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威斯康星州免疫接种要求 2024-2025
今年，我们将继续利用在线流程让学校向当地卫生部门和州政府报告。 纸质版本：https://www.dhs.wisconsin.gov/forms/f0/f04002.pdf 在线调查：https://redcap.wisconsin.gov/surveys/?s=Y49JFMFLL3F3KYCC 请注意，无法使用 Internet Explorer 完成 REDCap 调查。 请使用 Google Chrome 或 Microsoft Edge 完成调查。 任何一份报告都满足威斯康星州法律（威斯康星州行政法典第 144 章：https://docs.legis.wisconsin.gov/code/admin_code/dhs/110/144）对每所学校的报告要求，即在截止日期（第 40 个上课日）之前向当地卫生部门提交报告。 无需向当地卫生部门单独发送表格的纸质副本。 上学年的学校合规结果可以在线获取。学校和学区应使用
大学公园校区
D3 篮球场 C3 Brittingham 校内运动场 B4 Colich 田径中心、CTF** 体育馆、LA 纪念馆**博览会公园 C4 Cromwell 运动场、CFX B3 Dedeaux 运动场、BDF H5 Galen 运动馆、GAP H5 Galen 中心、GEC B2 高尔夫练习场、GPC C4 Heritage Hall、HER B3 Howard Jones 运动场 B4 Kennedy 运动场 C4 Loker 田径场、LTS C2 Lyon 中心、LRC A3 Marks 网球场 F0 McAlister 足球场 C3 McKay、John 中心、JMC G5 Merle Norman 体育场 D4 体育馆 A2 网球场 H5 售票处（Galen 中心、GEC） D2 USC 村健身中心、CIC C2 Uytengsu 水上运动中心、UAC
用于斑马鱼组织特异性基因破坏的 CRISPR/Cas9 载体系统
CRISPR/Cas9 基因组编辑技术极大地促进了多种生物体内和体外基因的靶向失活。在斑马鱼中，只需将向导 RNA (gRNA) 和 Cas9 mRNA 注射到单细胞阶段胚胎中，即可快速生成敲除系。在这里，我们报告了一种简单且可扩展的基于 CRISPR 的载体系统，用于斑马鱼的组织特异性基因失活。作为原理证明，我们使用带有 gata1 启动子的载体来驱动 Cas9 表达，以沉默与血红素生物合成有关的 urod 基因，特别是在红细胞谱系中。Urod 靶向在斑马鱼胚胎中产生了红色荧光红细胞，重现了在 yquem 突变体中观察到的表型。虽然 F0 胚胎表现出嵌合基因破坏，但这种表型在稳定的 F1 鱼中似乎非常明显。该载体系统构成了空间控制基因敲除的独特工具，大大拓宽了斑马鱼功能丧失研究的范围。
dafi36-2619_dafgm2022-01 - 空军
ADOS-AC 人日计划以合规为导向，受法律管辖，并支持正规空军 (RegAF) 的作战和战略需求。在本文件中，术语 ADOS-AC 人日与军事人员拨款 (MPA) 互换使用。本出版物适用于 RegAF、空军预备役 (AFR) 和空军国民警卫队 (ANG)。它是与人力、人事和服务副参谋长 (AF/A1)、空军预备役 (AF/RE) 参谋长和空军国民警卫队 (NGB/CF) 主任合作开发的。本出版物可以在任何级别进行补充；主要司令部 (MAJCOM) 级别的补充必须在认证和批准之前得到人力资源管理战略委员会的批准。本指令要求收集和/或维护受 1974 年隐私法保护的信息，该法由 10 USC § 9013、空军部长、5 USC § 522a、个人保存记录授权。适用的记录系统通知 F0 33 AFRC A，预备役参与管理系统记录，F036 AF PC Q，人员数据系统，以及 F065 AFRC C，预备役命令书写系统-预备役记录，可在以下网址获取：http://dpclo.defense.gov/Privacy/SORNs.aspx。确保所有记录都以
