摘要虽然对基因-增强子相互作用的调控进行了深入研究,但其应用仍然有限。在这里,我们重建了 CTCF 结合位点阵列,并设计了一种带有 tetO 的合成拓扑绝缘体用于染色质工程 (STITCH)。通过将 STITCH 与连接到 KRAB 结构域的 tetR 偶联以诱导异染色质并禁用绝缘,我们开发了一种药物诱导系统来控制增强子对基因的激活。在人类诱导多能干细胞中,插入 MYC 和增强子之间的 STITCH 下调了 MYC。STITCH 的进行性诱变导致基因-增强子相互作用的优先升级,证实了 STITCH 的强大绝缘能力。STITCH 还改变了 MYC 周围的表观遗传状态。通过药物诱导的时间过程分析发现,H3K27me3 抑制标记的沉积和去除跟随并反映表达变化,但不先于表达变化并决定表达变化。最后,插入 NEUROG2 附近的 STITCH 会削弱分化神经祖细胞中的基因激活。因此,STITCH 应该可以广泛应用于功能遗传学研究。
“ Breakthrough”是大多数医生,研究人员和受人尊敬的记者都避免了一个词。但是,来自格拉斯哥的约翰·保罗教授最近使用它来描述在对药物研究协会讲话时的基因工程。他可能是对的。遗传操作主要仅在过去十年中开发,是将细胞的遗传物质的过程:从一个细胞的一个例子中更改基因(DNA的序列),将人类细胞包插入另一个细胞,通常是细菌,并且可以发挥作用。已经使用这些技术人类胰岛素,生长激素和干扰素是由细菌细胞产生的。已经获得了洞察力,其中已经获得了基本细胞功能,肿瘤病毒的行为以及某些遗传疾病的机制。这些新想法影响了各种生物学工作。他们的影响很快就会到达全科医生,他们应该能够开出细菌制造的人类胰岛素。尽管这些技术非常复杂,但基因工程的原理足够简单,可以理解任何医生。有三个问题要提出:首先,准备适当的基因;其次,将它们插入“影响”的生物体中,以便它们在生物体中复制;第三,为了确保插入的基因表达 - 那就是影响生物实际上会产生编码的蛋白质。段,该酶是自然存在的酶,这些酶在定义的点上裂解DNA链。替代地,可以合成小基因:可以在实验室中组合核酸,目前可以合并到最高约100个组成碱的长度,或者可以从Messen-Gerger RNA的模板中合成少量DNA,从而通过反向转录酶产生的Messengerger RNA的模板(可以通过某些tumor ver verse dna vere vera)来制作dna。使用质粒和噬菌体将段插入有效的有机体中 - 通常是大肠杆菌。质粒是细菌中发现的小包DNA,可以从一种细菌传递到另一种细菌。他们以医生的能力转移抗生素耐药性而闻名。通过使用适当的酶,可以将外源DNA的切片插入质粒中包含的DNA中。质粒进入细菌细胞,同时存在
•在GABI模型中插入了进口途径(挪威生产并在CE中生产的天然气的CF)以显示,差异是通过不同的模型给出的。差异<5%,这是由于电力混合物的不同数据和一些默认值所致(例如气体CHP的排放系数)
说明您(或您的公司)将如何从边境交叉路口往返于您预定的工作场所和/或住宿。例如,您不上班时会睡在卡车舱中吗?您将在哪里入睡/休息?可以在此处插入多个条目以涵盖多个状态/地区。
图2:转座酶介导的剪切机制的示意图。(1)转座酶识别并结合了转座子两侧的TIRS,(2)换位复合物,(3)切除换位复合物,(4)转座复合物识别基因组中的靶位点,(5)转座子插入基因组中。图像改编自Skipper,K.A。等,2013 2。
基因组编辑需要将DNA序列插入特定位置。涉及定期间隔短的短文重复序列(CRISPRS)和CRISPR相关(CAS)蛋白质的方案依赖于同源性维修,需要费力的矢量构造,并且效率低。DNA寡核苷酸可以通过非同源末端连接用作靶向插入的供体。我们的简单协议通过使用聚乙烯乙二醇将非修饰的单链DNA DNA寡核苷酸和CRISPR-CAS9核糖核蛋白输送到原生质体中,从而消除了对昂贵的设备和矢量结构的需求。,我们在烟草本尼亚娜纳(Nicotiana Benthamiana)中实现了高达50.0%的靶向插入频率,而无需抗生素选择即可快速循环胸腺橄榄石。使用每个同源臂中包含27 nt的60 nt供体,22个再生植物中有6个显示出靶向插入,其中1个包含6 bp Eco RI位点的精确插入。全基因组测序表明,DNA仅插入靶向位置,遗传分析表明,插入到下一代的插入序列。
摘要:最近,提出了某种全息 Weyl 变换 CFT 2 来捕捉 AdS 3 /BCFT 2 对应关系的主要特征 [ 1 , 2 ]。在本文中,通过调整 Weyl 变换,我们模拟了一个广义的 AdS/BCFT 设置,其中考虑了 Karch-Randall (KR) 膜的涨落。在 Weyl 变换 CFT 的重力对偶中,由 Weyl 变换引起的所谓截止膜起着与 KR 膜相同的作用。与非涨落配置不同,在 2 d 有效理论中,额外的扭曲算子插入的位置与插入膜上的位置不同。虽然这在 Weyl 变换的 CFT 设置中是众所周知的,但在 AdS/BCFT 设置中,有效理论应该位于膜上的哪个位置却令人困惑。这种混淆表明 KR 膜可能是通过 Weyl 变换从边界 CFT 2 中出现的。我们还计算了波动膜结构中的平衡部分纠缠 (BPE),发现它与纠缠楔截面 (EWCS) 一致。这是对 BPE 和 EWCS 之间对应关系的非平凡测试,也是对 Weyl 变换 CFT 设置的非平凡一致性检查。
如果在封闭的环境中定位,请确保该区域通风并允许定期再循环空气。如果安装在开放环境中,请将外壳放置在不断遮蔽并保护不受直射阳光的区域中。这些措施对于防止不必要和过度过热的措施很重要,这会延长时间延长内部插入的零件的持续时间和操作。