结肠癌是美国癌症的主要原因之一。结肠癌是由结肠癌细胞基因组中的许多基因突变发展而来的。长的非编码RNA(LNCRNA)会导致许多癌症(包括结肠癌)的发育和进展。lncRNA已经并且可以通过簇状的定期间隔短的短质体重复序列(CRISPR)相关的核酸酶9(CRISPR/CAS9)系统的聚类重复序列的基因编辑技术来纠正,以减少结肠癌细胞的增殖。但是,许多用于运输基于CRISPR/CAS9的疗法的当前输送系统需要更多的安全性和效率。基于CRISPR/CAS9的治疗药需要安全有效的递送系统,以更直接,更明确地靶向结肠中存在的癌细胞。本综述将提供有关使用植物衍生的外泌体样纳米颗粒作为纳米载体的效率和安全性的相关证据,以提供基于CRISPR/CAS9的疗法以直接靶向结肠癌细胞。
1简介1 2背景2 2.1什么是外泌体?2 2.2 Exosome structure and interaction 4 2.3 Application of exosomes 6 2.4 Isolation of exosomes 7 2.5 Quality control measures 8 2.6 The focus of this report 8 3 Non-chromatography methods for exosome purification 9 3.1 Ultracentrifugation 9 3.1.1 Advantages and disadvantages of ultracentrifugation 10 3.2 Ultrafiltration 10 3.2.1 Advantages and disadvantages of ultrafiltration 11 3.3 The principle of immunoaffinity 11 3.3.1 Advantages and disadvantages of immunoaffinity 11 3.4 Precipitation 12 3.4.1 Advantages and disadvantages of precipitation 12 3.5 Scalability of UC, UF and precipitation 13 4 Exosome purification using agarose chromatography techniques 14 4.1 Purification of exosomes based on size 16 4.1.1 Size-exclusion chromatography (SEC) 16 4.1.1.1 sec在EV和外部组中研究16 4.1.1.2使用SEC 17 4.1.1.3隔离EV的交联的Sepharose树脂,用于外部和EV-溶解的预包装的SEC柱18 4.1.1.4
(a)Anomala albopilosa的Elytron的反射和透射光学显微照片。(b)Anomala albopilosa的Elytron的透射光学显微照片。(c)左圆极化光板下方的Anomala albopilosa的金属绿色反射。(d)在右圆极化光板下没有反射。(E)左圆极化光板下方的金属紫色反射。(f)在右圆极化光板下没有反射。(g)左右圆形偏振板下的照片,L + R表示左右极化器的重叠。信用:下一材料(2025)。doi:10.1016/j.nxmate.2025.100516
理由:核(NP)纤维化是椎间盘变性(IVDD)的促成因素,该因素缺乏有效的治疗。这项研究的重点是阐明TGF-β信号阻遏物滑雪物在NP纤维化中的作用和机制,并探索其治疗潜力。方法:单细胞RNA测序(SCRNA-SEQ)用于研究纤维化核细胞细胞(NPC)亚群并评估TGF-β信号传导激活。将靶向纤维化NPC标记FAP和SKI mRNA的单链可变片段(SCFV)的两个重组质粒共转染到HEK-293T细胞中,以产生功能化的外泌体(EX SKI+SCFV)。将EX SKI+SCFV添加到明胶/氧化的藻酸钠水凝胶中产生了名为GEL@ex Ski+SCFV的pH响应外部/水凝胶系统。通过RNA测序,分子对接和共免疫沉淀评估了Gel@Ex Ski+SCFV的治疗效果和基础机制。结果:纤维化的NPC子集的特征是FAP升高和滑雪表达降低,以及TGF-β信号传导途径的激活。滑雪过表达降低了TGF-β处理的NPC中的纤维化。EX SKI+SCFV成功地将滑雪mRNA传递到表达FAP的纤维化NPC中。gel@ex Ski+SCFV具有良好的机械性能,可降解性,注射性和生物相容性。gel@ex Ski+SCFV有效地减轻了大鼠的NP纤维化和IVDD。RNA测序,分子对接和共免疫沉淀显示滑雪可以与FOXO3相互作用以抑制TGF-β信号通路。
