线粒体是细胞内活性氧(ROS)产生的主要部位。ROS是重要的sig nalling分子,但产生过多会导致细胞损伤和功能障碍。因此,准确确定线粒体内产生ROS的何时,方式和地点至关重要。以前,ROS检测涉及各种化学探针和荧光蛋白。这些仅由于分子在线粒体基质中的积累而有局限性,或者需要为每个不同物种表达新蛋白质。我们报告动态H 2 O 2在所有线粒体子室内具有惊人空间分辨率的变化。我们将自标记蛋白的特定靶向与新型H 2 O 2-反应性探针相结合。该方法是宽范围且灵活的,具有相同的表达蛋白质可加载带有不同染料和传感器的蛋白质。它为其他化学物种(除了ROS之外的其他化学物种)提供了一个框架,其在线粒体内的DY NAMICS尚不清楚,而无需设计新蛋白质。
据报道,通过直接测量原位施加不同量机械刺激后的发射变化,可以在微/纳米尺度上通过机械荧光变色活性进行力感应。[24,30,31,33–36] 然而,仍有一个问题有待探索,那就是材料的恢复。发射变化与施加的力有关,是由材料的形态变化引起的。[20–50] 这意味着,在最初施加力之后,后续的传感事件需要恢复原始形态——这个过程并不那么简单,因为这通常需要热退火[38]、溶剂熏蒸[25,27]或重结晶。 [20–22,37] 在基于 Au(I) 复合物 [28] 芘 [39,40] 蒽 [41,42] 四苯乙烯 [43,44] 吲哚基苯并噻二唑 [45] 三苯胺 [46] 硼配位 β -二酮复合物 [47] 和六硫代苯 [48] 的衍生物中观察到了自我恢复,即在环境条件下被划伤/研磨的材料自发恢复到初始状态(吸收、发射和形态)。然而,许多 MFC 活性材料尚未被开发用于多用途力传感应用,这不仅是因为此类研究所需仪器的复杂性 [24,30,31,33–36],还因为缺乏导致可逆性的分子设计 [40] 和对自我恢复机制的清晰理解。[30,45]
HAL 是一个多学科开放存取档案库,用于存放和传播科学研究文献,无论这些文献是否已出版。这些文献可能来自法国或国外的教学和研究机构,也可能来自公共或私人研究中心。
保留所有权利。未经许可不得重复使用。 (未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 medRxiv 永久展示预印本的许可。此预印本的版权所有者此版本于 2025 年 1 月 20 日发布。;https://doi.org/10.1101/2025.01.20.25320847 doi:medRxiv preprint
Thomas Lerond、Dmitri Yarekha、Vanessa Avramovic、Thierry Melin、S. Arscott。使用氙二氟化物蚀刻绝缘体上的硅,对芯片边缘硅微悬臂进行表面微加工。《微力学与微工程杂志》,2021 年,31 (8),第 085001 页。�10.1088/1361- 6439/ac0807�。�hal-03411474�
1 Inserm U1052、CNRS UMR5286、里昂癌症研究中心、里昂大学、里昂第一大学、L´eon B´erard 中心、F-69373 Lyon Cedex 08、法国、2 里昂民间临终关怀院多站点病理学研究所、Groupement Hospitalier Est、F-69677 Bron、法国、3 里昂大学药学院分析化学实验室、8 avenue Rockefeller、F-69373 Lyon、法国、4 里昂南医院中心 - 里昂民间临终关怀院生物化学和药物毒理学实验室、F-69495 Pierre B´enite、法国、5 内镜和胃肠病学系、Pavilion L、里昂市民临终关怀院 Edouard Herriot 医院,F-69008 里昂,法国,里昂高等师范学院 6,F-69007 里昂,法国和里昂大学里昂药学院毒理学实验室,8 avenue Rockefeller,F-69373 里昂,法国
Kai Mulcock,四年级,物理专业。作为我完成的第一项生物实验室工作,这是一个很好的介绍!有同学带领我上课很有帮助,因为我在询问和学习不同主题时感到更加自在和自信(尽管我对 A 级以外的任何生物学背景一无所知)。由于我不是生物学专业的学生,所以我不能谈论太多理论,但是,看到物理学中的一些东西的应用非常有趣!它提供了一个有用且必要的步骤,帮助我了解这是否是我想要进一步探索的领域,同时也向我展示了作为非生物学学生我可以填补哪些空白!
Kai Mulcock。 第四年,物理学。 作为我所做的生物实验室工作的第一个工作,这是一个很好的介绍! ,让同学带领上课很有帮助,因为我对询问和了解不同主题的自信和自信(尽管不知道超出水平的任何生物背景)。 ,由于我不是生物学专业的学生,所以我谈论的理论太多了,看到物理学的某些事情的应用也非常有趣! 它为帮助我知道这是否是我想探索的领域提供了一个有用的必要步骤,同时还向我展示了我可以作为非生物学生填补的何种利基!Kai Mulcock。第四年,物理学。作为我所做的生物实验室工作的第一个工作,这是一个很好的介绍!,让同学带领上课很有帮助,因为我对询问和了解不同主题的自信和自信(尽管不知道超出水平的任何生物背景)。,由于我不是生物学专业的学生,所以我谈论的理论太多了,看到物理学的某些事情的应用也非常有趣!它为帮助我知道这是否是我想探索的领域提供了一个有用的必要步骤,同时还向我展示了我可以作为非生物学生填补的何种利基!
嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞疗法已成为治疗血液恶性肿瘤的一种有吸引力的方法。但是,这种疗法的可访问性受到复杂制造工艺,有限的制造设施能力以及高技能劳动力的要求,以进行CAR-T细胞生产的手动步骤。为了最大程度地减少手动过程,CAR-T细胞制造场正在向封闭和自动化系统转移,包括分析工具,可提供对生产中细胞的间歇性监测的分析工具。因此,需要在封闭系统中密切监测CAR-T细胞的无标签技术。在这里,我们评估了配备了405nm紫罗兰色激光器的流式细胞仪的使用,用于研究T细胞中NADH和FAD自动荧光。我们的结果表明,NADH和FAD自动荧光的增加与T细胞激活标记,CD25的上调显着相关,并且在T细胞激活后的头三天,在消费培养基中的细胞外乳酸的增加。我们通过建立CAR-T细胞中FAD的平均荧光强度(MFI)的变化速率与使用G-Rex Biorx Biorextor的T细胞增殖速率之间的变化速率之间的关系来确定CAR-T细胞生产的终点的潜在用途。共同表明,自动荧光,尤其是FAD自动荧光,可以用作无标记的生物标志物(细胞属性),用于监测CAR-T细胞生产过程中T细胞激活和扩张。使用405nm可见光代替了遗传毒性紫外线波长来评估NADH和FAD自动荧光,为将自动荧光测量结果铺平了一种方式,以将自动荧光测量纳入封闭和自动化的系统中,以用于对CAR-T细胞制造的过程中的监测。
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