筛选出以前未发现的适合根除可能复发的休眠癌细胞的化合物。
IL-12工程技术的上级抗肿瘤活性（IOV- ... ） 基于T细胞的免疫疗法中的IOVANCE IP领导
方差分析，方差分析； Ctrl，控制； DP，药品； GSEA，基因集富集分析； GZMB，Granzyme B； EF-1α，伸长因子1α； HPAC，人类胰腺癌； ICO，可诱导的共刺激器； IFN-γ，干扰素伽玛； IL-2，白介素2; lag3，淋巴细胞活化基因3蛋白； MFI，平均荧光强度； NES，归一化富集评分； NFAT，活化T细胞的核因子； NS，不重要； PD-1，程序性细胞死亡蛋白1； REP，快速扩展方案； TCR，T细胞受体； TEIL-12，活化的T细胞 - 插鲁金12的膜束缚核因子； TIL，肿瘤浸润淋巴细胞； TIM3，T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域蛋白3； TME，肿瘤微环境； TNF-α，肿瘤坏死因子α。
遗传工程的美国栗子简介
美国研究人员要求批准在野外种植一种抗疾病的美国栗树。他们称这树称为“亲爱的58”。他们提议使用该GE树代替或“恢复”已被枯萎病（Cryphonectria parasitica）广泛破坏的美国栗子物种。但是，通过基因工程“恢复”了美国栗子的希望有很大的风险，并可能威胁到加拿大和美国正在努力通过支持更高的枯萎病的现有树木的繁殖较高的树木来恢复野生美国栗子的数十年的努力，这些树木使用非ge的方法来培养较高的枯萎病和繁殖树。
报告名称：第二个基因设计的玉米和大豆品种注册清单
摘要于2024年10月8日，Mara发布了公告号830（中文链接），宣布最终批准30种玉米玉米和大豆品种，包括27种GE玉米品种和3种GE大豆品种。30个GE品种通过了中国国家农作物杂种登记委员会（CNCVRC）的初步审查，并于2024年3月19日发表了公众评论。这是第二个GE玉米和大豆品种注册清单。第一个清单，有51个注册的GE玉米和大豆品种，于2023年12月7日出版。上市的GM玉米和大豆品种将有资格在批准的地区种植。但是，在可预见的将来，这些品种可能仅在PRC批准的GM玉米和大豆的试点计划中种植。有关30 GE玉米和大豆品种的非正式翻译及其产量性能，请参阅收益报告新的遗传改性玉米和大豆品种注册清单| CH2024-0048。
工程病毒样颗粒用于体内瞬时递送主要编辑器核糖核蛋白复合物
Prime 编辑能够在生物系统中精确安装基因组替换、插入和删除。然而，在体外和体内高效递送 Prime 编辑组件仍然是一个挑战。我们在此报告了 Prime 编辑改造的病毒样颗粒 (PE-eVLP)，它们将 Prime 编辑蛋白、Prime 编辑向导 RNA 和切口单向导 RNA 作为瞬时核糖核蛋白复合物递送。我们系统地设计了 v3 和 v3b PE-eVLP，与基于我们之前报告的碱基编辑器 eVLP 架构的 PE-eVLP 构建体相比，其在人类细胞中的编辑效率提高了 65 到 170 倍。在两种遗传性失明的小鼠模型中，单次注射 v3 PE-eVLP 可在视网膜中产生治疗相关的 Prime 编辑水平、蛋白质表达恢复和部分视觉功能挽救。优化的 PE-eVLP 支持 Prime 编辑核糖核蛋白的瞬时体内递送，通过减少脱靶编辑和消除致癌转基因整合的可能性来提高 Prime 编辑的潜在安全性。
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