本标准是 EN 1993-3-1:2006 《欧洲规范 3:钢结构设计 - 第 3-1 部分:塔架、桅杆和烟囱 - 塔架和桅杆》3-1 的相同翻译。烟囱和桅杆)经过技术修正 EN 1993-3-1:2006/AS:2009。 EN 1993-3-1:2006 由技术委员会 CEN/TC 250 制定,其秘书处由 BSI 管理。国家标准附有英文文本。在乌克兰境内,文本 DSTU-NB EN 1993-3-1:2012“欧洲规范 3。钢结构设计。第 3-1 部分。塔、桅杆和烟囱。塔和桅杆(EN 1993- 3 -1:2006, IDT)”,以乌克兰语呈现。根据DBN A.1.1-1-2009《建筑标准化和规范体系。主要规定》,本标准引用了复杂的B.1.2《建筑可靠性和安全体系》。该标准包含符合现行立法的要求。负责本标准的科学技术机构是“以V.M.希曼诺夫斯基命名的乌克兰钢结构研究所”。本标准进行了下列编辑性修改: ——“本国际标准”一词改为“本标准”; - 标准的结构要素 - “封面”、“前言”、“国家简介”、“定义”和“书目数据” - 根据乌克兰国家标准化的要求设计; - 取自本《国家介绍》中的《1993-3-1序言》中直接涉及的内容
•人员必须有资格获得ftngdcd iaw arng或ang要求。•人员必须收到其单位代表或指挥官的书面建议。(在第2页,共10-8个应用程序中。)•ARNG人员必须符合AR 40-501中规定的医疗保留标准,第3章和第10章。•ANG人员必须符合AFI 48-123第3章和附件2、9和19中规定的医疗保留标准。•入职时需要进行尿液分析测试,并且人员在现役期间进行定期测试。这些要求是在JNGSAP下的IDT/IAD期间通过分配单位进行测试的补充。•要求继续参加IDT/IAD以及在FTNGDCD上继续出席。•将进行犯罪记录检查的可能性和/或安全筛选。申请人将被告知,此类查询可能会在入职后完成,并且收到的负或不利信息可能导致他们从CD计划中删除。•行为标准:•参与CournerClug支持计划的国民警卫队成员必须遵守州法律,DOD 5500.7-R和CNGBM 3100.01。他们必须维护最高的行为标准和个人外观。•外部就业,协会和下班行为/活动必须与联邦道德以及州和联邦利益冲突政策一致。外部就业需要书面批准CDC。
图 1 布氏锥虫 PCF 中的 GFP 失活。(a)对组成性表达胞浆 eGFP 的布氏锥虫进行荧光流式细胞术分析。在用 20 μ g(无 Cas9、Cas9/gRNA GFP1、Cas9/gRNA GFP2、Cas9/gRNA GFP3)或 60 μ g(Cas9/gRNA GFP2)来自 IDT 的 RNP 复合物转染后 24 至 72 小时随时间监测 GFP 荧光,条形图显示用不同向导转染后 72 小时 GFP 阴性细胞的百分比(n = 3)。采用 Prism 软件进行统计分析,采用 t 检验(非配对、正态分布、参数检验和双尾)。显着性水平(p 值)用星号表示。 (b)上图显示了允许 e Sp Cas9 在大肠杆菌中表达的质粒的示意图。蓝色框表示蛋白质 N 端和 C 端的两个多组氨酸序列,红色框表示 TEV 和肠激酶 (EK) 蛋白酶的切割位点,灰色框表示三个核定位信号 (NLS),黑色框表示 FLAG 表位的三个重复,橙色框表示 e Sp Cas9 编码序列。下图显示了在用来自 IDT 或实验室纯化 (Lab) 的 RNPs 复合物 (无 Cas9、20 μ g Cas9/gRNA GFP2、40 μ g Cas9/gRNA GFP2、40、60 和 80 μ g Cas9/gRNA GFP2) 转染后 72 小时监测的表达 GFP 的 T. brucei 的荧光流式细胞术分析。(c)不再表达 GFP 的克隆中 GFP 基因的一部分的序列比较。该序列仅显示 GFP2 向导 RNA 所针对的区域。灰色框(H1 和 H2)突出显示可能用于 MMEJ 修复的同源区域。由实验室纯化的 Cas9 失活产生的序列和来自商业 Cas9 的序列分别标记为 Lab 和 IDT。下面显示了 Dc6 和 Ba10 克隆的相应色谱图(置信区间 95%— p 值样式:0.1234 (ns);0.0332 (*);0.0021 (**);0.0002 (***);< 0.0001 (****))。
AMCARE授权不需要社区IDT潜在客户 /实践主管所需的高级临床监督 /授权,请确保您的领先优势已授权使用专业敷料 /产品,并将此表格安全提交此表格。含银的伤口敷料:urgoclean ag aquacel akag Qurgotul银色专业伤口敷料:弗拉米纳尔热素火药flaminal forte octenilin solution ucs ucs debrisoft debrisoft mepilex mepilex mepilex mepilex mepilex borderx borderx borderx bordememehield urgoclean urgoclean urgostart和proshield urgostart and proshield sprays and cream viscopaste
