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改进的表征生物处理超滤膜的方法
超滤（UF）膜通常用于下游过程，例如抗纯化和浓度的抗体，mRNA疫苗和病毒样颗粒（VLP）。超滤也仍然是涉及病毒载体和基于脂质载体的新兴细胞和基因疗法（CGT）的关键纯化工具。特别是，由于其低剪切，低结垢和可靠的性能，因此比CGT空间中的板和框架盒要优选空心纤维形式。另一方面，更适当地适用于微米大小的颗粒，例如在细胞培养灌注过程中保留细胞。图1显示了带有亚微米孔的5-50 nm和MF膜不等的UF膜的孔径分布，这些膜说明了生物过程过滤应用中使用的孔径较宽。显示的数据来自从行业中不同类型的膜获得的典型结果，以突出两种孔径面额之间的对比度。
扩展了XCC-辅助农业浸润的前沿。
xanthomonas citri subsp。柑橘是柑橘溃疡的因果毒剂，近年来已被视为农业浸润的新型载体。XCC-辅助农业渗透提供了几种优势XCC在将DNA输送到植物细胞中的效率非常有效，从而导致快速且稳健的基因表达。XCC可用于多种植物物种，包括丁香和单子叶植物，使其成为植物生物学家的多功能工具。与涉及植物组织伤口的传统农业浸润方法不同，XCC促成的农业浸润是微创的，可减少潜在的组织损害和对植物的压力。使用XCC促进的农业浸润引入的基因通常会瞬时表达，这允许快速测试基因功能，而无需永久改变植物的基因组[2]。
气相渗透工艺中的限制步骤 - NSF-PAR
解释无机成分深度分布以了解气相渗透过程中的限速步骤 Shuaib A. Balogun 1、Yi Ren 2、Ryan P. Lively 2 和 Mark D. Losego 1,* 1 佐治亚理工学院材料科学与工程学院，美国佐治亚州亚特兰大 2 佐治亚理工学院化学与生物分子工程学院，美国佐治亚州亚特兰大 *电子邮件：losego@gatech.edu 摘要 气相渗透 (VPI) 是一种聚合后改性技术，它将无机物注入聚合物中以创建具有新性能的有机-无机杂化材料。关于 VPI 工艺背后的化学动力学，我们仍有许多未解之谜。本研究的目的是更好地了解控制三甲基铝 (TMA) 和 TiCl 4 渗透到 PMMA 中形成无机-PMMA 杂化材料的工艺动力学。为了获得深刻见解，本文首先研究了根据最近提出的 VPI 反应扩散模型计算出的无机物时空浓度的预测结果。该模型深入了解了材料从聚合物转变为混合物时产生的 Damköhler 数（反应与扩散速率）和非 Fickian 扩散过程（阻碍）如何影响无机浓度深度剖面随时间的变化。随后，收集了 90 °C 和 135 °C 下 TMA 和 TiCl 4 渗透 PMMA 薄膜的实验性 XPS 深度剖面。将这些深度剖面在不同渗透时间下的功能行为与各种计算预测进行定性比较，并得出关于每个过程机制的结论。对于本文研究的薄膜厚度（200 nm），TMA 渗透到 PMMA 中似乎从低温（90 °C）下的扩散限制过程转变为高温（135 °C）下的反应限制过程。 TMA 似乎可以在几个小时内完全渗透这些 200 nm 的 PMMA 薄膜，但 TiCl 4 渗透到 PMMA 中的速度要慢得多，即使在前体暴露 2 天后也未完全饱和。90 °C 下的渗透速度非常慢，无法得出有关机理的明确结论；然而，在 135 °C 下，TiCl 4 渗透到 PMMA 中显然是一个反应限制过程，TiCl 4 仅需几分钟即可渗透整个厚度（低浓度），但无机负载在 2 天内以均匀的方式持续增加。近表面与反应限制过程预期的均匀负载的偏差也表明 TiCl 4 渗透到 PMMA 中的扩散阻碍很大。这些结果展示了一种新的非原位分析方法，用于研究气相渗透的限速过程机制。
弹性蛋白靶向纳米粒子递送强力霉素可缓解细胞因子风暴并减少 LPS 介导的肺部炎症中的免疫细胞浸润
