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合成 CRISPR/Cas9 试剂促进基因组编辑...
CRISPR/Cas9 已成为斑马鱼基因组编辑的有力工具，它允许使用 DNA 模板和同源定向修复 (HDR) 快速产生功能丧失突变和特定等位基因的敲入。我们检查了合成的、化学修饰的 gRNA 的效率，并证明与重组 Cas9 蛋白结合可诱导插入缺失和大型基因组缺失。我们开发了一种体内遗传检测方法来测量 HDR 效率，并利用该检测方法来测试改变模板设计对 HDR 的影响。利用合成的 gRNA 和线性 dsDNA 模板，我们成功地在多个基因组位点进行了荧光团的敲入，并证明了以高效率通过种系传递。我们证明合成的 HDR 模板可用于敲入细菌硝基还原酶 (ntr)，以促进特定细胞类型的谱系消融。总的来说，我们的数据证明了结合合成 gRNA 和 dsDNA 模板在体内进行同源定向修复和基因组编辑的实用性。
隧道运营、维护、检查和评估
2010年8月，联邦高速公路管理局（FHWA）与HDR Engineering，Inc。（HDR）和Gannett Fleming，Inc。（GF）订婚，以开发隧道操作维护检查和评估（Tomie）手册，以使整个美国的公路隧道所有者受益。FHWA目标是提供指导，以促进业主如何运作，维护，检查和评估隧道的统一性和一致性。通常可以理解，美国的许多隧道已有50多年的历史，并且开始显示出恶化的迹象，尤其是由于水渗透。此外，预计讨论的操作，维护，检查和评估实践将有助于隧道所有者识别和纠正缺陷。要实现这些目标，HDR/GF团队的任务是制作Tomie手册，以供高速公路隧道所有者和相关隧道专业人员使用。
通过同源指导的修复介导的基因组编辑校正隐性营养不良表皮溶液
基因组编辑的技术，能够引入DNA序列中的精确变化，有可能导致新的遗传疾病治疗方法。表皮溶解Bullosa（EB）是一组以极端皮肤脆弱性为特征的稀有遗传疾病。具有最严重的表型之一的EB（RDEB）的隐性营养不良亚型，是由Col7a1突变引起的。在这项研究中，我们报告了一种基因编辑方法，用于基于体内同源指导的修复（HDR）基因校正，该方法使用了CRISPR-CAS9系统，该系统使用核糖核蛋白（RNP）复合物与供体与adeno相关的Veral Veral Vec-Vec-vec-tors（AAVS）结合使用。我们证明了在原代rdeb ker-固有细胞中实现含有疗法的舒适突变校正频率，其中包含不同的COL7A1突变以及有效的HDR介导的HDR介导的COL7A1模量，可在健康的索有索有索有线山脉CD34 +细胞和细胞中的细胞中（MSC）。这些结果是HDR介导的基因校正的概念证明，其不同细胞类型具有RDEB的治疗潜力。
研究进度审查和研究候选程序的确认
•候选人所在的教师或学校可以提供有关如何实施政策和程序的具体详细信息。PGC，主管，研究生研究/副院长研究培训主管可以提供具体的建议和指导。•研究生研究学校（GRS）拥有特定于教师的候选人管理人员，他们可以提供有关全大学适用的政策和程序的信息。经理，HDR候选人也可供所有候选人提供建议。GRS的主任或研究生研究的院长可以在经理HDR候选人的转诊后协助候选人。•大学为UNSW学生提供各种支持服务，包括心理学和健康服务，公平学习服务，教育支持顾问和学习中心，他们可以提供支持和技能发展。HDR HUB网站提供了所有这些服务的链接。
2024 年 12 月毕业时间表
科学 数学与物理学院和昆士兰农业与食品创新联盟 (QAAFI) 的所有课程（包括 HDR 学生）。农业与食品可持续性学院的精选课程（包括 HDR 学生）包括教授 BSc、BSc(Hons) 或 BAdvSc(Hons) 课程的非科学学校，不包括生物医学科学 包括心理学领域或专业的 BSc、BSc(Hons)、BAdvSc(Hons)
波形数字化和处理大型实验的前端微电子
•ASOC：对数字转换器的类似物芯片•HDSOC：HDSOC：SIPM专用读数芯片，具有偏见和控制•Aardvarc：快速计时和较低的时间安排和较低死时间的速率读数芯片•AOD•AOD•AOD•AOD：低密度数字化器，具有高动态范围（HDR）选项（HDR）•Strawz：Strawing自动波形数据，
有效生产和应用ssDNA在CRISPR/ ... div>
图4。使用CRISPR/CAS9基因编辑在T细胞中用ACGFP1的内源基因标记。面板a。微管蛋白使用CRISPR/CAS9和长ssDNA作为HDR供体模板在其N末端使用ACGFP1标记。供体模板在插入位点具有350 bp的同源性臂，长度为1.6 kb。面板B.使用安捷伦碎片分析仪系统对ssDNA产物进行分析。起始片段dsDNA（ds）和末端产物ssDNA（SS）的覆盖层具有两个大小标记（mm）。ssDNA产品的纯度高于97％。面板C. HDR介导的敲击蛋白后，所得的T细胞群体的流式细胞仪图显示了ACGFP1阳性细胞的百分比（约2.45％），证明了成功的HDR。Ebioscience可固定的生存能力染料Efluor 660（Thermo Fisher Scientific）用作活力染料。面板D.使用相同的策略来标记Sec61β的N末端，Sec61β的N端是一种定位在内质网中的蛋白质。ACGFP1阳性细胞的百分比（相当于成功的HDR）为2.1％。
Nyberg 等人 BioRxiv
通过同源定向修复 (HDR) 进行基因组编辑使得对基因序列进行精确而慎重的修改成为可能。CRISPR/Cas9 介导的 HDR 是实现这一目标的最简单方法。然而，在提高效率和扩大对果蝇以及其他果蝇物种的任何遗传背景的适用性方面仍然存在技术挑战。为了解决这些问题，我们开发了一种两阶段标记辅助策略，以促进果蝇的精确、无疤痕编辑，而几乎不需要分子筛选。使用与重组 Cas9 蛋白复合的 sgRNA，我们分析了每个 sgRNA 的基因组切割效率。然后，我们使用有效切割目标基因的 sgRNA 和转化标记的新应用进行 HDR。这些新工具可用于在感兴趣的区域进行单个更改或一系列等位基因替换，或创建其他遗传工具，例如平衡染色体。
封面论文 1 页 Faïda MHENNI -Theses.fr
Alain RIVIERE 先生 苏梅卡大学教授 – LISMMA，圣旺 Hubert KADIMA 先生 教师兼研究员，HDR EISTI – L@RIS，塞尔吉-蓬图瓦兹 Hamid DEMMOU 先生 大学教授 图卢兹大学 – LAAS，图卢兹 M . Omar HAMMAMI 教授，HDR ENSTA ParisTech U2IS，Palaiseau M. Stanislao PATALANO 讲师，HDR 那不勒斯费德里科二世大学 - 那不勒斯 Antoine RAUZY 先生 教授，Blériot-Fabre 主席中心主任，Châtenay-Malabry Nga NGUYEN 女士 教师兼研究员 EISTI – L@RIS，塞尔吉-蓬图瓦兹 Jean 先生 - Yves CHOLEY 讲师 Supmeca – LISMMA，Saint-Ouen M. Wassim ABIDA 技术经理、博士、UTC AEROSPACE SYSTEMS 工程师，Buc