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IDT高通量杂交捕获术的长基因组片段的富集证明了协议（RUO23-2352_001 09/23）
图1。高通量杂交捕获量的长基因组片段工作流程。 （a）高分子量（HMW）基因组DNA需要长片段的制备和富集。 （b）使用高通量兼容的G管将HMW DNA碎片至〜10 kb。 （c）使用特殊准备的尺寸选择珠通过尺寸选择去除多余的较小片段。 （d）尺寸选定的片段被最终修复（ER）A-Tail（AT），并将适配器连接到适配器序列，并带有样品识别条形码序列。 （e）样品池与XGEN自定义HYB面板杂交，并捕获并富集。 （f）富集的目标片段通过远程PCR扩增。 （g）放大的富集片段是第二次尺寸选择的或清理以进行最佳测序读取长度。 然后，富集和条形码的样品池接受所需的第三代测序工作流程。高通量杂交捕获量的长基因组片段工作流程。（a）高分子量（HMW）基因组DNA需要长片段的制备和富集。（b）使用高通量兼容的G管将HMW DNA碎片至〜10 kb。（c）使用特殊准备的尺寸选择珠通过尺寸选择去除多余的较小片段。（d）尺寸选定的片段被最终修复（ER）A-Tail（AT），并将适配器连接到适配器序列，并带有样品识别条形码序列。（e）样品池与XGEN自定义HYB面板杂交，并捕获并富集。（f）富集的目标片段通过远程PCR扩增。（g）放大的富集片段是第二次尺寸选择的或清理以进行最佳测序读取长度。富集和条形码的样品池接受所需的第三代测序工作流程。
用于扩增被子植物质体基因 matK DNA 片段的有用引物设计
参考文献 Chase MW，Soltis DE，Olmstead RG，Morgan D.，Les DH，Mishler BD，Duvall M. R. ， 价格 R. A. ， Hills HG ， Qiu Y.-L . ， Kron KA ， Rettig J. H.，Conti E.，Palmer J. D 円 Manhart J. R. ， Sytsma K. J. ，迈克尔斯 H. J. ， 克莱斯 W. J. ， Karol KG ， Clark WD ， Hedroen M. ， Gaut BS ， Jansen R. K. ， 金K.-J. ， 温皮 CF ， 史密斯 J 。 F.，Fumier GR，Strauss SH，Xiang Q.-Y. ， Plunkett GM ， Soltis PS ， Swensen S. ， Williams SE ， Gadek P. A . ， 奎因 C.J. ， Eguiarte LE， Golenberg E.， Leam GH Jr.， Graham SW， Barrett SC， Dayanandan S. 和 Albert VA 1993. 种子植物的系统发育：质体基因 rbc 的核苷酸序列分析 L. Ann.密苏里机器人。警卫。 80: 528-580。道尔 J. J。和 Doyle J. L. 1987.一种用于少量新鲜叶组织的快速 DNA 分离程序。植物化学。公牛 l。 19: 11-15。/平塚 J. ， Shimada H. ， Whittier R. ， lshibashi T. ， Sakamoto M. ， Mori M. ， Kondo C. ， Ho 吋 i Y. ， Hirai A. ， Shinozaki K. 和 Sugiura M. 1989. 水稻（Oryza sativa）叶绿体基因组的完整核苷酸序列：不同 tRNA 基因之间的分子间重组导致谷物进化过程中的 m 吋 2 或质体 DNA 倒位。莫尔。基因 t 将军。 217: 185-194。 Johnson LA 和 Soltis DE 1994. 虎耳草科植物的 matK DNA 序列和系统发育重建。字符串系 统。博特。 19：143-156。 Neuhaus H. 和 Link G. 1987.芥菜的叶绿体 tRNA Lys (UUU) 基因。当前。基因。 11：251-257。 Steele KP 和 Vilgalys R. 1994. 利用质体基因 mat K 的核苷酸序列对花荬科进行系统发育分析。博特。 19：126-142。 Sugita M. ， Shinozaki K. 和 Sugiura M. 1985. 烟草叶绿体 tRNA Lys（UUU）基因含有一个2.5千碱基对的内含子：一个开放阅读框和内含子内保守的边界序列。 Proc. Na. l.学院Sci.USA 82: 3557-3561.