使用简化的 CRISPR/Cas9 敲入方法对青鳉进行内源性蛋白质标记
摘要 CRISPR/Cas9 系统已用于在多种物种中通过同源定向修复生成荧光标记的融合蛋白。尽管它取得了革命性的成功，但仍然迫切需要提高研究生物中基因组编辑的简便性和效率。在这里，我们建立了一种简化、高效且精确的 CRISPR/Cas9 介导青鳉 (Oryzias latipes) 内源性蛋白质标记策略。我们使用一种无克隆方法，该方法依赖于 PCR 扩增的供体片段，该片段包含由短同源臂 (30-40 bp) 两侧的荧光报告序列、合成的单向导 RNA 和 Cas9 mRNA。我们生成了八个新的敲入系，具有高效的 F0 靶向和种系传递效率。全基因组测序结果显示仅在目标位点发生单拷贝整合事件。我们对这些融合蛋白系进行了初步表征，大大扩展了青鳉可用的遗传工具库。具体来说，我们表明 mScarlet-pcna 线具有作为增殖区的生物范围标签和内源性细胞周期报告基因的潜力。
通过受体相互作用和正反馈调节Nodal信号传播
摘要 在脊椎动物胚胎发生过程中，胚层由分泌的 Nodal 信号形成图案。在经典模型中，Nodal 通过与由 I/II 型激活素受体 (Acvr) 和辅助受体 Tdgf1 组成的复合物结合来引发信号。然而，目前尚不清楚受体结合是否也会影响 Nodal 本身在胚胎中的分布，并且尚不清楚哪些假定的 Acvr 旁系同源物介导斑马鱼中的 Nodal 信号。在这里，我们表征了三种 I 型 (Acvr1) 和四种 II 型 (Acvr2) 同源物，并表明 - 除 Acvr1c 外 - 所有受体编码转录本都是母体沉积的，并且在斑马鱼胚胎发生过程中存在。我们生成了突变体并将它们与组合吗啉代敲低和 CRISPR F0 敲除 (KO) 方法一起使用以评估化合物的功能丧失表型。我们发现 Acvr2 同源物在形成早期斑马鱼胚胎的过程中，部分冗余地、部分独立于 Nodal 发挥作用，而 I 型受体 Acvr1b-a 和 Acvr1b-b 冗余地充当 Nodal 信号的主要介质。通过结合定量分析和表达操纵，我们发现反馈调节的 I 型受体和辅助受体可以直接影响 Nodal 的扩散和分布，为胚层模式形成过程中 Nodal 信号的空间限制提供了一种机制。
新一代哺乳动物遗传学技术实现高通量转基因动物实验
摘要 动物模型是现代科学家进行生物实验和体内研究假设的重要工具。然而，在过去十年中，提高此类动物实验的通量一直是一个巨大的挑战。传统上，体内高通量分析是通过大规模诱变剂驱动的正向遗传筛选实现的，需要数年时间才能找到致病基因。相反，反向遗传学加速了致病基因的识别过程，但其通量也受到两个障碍的限制，即基因组修饰步骤和耗时的交叉步骤。下一代遗传学被定义为无需交叉的遗传学，能够产生可以在创始代 (F0) 进行分析的基因修饰动物。这种方法是或可以通过基因编辑和基于病毒的高效基因修饰的最新技术进步来实现。值得注意的是，下一代遗传学加速了跨物种研究的进程，它将成为动物实验中的一种有用技术，因为它可以在个体水平上提供遗传扰动而无需交叉。在本综述中，我们首先介绍基于动物的高通量分析的历史，特别关注时间生物学。然后，我们描述了在动物实验中提高基因修饰效率的方法，以及为什么杂交仍然是实现更高效率的障碍。此外，我们提到三重 CRISPR 是实现下一代遗传学的关键技术。最后，我们讨论了下一代哺乳动物遗传学的潜在应用和局限性。
BMP7B和BMPR1BA脆皮斑马鱼
1 Department of Molecular Embryology, Institute of Anatomy and Cell Biology, Faculty of Medicine, University Freiburg, 79104 Freiburg, Germany 2 Faculty of Health, Security, Society, Furtwangen University, Furtwangen, Germany Corresponding author: Stephan.heermann@hs-furtwangen.de Abstract The visual system is highly specialized and its function is substantially depending on the proper development of眼睛。