作用于 RNA 的腺苷脱氨酶 (ADAR) 可以重新用于实现位点特异性的 A-to-I RNA 编辑,方法是通过 ADAR 招募向导 RNA (adRNA) 将它们招募到感兴趣的靶标上。在本章中,我们详细介绍了通过两种正交策略实现此目的的实验方法:一是通过招募内源性 ADAR(即已经在细胞中天然表达的 ADAR);二是通过招募外源性 ADAR(即将 ADAR 递送到细胞中)。对于前者,我们描述了使用环状 adRNA 将内源性 ADAR 招募到所需的 mRNA 靶标上。这可在体外和体内实现稳健、持久且高度转录特异性的编辑。对于后者,我们描述了使用 split-ADAR2 系统,该系统允许过度表达 ADAR2 变体,可用于以高特异性编辑腺苷,包括难以编辑非优选基序中的腺苷,例如 5′ 鸟苷两侧的腺苷。我们预计所述方法应促进研究和生物技术环境中的 RNA 编辑应用。
合成生物学界对调节基因表达的新方法存在持续的需求。蛋白质开关感知生物学输入并以功能输出响应,代表了满足这种需求的一种方法。尽管已经有大量的转录因子和信号传导蛋白可用,但现有开关的库缺乏某些应用所需的基板特异性和活动。因此,已经将大量技术应用于具有新颖性能的工程师开关。在这里,我们通过将它们广泛地组织为三种方法来讨论其中一些技术。我们展示了如何通过诱变,域交换或域插入来创建新颖的开关。然后,我们将其贴上来讨论它们作为生物剂和复杂遗传回路的用途。
(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2020 年 8 月 15 日发布。;https://doi.org/10.1101/2020.08.15.251348 doi:bioRxiv preprint
根据世界卫生组织的数据,新型冠状病毒病(COVID-10)曾是一个公共卫生问题,截至 2020 年 6 月 10 日,全球已有超过 710 万人感染,40 多万人死亡。在当前情况下,巴西和美国每天的新增病例和死亡人数都很高。因此,预测一周时间窗口内的新增病例数非常重要,这可以帮助公共卫生系统制定应对 COVID-19 的战略规划。预测人工智能(AI)模型的应用有可能处理像 COVID-19 这样的时间序列的困难动态行为。在本文中,贝叶斯回归神经网络、立体回归、k 最近邻、分位数随机森林和支持向量回归可单独使用,并结合最近的预处理变分模态分解(VMD)将时间序列分解为几个固有模态函数。所有 AI 技术均在时间序列预测任务中进行评估,预测巴西和美国五个州的累计 COVID-19 病例数提前一、三和六天,截至 2020 年 4 月 28 日,病例数较高。所有预测模型均采用先前累计的 COVID-19 病例数和每日温度和降水等外生变量作为输入。根据性能标准评估模型的有效性。一般而言,VMD 的混合在准确性方面优于单一预测模型,特别是当预测时间范围提前六天时,混合 VMD-单一模型在 70% 的案例中实现了更好的准确性。关于外生变量,作为预测变量的重要性排名从高到低依次为过去病例、温度和降水。因此,由于评估模型能够有效地预测长达六天的累计 COVID-19 病例数,因此