DNA组装与合成生物学
总结本申请说明证明了将SGRNA序列插入靶向DNA组件的9.5 kb载体中的便利性。与传统的克隆方法不同，必须合成和重新弥补两个寡核体，该新协议提供了一种设计寡核的简单方法，并与所需的向量组装。Nebuilder HIFI DNA组装主混合物对传统方法的实质性改进，特别是节省时间，易用性和成本。
RNA：Okazaki片段的DNA杂交造成了ku介导的障碍物的复制效果
非同源最终连接（NHEJ）因素在复制叉保护，重新启动和维修中。在这里，我们确定了一种与RNA相关的机制：在裂变酵母中建立NHEJ因子KU介导的障碍物的DNA杂种。rNase H活性促进新生的链降解和复制重新开始，RNase H2在处理RNA中的重要作用：DNA杂种以克服新生链降解的KU级杂种。rNase H2与MRN-CTP1轴合作，以KU的方式维持对复制应激的抗性。从机械上讲，新生链降解中RNAseH2的需求需要培养基活性，该活动允许建立KU级驻射击器exo1，而损害Okazaki碎片的成熟会加强KU驻式甲壳。最后，复制应力以原始酶依赖性方式诱导KU灶，并有利于KU结合与RNA：DNA杂交。我们提出了RNA的功能：DNA杂交源自冈崎片段的DNA杂交，以控制KU驻式核能指定核酸酶的要求，以使分叉切除。
将细胞融合与 CRISPR-Cas9 编辑相结合，在酵母中克隆较大的 DNA 片段或完整的细菌基因组
图 1：CReasPy-Fusion 方法的实验流程示意图。步骤 1（借用 CReasPy-Cloning 策略，左栏）：用两个质粒转化酵母，从而表达 Cas9 核酸酶和 gRNA。步骤 2（借用 Fusion Cloning 策略，右栏）：在线性重组模板（由酵母元件 CEN-HIS3 组成，带有或不带有 ARS，两侧是与目标基因座两侧相同的两个重组臂和一个抗生素抗性标记）存在下，将预装 pCas9 和 pgRNA 的酵母细胞与支原体细胞接触。步骤 3：进入酵母细胞后，目标基因组被 Cas9 切割，随后由酵母同源重组系统使用提供的线性 DNA 片段作为模板进行修复。因此，细菌基因组现在包括插入到精确位置的酵母元素，并由酵母作为着丝粒质粒携带。
将细胞融合与 CRISPR-Cas9 编辑相结合，在酵母中克隆较大的 DNA 片段或完整的细菌基因组
图 1：CReasPy-Fusion 方法的实验流程示意图。步骤 1（借用 CReasPy-Cloning 策略，左栏）：用两个质粒转化酵母，从而表达 Cas9 核酸酶和 gRNA。步骤 2（借用 Fusion Cloning 策略，右栏）：在线性重组模板（由酵母元件 CEN-HIS3 组成，带有或不带有 ARS，两侧是与目标基因座两侧相同的两个重组臂和一个抗生素抗性标记）存在下，将预装 pCas9 和 pgRNA 的酵母细胞与支原体细胞接触。步骤 3：进入酵母细胞后，目标基因组被 Cas9 切割，随后由酵母同源重组系统使用提供的线性 DNA 片段作为模板进行修复。因此，细菌基因组现在包括插入到精确位置的酵母元素，并由酵母作为着丝粒质粒携带。
IDT 使用 Alt-R CRISPR-Cas9 系统和 Megamer ssDNA 片段进行同源定向修复 (RUO21-0293_003 03/24)
* 我们保证针对人类、小鼠、大鼠、斑马鱼或线虫基因的预设计 gRNA 的性能。对于其他物种，您可以使用我们的专有算法来设计定制 gRNA。如果您有自己的或来自出版物的 gRNA 原型间隔物设计，请使用我们的设计检查工具评估它们的靶向和脱靶潜力，然后再订购使用我们的 Alt-R gRNA 修饰合成的 gRNA。有关预设计 gRNA 保证的详细信息，请参阅 www.idtdna.com/CRISPR-Cas9。
IDT_使用 Alt-R CRISPR-Cas9 系统和 Megamer ssDNA 片段进行同源性定向修复参考指南 (RUO21-0211_002 02/22)
30 多年来，IDT 的创新工具和基因组学应用解决方案一直在推动进步，激励科学家敢于梦想，实现下一个突破。IDT 开发、制造和销售核酸产品，为学术和商业研究、农业、医学诊断和药物开发等领域的生命科学行业提供支持。我们拥有全球业务，提供个性化的客户服务。
