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感受态细胞转化
细胞吸收外源 DNA 会改变细胞的表型或遗传特性，这被称为转化。细胞要吸收外源 DNA，必须先使其具有渗透性，以便 DNA 可以进入细胞。这种状态称为能力。在自然界中，一些细菌由于环境压力而变得具有能力。我们可以通过使用金属阳离子（如钙、铷或镁）的氯化物盐和冷处理来有目的地使细胞具有能力。这些变化会影响细胞壁和细胞膜的结构和渗透性，使 DNA 可以通过。然而，这会使细胞非常脆弱，因此在这种状态下必须小心处理。每 1 µg DNA 转化的细胞数量称为转化效率。DNA 太少会导致转化效率低，但 DNA 太多也会抑制转化过程。转化效率通常为每 µg 添加 DNA 1 x 10 4 至 1 x 10 7 个细胞。
半乳糖苷酶片段至氨基末端片段...
我们报告了一系列适用于检测和克隆翻译控制信号和外源基因 5' 编码序列的质粒载体的构建和使用。在这些质粒中，乳糖操纵子 β-半乳糖苷酶基因 lacZ 的氨基末端的前八个密码子被去除，并在 lacZ 的第八个密码子附近插入独特的 BamHI、EcoRI 和 SmaI (XmaI) 内切酶切割位点。将含有适当调节信号和 5' 编码序列的脱氧核糖核酸片段引入此类 lac 融合质粒导致产生由 β-半乳糖苷酶残基的羧基末端片段和含有外源脱氧核糖核酸序列编码的氨基末端氨基酸的肽片段组成的混合蛋白。这些杂合肽保留了 1，8-半乳糖苷酶的酶活性，并产生了 Lac' 表型。此类杂合蛋白可用于纯化由外源脱氧核糖核酸片段编码的肽序列，以及用于研究特定肽片段的结构和功能。
研究参与者对阿尔茨海默氏病精确诊断的观点
癫痫是一种涉及神经元网络过度兴奋性的普遍疾病，但现有的治疗策略通常无法提供最佳的患者外。化学遗传方法，其中外源受体在定义的大脑区域表达，并被选择性激动剂特别激活，这是限制过度活跃的神经元活性的有吸引力的方法。我们开发了Barni（Bradanicline-和乙酰胆碱激活的受体进行神经元抑制作用），这是一个由α7烟碱乙酰胆碱受体配体结合结构域组成的工程通道，并与α1glycine受体受体孔结合了。在这里，我们证明了临床期α7烟碱乙酰胆碱受体选择性激动剂Bradanicline的Barni激活有效地抑制了靶向神经元活性，并控制了雄性小鼠的急性和慢性癫痫发作。我们的结果为使用抑制性乙酰胆碱的工程通道提供了证据，可通过外源性和内源性激动剂作为治疗癫痫的潜在治疗方法。
CRISPR/Cas9 介导的 TGFβRII 破坏增强人嵌合抗原受体 T 细胞的体外抗肿瘤功效
我们进行了一系列体外测试，以确定外源性 TGFβ 是否能对针对两种不同肿瘤抗原的 CAR T 细胞产生抑制作用。IVT 电穿孔 iDC（CLDN6/MSLN）与 CAR CLDN6 或 CAR MSLN T 细胞在增加 TGFβ 剂量的情况下共培养。添加的多种外源性 TGFβ（5-20 ng/ml）可显著抑制 CAR T 细胞在细胞因子分泌（图 2A）和增殖（图 2B）方面的功能，这与之前的报告一致。IFN-γ（最主要的免疫刺激性 T 细胞因子）的分泌非常容易受到即使添加的最低剂量 TGFβ 的影响，在没有 TGFβ 的情况下，IFN-γ 分泌会下降到不到 40%与此一致，即使在存在非常低剂量的 TGFβ（5ng/ml）的情况下，MSLN 和 CLDN6 特异性 CAR T 细胞的增殖也会降低到其天然增殖的 50% 以下（即不存在 TGFβ）。
解锁Rapeseed的潜力：CRISPR编辑混合效率
通过施用外源甲基甲酸酯，研究人员能够恢复男性菌株的生育能力，从而能够产生F1杂交种子。与传统系统相比，这种新的两行系统为混合种子生产提供了一种更直接，更有效的方法，而传统系统通常面临环境稳定性问题。
利用环状向导 RNA 募集内源性 ADAR，实现高效的体内和体外 RNA 编辑
