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大肠杆菌基因分型的新方法
摘要：目前迫切需要一种操作简便、快速且成本低廉的大肠杆菌菌株种级鉴别方法。本文提出了两种用于大肠杆菌分离株基因分型的新型原始工具。所开发的第一种方法是 PCR-RFLP（聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性）检测，它使用一个高度可变的 fliC 基因，该基因编码 H 抗原作为分子靶标。在设计通用引物对和选择最佳限制性酶 Rsa I 之前，先对编码 53 种不同血清型 H 抗原（大肠杆菌鞭毛蛋白）的基因序列进行计算机比较分析。在对 16 个大肠杆菌基因组的完整序列进行生物信息学分析的基础上，选择了 MLST 方法的大肠杆菌基因组的目标片段。最初提出了七个分子靶点（七对引物），其中五种被发现可用于有效进行大肠杆菌菌株基因分型。两种开发的方法都显示出很高的区分能力，并且观察到所测试菌株的高度遗传多样性。在测试的 71 个菌株中，用 fliC RFLP-PCR 和 MLST 方法分别发现了 29 个和 47 个簇。用参考 BOX-PCR 方法区分菌株发现了 31 种不同的基因型。计算机分析显示，新 MLST 方法的鉴别能力与 Pasteur 和 Achtman 方案相当，并且高于 Clermont 开发的方法的鉴别能力。从流行病学的角度来看，我们的调查结果显示，在大多数情况下，患者感染了独特的菌株，可能来自环境来源。然而，从儿科、内科和神经内科病房的不同患者身上分离出的一些菌株在综合考虑三种方法的结果时被归类为同一基因型。这可能表明这些菌株在患者之间转移了。
使用外膜蛋白A，C和F
Salmonella Kentucky带来的全球公共卫生风险（S。肯塔基州）正在上升，特别是由于人类和动物种群中抗菌抗性基因的传播。这种血清在非洲普遍存在，已成为人类非脑性胃肠炎的显着原因。在这项研究中，我们使用了一种生物信息学方法来开发基于肽外膜蛋白A，C和F的基于肽的疫苗。肯塔基州。此外，我们采用了鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛蛋白（FLIC）（s。鼠伤寒）作为增强疫苗有效性的佐剂。通过这种方法，我们确定了14个CD8+和7个CD4+ T细胞表位，这些表位预先限制为各种MHC I类和MHC II类等位基因。预计的表皮预计将在疫苗配方中使用时达到94.91％的覆盖率。此外，我们确定了七个高度免疫原性的线性B细胞表位和三个构象B细胞表位。然后，使用适当的接头将这些T细胞和B细胞表位连接起来，以创建多角色疫苗（MEV）。增强了肽构建体的免疫原性，从s。鼠伤寒在N末端包括在内。由此产生的MEV结构表现出高结构质量和有利的理化特性。通过Toll样受体1、2、4和5进行了分子对接研究，然后进行分子动力学模拟，表明疫苗受体综合在能量上是可行的，稳定的和健壮的。免疫模拟结果表明，MEV引起的显着反应，包括IgG，IgM，CD8+ T细胞，CD4+ T-细胞和各种细胞因子（IFN-γ，TGF-β，IL-2，IL-10和IL-12），以及抗原水平的显着降低。尽管有这些有希望的内部发现结果，但进一步验证
更改最终的育儿计划
flic 3.1当事人不同意，如果您有最终的育儿计划或司法官员签署的最终育儿计划或最终监护令，并且您想更改探视时间表或与孩子一起生活的父母，则如何更改最终的育儿计划（孩子与子女抚养和子女抚养”时使用这些说明。您还可以使用这些指示来要求法院除最终的育儿计划或最终拘留命令外更改现有的子女抚养费。但是，如果您只想更改支持金额，请不要使用这些说明。要求主持人以获取有关如何更改子女抚养费的信息。由于Covid-19，所有听证会都是通过电话或视频进行的，大多数办公室仅提供远程服务。您应该咨询金县高等法院网页以获取最新信息。https://www.kingcounty.gov/courts/superior-court.aspx。
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