措施混合物很重要：多组分植物保护是必不可少的，对于应对病原微生物的巨大基因组可塑性和突变率
谷物尚未被观察到，因为经典的R-基因是易于克服的。的确，病原体种群的大量基因组变异性可能是由可转座元素，高突变和重组率以及有丝质和梅西斯期间不正确的染色体分离引起的，共同导致迅速发展的新毒力表型感染了以前的抵抗植物（Mouller et and and and and and and 2017）。 如今，人们对植物发作过程中真菌和细菌病原体采用的分子机制已被充分了解。 植物表现出对大多数微生物的免疫力，由不同的耐药层介导。 与病原体相关的分子模式（PAMP）接触时，植物免疫系统的第一层被植物模式识别受体（PRR）激活，这对于病原体至关重要，因此可以使结构性不变的分子（例如壳聚糖和分支的β-葡聚糖luculucan fungulucan fungulucan fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fingal fungals fragments fragments fragments fragments或capterial flagellin of to nisty Inders of and pamp）激活。 由于pAMP识别而建立了PAMP触发的免疫力（PTI）。 然而，成功的病原体已经开发出了通过修饰细胞表面和pAMP暴露和/或通过分泌效应子来避免pAMP识别的机制（Oliveiragarcia and Valent 2015）。 对抗药性遗传学的分子理解的显着突破是Harold H. Flor的X射线诱变实验与异源性亚麻生锈菌菌孢子（Flor 1958），最终引起了基因基因假设。 这一假设表明微生物气相（AVR-）基因产物被植物识别2017）。如今，人们对植物发作过程中真菌和细菌病原体采用的分子机制已被充分了解。植物表现出对大多数微生物的免疫力，由不同的耐药层介导。与病原体相关的分子模式（PAMP）接触时，植物免疫系统的第一层被植物模式识别受体（PRR）激活，这对于病原体至关重要，因此可以使结构性不变的分子（例如壳聚糖和分支的β-葡聚糖luculucan fungulucan fungulucan fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fungal fingal fungals fragments fragments fragments fragments或capterial flagellin of to nisty Inders of and pamp）激活。由于pAMP识别而建立了PAMP触发的免疫力（PTI）。成功的病原体已经开发出了通过修饰细胞表面和pAMP暴露和/或通过分泌效应子来避免pAMP识别的机制（Oliveiragarcia and Valent 2015）。对抗药性遗传学的分子理解的显着突破是Harold H. Flor的X射线诱变实验与异源性亚麻生锈菌菌孢子（Flor 1958），最终引起了基因基因假设。这一假设表明微生物气相（AVR-）基因产物被植物识别
2023; 13（9）：3041-3063。 doi：10.7150/thno.80901审查较小的尺寸包装更强的打孔 - 针对tum的小抗体片段的最新进展
附着在蛋白质，脂质或形成长而复杂的链上，糖是在自然界中最通用的翻译后修饰，并围绕所有人类细胞。独特的聚糖结构由免疫系统监测，并将自我与非自身和健康与恶性细胞区分开。异常的糖基化，称为肿瘤相关的碳水化合物抗原（TACAS），是癌症的标志，与癌症生物学的各个方面相关。因此，塔卡斯（Tacas）代表了用于癌症诊断和治疗的单克隆抗体的有吸引力靶标。然而，由于较厚且密集的糖脂以及肿瘤微环境，常规抗体通常遭受限制的访问和体内有效性。为了克服这个问题，许多小型抗体片段已经出现，比全长的效率表现出相似的亲和力，其效率更高。在这里，我们回顾了针对肿瘤细胞上特定聚糖的小抗体片段，并强调了它们比常规抗体的优势。