气道重塑是急性和慢性肺部疾病（如急性病毒感染，包括 SARS-CoV-2 和肺气肿）最明显的后果，它是呼吸系统结构成分中促炎性细胞内和细胞外事件的后遗症 [1,2]。这些气道疾病导致上皮细胞凋亡和炎性细胞浸润。所有这些病理事件均导致或由肺泡弹性蛋白损伤所致，而肺泡弹性蛋白是呼吸力学的重要组成部分，负责肺弹性回缩。促炎性细胞因子 IL-6、IL-1 β、TNF- α、IL-23 和蛋白酶 MMPs 2、9 和 12 是肺部炎症相关变化的常见调控因子 [3]。它们已被证实可以降低弹性蛋白 mRNA 表达或直接降解肺中的弹性蛋白。这些细胞因子目前不仅是 COPD 药物研发的主要靶点，也是肺部病毒感染引起急性肺损伤的主要靶点。FDA 已批准两类 IL-6 抑制剂用于治疗 COVID 19，即 a) 抗 IL-6 受体单克隆抗体 (mAb)（例如 sarilumab、tocilizumab）和 b) 抗 IL-6 mAb（即 siltuximab）。FDA 最近于 2022 年 12 月 21 日批准托珠单抗与地塞米松一起用于 COVID 19 患者作为辅助疗法，而 Sarilumab 尚未被批准用于细胞因子风暴管理 [4]。然而，这些药物有严重的副作用，包括中性粒细胞减少症、低纤维蛋白原血症和增加继发感染的风险，如结核病、细菌和真菌感染以及碗穿孔，限制了它们在一般健康人群中的使用 [5]。强力霉素 (Doxy) 已被发现在许多情况下是一种有用的药物。最近的一份报告显示，用 Doxy 治疗 Vero E6 细胞前后均能以剂量依赖性方式有效抑制 SARS-CoV-2 毒株 (IHUMI-3) [6]。Doxy 的抗炎潜力被用于治疗慢性疾病，包括布鲁氏菌病性脊柱炎、创伤性脑损伤、腹主动脉瘤，其中它已被证明可以降低全身炎症标志物 IL-6 的水平，并抑制 MCP-1 和 MMP 等趋化因子 [7-10]。相反，Butler 等人最近的一项研究表明，用强力霉素（口服）治疗并不能减少 COVID-19 相关的康复时间以及死亡人数 [11]。然而，这是系统性地给予一种首过代谢损失很大的药物，因此可能无法在局部肺组织中达到高浓度。此前，我们已经证明单次静脉注射注射弹性蛋白抗体偶联的载有强力霉素的牛血清白蛋白纳米颗粒 (Doxy NP) 可有效靶向肺气肿，并导致强力霉素在四周内局部持续释放到肺部，与强力霉素 IV 相比，导致基质金属蛋白酶 (MMP) 活性降低 [ 12 ]。我们的方法是当纳米颗粒进入肺部弹性蛋白损伤部位时将强力霉素输送到肺部，因此，少量药物比全身剂量更有效。我们并不是说这种疗法可以恢复 COVID 患者的肺部，而是强调靶向给药比全身给药更好。 Doxy 的作用部分在于抑制蛋白激酶 B (AKT) 信号通路和丝裂原活化蛋白激酶 (MAPKs) 信号蛋白，包括体外 VSMC 中的细胞外信号调节激酶 (ERK)、c-Jun 氨基末端激酶 (JNK) [ 5 ]。其炎症小体抑制能力被发现有利于改变前列腺癌 (PC3) 和肺癌细胞系 (A549) 中的肿瘤微环境 [ 13 ]。然而，目前尚不清楚 Doxy 如何抑制炎症反应，特别是在肺部。我们想测试 Flexibzumab 偶联的载有强力霉素的牛血清白蛋白纳米颗粒的静脉输送是否
气相渗透工艺中的限制步骤
气相渗透 (VPI) 是一种聚合后改性技术，可将无机物注入聚合物中以产生具有新特性的有机-无机混合材料。关于 VPI 工艺背后的化学动力学，我们仍有许多未解之谜。本研究旨在更好地了解控制三甲基铝 (TMA) 和 TiCl 4 渗透到 PMMA 中形成无机-PMMA 混合材料的工艺动力学。为了获得深入见解，本文首先研究了根据最近提出的 VPI 反应扩散模型计算出的无机物时空浓度的预测结果。该模型深入了解了 Damköhler 数（反应与扩散速率）和非 Fickian 扩散过程（阻碍），这些过程是由材料从聚合物转变为混合材料而产生的，如何影响无机浓度深度剖面随时间的变化。随后，收集了 90 °C 和 135 °C 下 TMA 和 TiCl 4 渗透 PMMA 薄膜的实验性 XPS 深度剖面。将这些深度剖面在不同渗透时间下的功能行为与各种计算预测进行定性比较，并得出关于每个过程机制的结论。对于本文研究的薄膜厚度（200 nm），TMA 渗透到 PMMA 中似乎从低温（90 °C）下的扩散限制过程转变为高温（135 °C）下的反应限制过程。虽然 TMA 似乎在几个小时内完全渗透到这些 200 nm 的 PMMA 薄膜中，但 TiCl 4 渗透到 PMMA 中的速度要慢得多，即使在前体暴露 2 天后也不会完全饱和。在 90 °C 下的渗透速度非常慢，以至于无法得出关于机制的明确结论；然而，在 135 °C 下，TiCl 4 渗透到 PMMA 中显然是一个反应限制过程，TiCl 4 仅在几分钟内渗透到整个厚度（低浓度），但无机负载在 2 天内以均匀的方式持续增加。近表面与反应限制过程预期的均匀加载偏差也表明 TiCl 4 渗透到 PMMA 中的扩散阻碍很大。这些结果展示了一种新的非原位分析方法，用于研究气相渗透的速率限制过程机制。