早期眼睛发育始于单个眼场的定义，该视野位于前神经板（ANP）中。该单一眼场连续分开，两个视线囊泡在侧面出现。然后将这些囊泡转化为光学杯，未来视网膜在其中有所区别。全脑脑（HPE）是一种频繁的发育前脑疾病，其中ANP结构域的分裂受到阻碍。hpe主要是遗传联系的，我们最近表明，BMP拮抗作用对于眼场和远程脑分裂至关重要。过多的BMP诱导导致视网膜祖细胞卡在畸形前脑内。在这项研究中，使用斑马鱼作为模型，我们在F0一代中使用急性CRISPR/ CAS9分析显示了BMP7B和BMPR1BA的必要性，以进行适当的前脑发育。在两个基因的清脆中，我们都发现了HPE表型，例如环境。对BMP7B酥脆的进一步分析表明，主要是眼场受到影响，而不是远程脑前体域。关键词：BMP7B，BMPR1BA，Holoprosencephaly，Cyclopia，BMP
使用 ACEofBASEs 靶标预测对具有碱基编辑的 DNA 变异进行精确的体内功能分析
摘要单核苷酸变异 (SNV) 是影响个体性状和疾病易感性的普遍遗传因素。碱基编辑器、橡胶和铅笔基因组编辑工具的最新开发和优化现在有望实现对模型生物中的 SNV 进行直接功能评估。然而，缺乏有助于靶标预测的生物信息学工具限制了碱基编辑在体内的应用。在这里，我们为青鳉 (Oryzias latipes) 和斑马鱼 (Danio rerio) 中的腺嘌呤和胞嘧啶碱基编辑提供了一个框架，非常适合可扩展的验证研究。我们开发了一个在线碱基编辑工具 ACEofBASEs（对碱基编辑的仔细评估），通过简化 sgRNA 设计和进行脱靶评估来促进决策。我们在青鳉和斑马鱼中使用最先进的腺嘌呤 (ABE) 和胞嘧啶碱基编辑器 (CBE) 来高效编辑眼色素沉着基因和转基因 GFP 功能。编码肌钙蛋白 T 和钾通道 ERG 的基因中的碱基编辑忠实地再现了已知的心脏表型。等位基因的深度测序揭示了预期编辑的丰富性，而 ABE8e 和 evoBE4max 的插入或删除 (indel) 事件水平较低。我们最终在 F0 和 F1 中验证了先天性心脏病 (CHD) dapk3、ube2b、usp44 和 ptpn11 的新候选基因中的错义突变，这些目标基因中有基因型-表型相关性。该碱基编辑框架适用于鱼类中可获得的多种 SNV 易感性状，有助于直接验证候选基因并确定其优先级，以便进行详细的机制下游研究。
afi10-201_dafgm2022-02 - 空军
本出版物实施美国空军部 (DAF) 政策指令 (DAFPD) 10-2《战备情况》，本出版物适用于正规空军 (RegAF)、空军国民警卫队 (ANG) 和空军预备役 (AFR) 的所有文职和制服成员，但本出版物或 ANG 和/或 AFR 补充文件中注明的一些例外情况除外。本出版物不适用于美国太空部队。本指令要求收集和/或维护受 1974 年隐私法保护的信息，该法案由国防部指令 (DoDD) 5400.11《国防部隐私和公民自由计划》授权。适用的记录通知系统 (SORN) 是 F0 33 AFRC A，预备役参与管理系统记录；F036 AF PC Q，人员数据系统；和 F065 AFRC C，空军预备役命令书写系统 - 预备役记录，可在以下网址获取：http://dpclo.defense.gov/Privacy/SORNs.aspx。确保本出版物中规定的流程生成的所有记录均遵守空军指令 33-322《记录管理和信息治理计划》，并按照空军记录处置时间表进行处置，该时间表位于空军记录信息管理系统中。本出版物第 4 章中的报告要求不受 AFI 33-324《空军信息收集和报告管理计划》的许可限制。 (T-0) 使用 DAF 表格 847《出版物变更建议》将建议的变更和对本出版物的疑问提交给主要责任办公室 (OPR)；将 DAF 表格 847 从现场通过相应的职能指挥链传递。本出版物中放弃联队或单位级别要求的权限在合规声明后以层级（“T-0、T-1、T-2、T-3”）编号标识。有关与等级编号相关的权限的描述，请参阅空军手册 (DAFMAN) 90-161《发布流程和程序》。