此方案是使用已停产的 Cas9 蛋白版本 (Alt-R Sp Cas9 Nuclease 3NLS) 开发的。目前可用的产品 (Alt-R Cas9 Nuclease V3) 具有改进的 NLS,应以相同的体积和浓度直接替换到此方案中。IDT 建议使用 Alt-R™ Sp Cas9 Nuclease V3 与 Alt-R CRISPR-Cas9 crRNA 和 tracrRNA 结合使用,以生成核糖核蛋白编辑复合物,从而在大多数目标位点上实现高编辑效率。查看 Alt-R CRISPR-Cas9 用户指南,了解如何将核糖核蛋白转染哺乳动物细胞系(可在 www.idtdna.com/CRISPR 上找到)。
A3A 和 eA3A 表达。A3A 表达构建体 (Addgene #109231) 之前已有描述,可用于纯化 A3A 作为融合蛋白 (MBP-A3A-His),可进一步加工以生成分离的 A3A 结构域。32,33 对于 eA3A (A3A-N57G),N57G 突变是通过 Q5 定点诱变 (New England Biolabs, NEB) 引入的。A3A 和 eA3A 构建体的细菌表达之前已有详细描述。 33 将纯化的 MBP-A3A-His、MBP-eA3A-His 或分离的 A3A 在 50 mM Tris-Cl(pH 7.5)、50 mM NaCl、10% 甘油、0.5 mM DTT 和 0.01% Tween-20 中透析过夜,并使用 BSA 标准曲线确定蛋白质浓度。基于 SwaI 的脱氨酶对 ssDNA 和嵌合底物的活性。5'-荧光素 (FAM) 荧光标记的底物 S35-dC 或具有单个靶核糖胞嘧啶的匹配底物(在其他 DNA 骨架中)(S35-rC)由 Integrated DNA Technologies (IDT) 合成,以及相关产品对照(S35-dU 和 S35-rU)。在最佳 A3A 反应条件(最终为 20 mM 琥珀酸:NaH 2 PO 4:甘氨酸 (SPG) 缓冲液 pH 5.5,0.1% Tween-20)下,用 6 倍稀释的未标记 A3A(从 1 µM 到 4 pM)处理 100 µM 寡核苷酸。反应在 37 ˚C 下进行 30 分钟,然后终止(95 ˚C,10 分钟)。然后加入 200 nM 互补链并退火。加入 SwaI (NEB),在室温下消化过夜。加入甲酰胺上样缓冲液,样品加热变性(95 ˚C,20 分钟),然后在 50 ˚C 下在 20% 变性 TBE/尿素聚丙烯酰胺凝胶上运行。使用 Typhoon 成像仪(GE Healthcare)上的 FAM 滤光片对凝胶进行成像。使用 ImageJ 中的面积量化工具进行定量分析。720 碱基对 ssDNA 底物的合成。为了生成 ssDNA,使用 720 bp gBlock 基因片段 (IDT) 作为模板 (补充图 2a),并使用 Taq 聚合酶 (NEB) 进行扩增,采用指数后线性 (LATE) PCR 反应方案,该方案采用相对于磷酸化的反向引物过量的正向引物。32 对反应物进行纯化 (NucleoSpin、Fisher),然后在 37 ˚C 下用 核酸外切酶处理 1 小时以降解磷酸化链,然后进行热失活 (90 ˚C,10 分钟)。然后将产物在 2% 琼脂糖凝胶上运行,并使用凝胶 DNA 回收试剂盒 (Zymoclean) 回收 ssDNA。通过乙醇沉淀进一步纯化 ssDNA,并使用 Qubit ® 荧光计 (ThermoFisher) 测量其浓度。对于一个重复,ssDNA 以大分子寡核苷酸 (IDT) 的形式获得,并通过乙醇沉淀进一步纯化。720 聚体 RNA 底物的合成。使用 720 bp 基因块 (IDT) dsDNA 作为模板,在推荐条件下使用 TranscriptAid Enzyme Mix (ThermoFisher) 通过体外转录生成 RNA,并在 37 ˚C 下孵育两小时。然后通过苯酚-氯仿提取和乙醇沉淀纯化 RNA。将样品重新悬浮在无核酸酶的水中,并进一步用 MspI、XbaI 和 AclI 限制性酶 (NEB) 处理以消化任何剩余的 DNA 模板。在 37 ˚C 下孵育 1 小时后,使用 RNA Clean and Concentrator-5 试剂盒 (Zymo Research) 纯化 RNA。为了进一步确保完全去除模板 DNA,在 37 ˚C 下用 DNase I (Ambion) 处理 RNA 30 分钟。重复纯化 (RNA Clean and Concentrator-5),并使用 Qubit ® 荧光计测量纯化 RNA 的浓度。通过“预测二级结构网络”预测 720 聚体中几个中尺度区域的二级结构
___________:我理解,我可能无法获得在现役或非现役状态下完成的函授课程的退休积分,这些课程可获得退休积分,例如非现役训练 (IDT)、非现役训练旅行 (IDTT)、非现役、额外训练期 (ATP)、额外飞行和飞行训练期 (AFTP)、战备管理期 (RMP)、年度训练 (AT)、现役训练 (ADT)、现役特殊工作 (ADSW)、明确召回或动员。完成函授课程的非薪资退休积分应按每 4 小时教学 1 分的比率记入。教学时间少于 4 小时的课程不符合退休积分的资格。
IR 战略办公室 (ISO) 的目标是改善所有 IMA 的实战体验。ISO 制定了以下示例四年计划,以保持 CAT 1 IMA 的 RAT 时效性。每个类别都有许多培训选项。下表展示了一个场景,其中 IMA 每年第一季度花费一个 IDT 进行 CBT,参加 IR 通话和指挥官通话,并在四年周期内参加三次实践培训。CBT 位于 Ready Airman Training 模块中的 My Learning 中。此示例计划和其他 Ready Airman Training 信息可在 AFFORGEN Connect 网站上找到,可通过 AF 门户访问。