使用外源性向导 RNA 招募内源性腺苷脱氨酶来编辑细胞 RNA 是一种有前途的治疗策略，但使用当前的向导 RNA 设计，编辑效率和持久性仍然很低。我们设计了环状 ADAR 招募向导 RNA (cadRNA)，以实现更高效的可编程 A-to-I RNA 编辑，而无需同时递送任何外源性蛋白质。使用这些 cadRNA，我们观察到在多个位点和细胞系中，在 RNA 的非翻译区和编码区中，都有稳健而持久的 RNA 编辑，并且具有高转录组特异性。此外，我们通过在反义域中整合散布的环路来增加靶腺苷的转录水平特异性，从而减少旁观者编辑。通过腺相关病毒在体内递送 cadRNA，可使 C57BL/6J 小鼠肝脏中的 mPCSK9 转录本实现 53% 的 RNA 编辑，并使 IDUA-W392X 小鼠 I 型黏多糖贮积症模型中的琥珀色无义突变实现 12% 的 UAG-UGG RNA 校正
BHB-能量患者教育表 - 健康设计
为什么是酮？您可能习惯于听到葡萄糖（主要来自碳水化合物）是身体的“首选”燃料，或者我们每天必须摄入一定量的碳水化合物。这是对新陈代谢的过度简化。当碳水化合物摄入量非常低时，身体会转而主要以脂肪为燃料。酮是脂肪代谢产生能量的副产品，酮本身可以作为燃料来源。身体中的大多数细胞都可以使用酮，大脑尤其适合。这可能是许多人在转向低碳水化合物饮食时报告思维更敏锐、头脑更清晰的原因。外源性酮可能有助于促进这些效果，即使对于那些不愿意减少碳水化合物摄入量的人来说也是如此。虽然外源性酮不能完全替代低碳水化合物或生酮饮食，但即使有人食用高碳水化合物饮食，它们仍可能对头脑清晰和注意力有益（见下文注释）。
宏观经济不确定性对家庭支出的影响
摘要使用对欧洲家庭的新调查，我们研究了家庭所感知的宏观经济不确定性中的外源性变化如何影响其支出决策。我们使用随机信息处理，提供有关未来经济增长的第一和/或第二瞬间的不同类型的信息，以在某些家庭的宏观经济不确定性中产生外源性变化。在随访调查中测量了相对于未处理的对照组的支出决策的影响。较高的宏观经济不确定性会导致家庭在随后的几个月内减少对非耐用商品和服务的支出，并减少购买较大物品（例如套餐假期或奢侈品）的购买。此外，不确定性减少了家庭投资共同基金的倾向。这些结果支持这样的观念，即宏观经济不确定性会影响家庭决策并对经济结果产生巨大的负面影响。JEL：E3，E4，E5关键字：不确定性，家庭支出，家庭财务，调查，随机控制试验
细菌转化方案
通过改变细胞的表型或遗传性状的细胞对外源DNA的摄取称为转化。使细胞摄取外源性DNA，必须首先使其渗透性，以便DNA可以进入细胞。此状态称为能力。在自然界中，由于环境压力，一些细菌变得有能力。我们可以故意通过用钙，rubium或镁和冷处理的金属阳离子的氯化物处理来使细胞具有胜任。这些变化会影响细胞壁和膜的结构和渗透性，以便DNA可以通过。但是，这使细胞非常脆弱，必须在这种状态下仔细处理。每1 µg DNA转化的细胞量称为转化效率。太少的DNA会导致较低的转化效率，但过多的DNA也会抑制转化过程。转化效率通常范围范围为1 x 10 4至1 x 10 7的细胞每µg添加的DNA。
遗传疾病与治疗
遗传疾病会导致许多复杂且难以治愈的病症。编码每个人的复杂性和许多疾病风险的 DNA 序列包含在线粒体基因组、核基因组和微生物宏基因组中。这些疾病的诊断已统一在下一代 DNA 测序的应用上。然而，将特定的基因诊断转化为有针对性的基因疗法仍然是一个中心目标。迄今为止，基因疗法已分为三大类：用新的外源基因组大量替换受影响的基因区室、非靶向添加外源遗传物质以补偿遗传错误，以及最近使用基因编辑直接纠正致病基因变异。诊断、治疗和试剂输送到每个基因区的通用方法将加速下一代治愈性基因疗法的发展。我们讨论了线粒体、核和微生物宏基因组区室的结构和变异性，以及针对每个区的基因诊断和基因疗法的历史发展和当前实践。