花青素辅助农杆菌浸润用于快速评估多种植物物种的基因组编辑效率
摘要：基于 CRISPR 的基因组编辑技术继续推动生命科学的重大进步。实现基因组编辑在植物和农业中广泛应用的主要挑战是建立能够使用瞬态方法快速、全面和精确评估编辑技术的方法。在这里，我们报告了一种使用农杆菌浸润技术的新型快速基因组编辑评估方法，可以对基因组编辑效率进行广谱、简单和精确的评估。我们采用了花青素标记物来促进对基因组编辑细胞的视觉筛选，以用于成年草莓果实以及番茄果实、棉花叶和甜菜叶。使用这种方法，我们展示了快速测量由 SpCas9、LbCas12a、A3A-PBE、ABE8e 和 PPE 介导的基因组编辑效率的能力。这种新方法将使研究人员能够快速轻松地评估广泛植物物种的基因组编辑工具，从而进一步加快基因组编辑农作物的开发。
花青素辅助农杆菌浸润用于快速评估多种植物物种的基因组编辑效率
摘要：基于 CRISPR 的基因组编辑技术继续推动生命科学的重大进步。实现基因组编辑在植物和农业中的广泛应用的主要挑战是建立能够使用瞬态方法快速、全面和精确地评估编辑技术的方法。在这里，我们报告了一种使用农杆菌浸润技术的新型快速基因组编辑评估方法，可以对基因组编辑效率进行广谱、简单和精确的评估。我们使用花青素标记来促进基因组编辑细胞的视觉筛选，以用于成年草莓果实以及番茄果实、棉花叶和甜菜叶。使用这种方法，我们展示了快速测量 SpCas9、LbCas12a、A3A-PBE、ABE8e 和 PPE 介导的基因组编辑效率的能力。这种新方法将使研究人员能够快速轻松地评估广泛植物物种的基因组编辑工具，从而进一步加快基因组编辑农作物的开发。
通过靶向植物苯二苯乙烯去饱和酶基因
cow-pea（Vigna unguiculata）是豆科植物的主食，遍布撒哈拉以南非洲和其他热带和亚热带地区。考虑到预计的气候变化和全球人口增加，Cowpea对炎热气候的适应，对干旱的抵抗力以及固氮功能使其成为面临未来挑战的特别有吸引力的农作物。尽管有这些有益的特征，但由于其对转变和较长的再生时间的重现，cow豆的有效品种的改善在cow豆方面具有挑战性。瞬态基因分析分析可以提供解决方案来减轻这些问题，因为它们允许研究人员在投资时间和资源密集型转型过程之前测试基因编辑结构。在这项研究中，我们开发了一种改进的cow豆原生质体隔离原质量，一种瞬态原生质体测定和一种农业透明测定法，用于初始测试和验证基因编辑构建体和基因表达研究。为了测试这些促销，我们评估了使用聚乙烯糖（PEG）介导的透明二糖（PEG）介导的二苯乙烯（PEG）介导的CRISPR-CAS9构建体的疗效，该序列用拟苯乙烯溶剂酶（PDS）作为靶基因，并用聚乙烯介导的透射率（PEG）介导的透射率。sanger测序从转化的原生质体和农业灌注的cow豆叶子对DNA进行了测序，在目标序列中显示出几个大的缺失。本研究中开发的原生质体系统和农业过滤协议提供了多功能工具来测试基因编辑组合，然后启动植物转化，从而提高了使用活性SGRNA并获得所需的编辑和目标表型的机会。
使用纳滤、反渗透和膜电容去离子处理含有四甲基氢氧化铵 (TMAH) 的半导体废水
摘要：随着半导体行业在过去几十年的迅猛发展，其对环境的影响也日益令人担忧，包括淡水的抽取和有害废水的产生。四甲基氢氧化铵 (TMAH) 是半导体废水中不可避免的有毒化合物之一，应在废水排放前去除。然而，很少有经济实惠的技术可以去除半导体废水中的 TMAH。因此，本研究的目的是比较不同的处理方案，如膜电容去离子 (MCDI)、反渗透 (RO) 和纳滤 (NF)，用于处理含有 TMAH 的半导体废水。进行了一系列台式实验装置，以研究 TMAH、TDS 和 TOC 的去除效率。结果证实，MCDI 工艺和 RO 一样表现出很强的去除能力，而 NF 在相同的恢复条件下无法充分去除。 MCDI 对包括 TMA+ 在内的一价离子的去除率高于二价离子。此外，在碱性溶液中，MCDI 对 TMA+ 的去除率高于在中性和酸性条件下的去除率。这些结果首次证明了 MCDI 在处理含有 TMAH 的半导体废水方面具有巨大潜力。