背景:同种异体造血干细胞移植(Allo-HSCT)是用于侵袭性血液学恶性肿瘤的有效治疗方法。但是,患上移植物抗宿主病(GVHD)的风险是Allo-HSCT的重大障碍。GVHD是一种使人衰弱的状况,具有高死亡率,当前的GVHD治疗选择受到限制,皮质类固醇是标准治疗方法。然而,类固醇的不良影响使长时间使用变得困难,因此需要开发更安全的疗法。IL-35产生的B细胞(I35-BREGS)已成为自身免疫性疾病期间免疫的关键调节剂。在这项研究中,我们研究了I35-BREGS免疫疗法是否可以抑制和减轻GVHD。方法:我们对经历了同种HSCT的小鼠进行了单一剂量的I35-BREG(1.5×10 6),并在转移后90天内监测了GVHD小鼠的疾病严重程度以及GVHD小鼠的存活。我们发现i35-bregs分泌含有膜结合的IL-35(I35-外观)的外泌体,并研究了是否可以将EX-VIVO产生的i35-外病体用作GVHD的独立免疫疗法。I35-BREG诱导的细胞因子或检查点蛋白(PD-1,LAG-3,CTLA-4)的表达。通过接近连接测定法(PLA),免疫组织化学/共聚焦显微镜和α倍折叠式培物建模的表征是通过接近连接测定法(PLA)的表征。与IL-35是分泌的细胞因子的观点相反,我们在这里表明i35-bregs通过膜结合的IL-35减轻GVHD,并通过分泌i35-效果。结果:单剂量为1.5×10 6 I35-BREG降低了GVHD的严重程度和延长的GVHD存活率,超过70%的I35-BREG处理的小鼠在转移后第90天超过第90天,同时观察到在第90天,同时观察到100%的死亡率,在未经培训的小鼠中,由45日在未经培养的小鼠中。此外,i35-BREGS或EX-VIVO产生的i35-陈述诱导同种反应性的T细胞,以上调与T细胞疲劳和厌食的检查点蛋白质,并抑制同种反应性反应,并抑制抑制GVHD的感染性耐受性机制。重要的是,I35-BREGS或I35-诊断物通过增加涂有免疫抑制i35-示例的旁观者淋巴细胞来抑制GVHD。结论:这项研究表明,I35-BREG和I35-诊断在缓解GVHD中起着至关重要的作用。I35-BREG和I35-异型体免疫疗法的结合可能是治疗GVHD和其他炎症性疾病的有效策略。
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医学研究和治疗。这是一些最有前途的应用:•疾病生物标志物:外泌体在各种体内表现,包括血液,尿液和唾液。他们的内容反映了其原籍细胞的状态,使其成为疾病生物标志物的良好候选人。研究人员正在开发基于外部的诊断,用于早期检测癌症,神经退行性疾病和心血管条件。例如,源自肿瘤细胞的外泌体带有肿瘤特异性标记,允许非不创癌症诊断和监测。•治疗递送系统:外泌体在细胞之间运输分子具有自然的效果,使其成为递送治疗剂的理想候选者。它们的生物相容性,越过生物障碍的能力和内在的靶向能力提供了重要的优势
越来越多的证据表明,外泌体(EXOS)携带的非编码小RNA(miRNA)在多囊卵巢综合征(PCOS)的发展和治疗中起重要作用。在这项研究中,我们证明了PCOS小鼠血清衍生的EXOS促进了颗粒细胞(GCS)螺旋病,并诱导体内PCOS样表型的发生。值得注意的是,EXO miRNA测序与体外增益和功能丧失测定法相结合,表明MiR-128-3p在小鼠的血清中不存在的MiR-128-3p与PCOS的血清中不存在,可调节脂质的过氧化和GC敏感性对肥大诱导的脂质敏感性。从机械上讲,miR-128-3p的直接靶标CSF1的过表达逆转了miR-128-3p的抗肿瘤效应。相反,在CSF1降低的GC中减少了铁凋亡诱导。此外,我们证明了miR-128-3p抑制通过CSF1激活p38/ JNK途径,从而导致NRF2介导的SLC7A11转录下调,从而触发GC铁的过载。此外,鞘内miR-128-3p agomir注射到小鼠卵巢中,改善了PCOS样特征,并恢复了letrozole诱导的小鼠的生育能力。这项研究揭示了基于循环外来的PCOS的病理机制,并提供了miR-128-3p和CSF1在卵巢GC中的作用的第一个证据。该发现预计将为PCOS治疗提供有希望的治疗靶标。
主动上肢外骨骼是神经恢复的潜在强大工具。该潜力取决于几种基本控制模式,其中一种是透明度。在这种控制模式下,外骨骼必须遵循人类运动而不会改变它,从理论上讲,这意味着无效的相互作用工作。达到透明度的水平高,尽管不完美,既需要一种适当的控制方法,又需要对外骨骼对人类运动的影响进行深入评估。本文基于识别外骨骼动力学的识别,或者是在力反馈控制或结合下引入了三种不同的“透明”控制器的评估。因此,这些控制器可能会通过设计明显诱导不同水平的透明度。进行的调查可以更好地理解人类如何适应一定是不完事的透明控制器。一组14名参与者受到这三个控制者的束缚,同时在副臂平面进行运动。随后的分析是根据相互作用,运动学,肌电图和人体工程学反馈问卷进行的。结果表明,在执行透明的控制器较少的情况下,参与者的策略往往会引起相对较高的相互作用工作,并具有较高的肌肉活动,从而导致运动学指标的敏感性很小。换句话说,截然不同的残留互动工作并不一定会引起非常不同的运动运动学。这样的行为可以通过自然的人类倾向来解释以维护其首选的运动学的努力,应在将来的透明控制器评估中考虑到这一点。
摘要背景:急性肺损伤及其并发症急性呼吸窘迫综合征是严重的临床疾病,但治疗方法有限。其中,干细胞似乎是一种很有前途的替代疗法。在本研究中,我们首次研究并比较了骨髓干细胞 (BMSCs) 及其外泌体对油酸诱导的大鼠肺损伤的影响。方法:我们通过静脉注射油酸 (60 mg/kg) 来诱导急性肺损伤;此后,我们在注射油酸两小时后将大鼠 BMSCs (1 x 10 6 ) 和外泌体 (通过市售试剂盒从 1 x 10 6 BMSCs 中获得) 静脉注射到尾静脉。24 小时后,通过深度麻醉处死大鼠,获取肺组织。使用苏木精-伊红染色的样本检查,评估出血、白细胞浸润、水肿和增生等参数。流式细胞仪验证了从干细胞培养基中获得的外泌体。结果:肺损伤后注射干细胞和外泌体组分可恢复所有参数;然而,骨髓间充质干细胞的再生能力优于其外泌体组分(p = 0.004)。结论:干细胞及其外泌体组分可被视为治疗大鼠油酸诱导性肺损伤的替代疗法,其母体来源比外泌体更有效;干细胞似乎更有效。HIPPOKRATIA 2024, 28 (3):100-108。
