NCBI数据库2中的1个登录号[KDA] 3 EMPAI值表达基于质谱的蛋白质丰度定量,并根据http://wwwww.matrixscience.com/help/quant_empai_empai_help.html计算。
CRISPR-Cas9、-Cas12a、-Cas12b 和 -Cas13 已被用于人类和植物细胞的基因组工程(Liu et al., 2022)。然而,这些 Cas 蛋白的尺寸较大(例如 SpCas9 为 190 kDa),难以通过病毒载体递送到细胞中。开发更小的 Cas 蛋白将导致病毒载体尺寸减小,从而可以在多功能基因组工程系统中更广泛地采用。最近,在巨型噬菌体中发现了 CRISPR-Cas12j2 (Cas F) 系统,由于 Cas12j2 的尺寸较小(80 kDa),该系统发展成为超紧凑基因组编辑器(Pausch et al., 2020)。不幸的是,使用核糖核蛋白传递的拟南芥原生质体中 Cas12j2 的基因编辑效率不到百分之一(Pausch 等人,2020 年)。如果植物科学界要采用 CRISPR-Cas12j2 介导的植物基因组编辑,显然需要进一步优化该系统。
1。引言转录是将DNA段复制到真核生物中的RNA中的多步过程,直接在形成一个称为预发起络合物(PIC)的重要中间体(Engel等,2018)之前。PIC的组装需要募集RNA聚合酶II(RNAP II),介体复合物和六个通用转录因子(GTFS:TFIIA,TFIIB,TFIIB,TFIID,TFIII,TFIIE,TFIIF和TFIIH)这些因素中的许多因素已经在原核生物和真核生物中进行了很好的研究和表征(Matsui等,1980)。在GTFS中,GTF2E虽然不如其他特征,但对于转录函数非常重要。GTF2E由两个亚基GTF2E1和GTF2E2组成。GTF2E1是较大的亚基,分子量为56 kDa,而GTF2E2较小,分子质量为34 kDa(Peterson等,1991)。gtf2e1对于转录启动至关重要,gtf2e2的活性完全取决于
通缉! 名称 α-突触核蛋白,别名:NACP、PARK1/PARK4 地址 染色体 4q22.1 身高/体重 140 个氨基酸,14 kDa 蛋白质 外观 单体,四聚体 α -螺旋寡聚体,与生物膜相关 犯罪聚集体可导致帕金森氏症
7-氨基-3-氯甲基-3-头孢烯-4-羧酸对甲氧基苄酯盐酸盐 (ACLE) 购自 AK Scientific (加利福尼亚州联合城)。4-硝基苯硫酚 (NBT) 和 3-马来酰亚胺基丙酸购自 TCI Chemicals (日本东京)。头孢噻吩购自 P212121, LLC (马萨诸塞州波士顿)。氘代二甲基亚砜 (DMSO-d 6 ) 购自 Cambridge Isotope Laboratories (马萨诸塞州安多弗)。三乙胺 (TEA)、4-甲基吗啉 (NMM)、无水二氯甲烷 (DCM)、无水二甲基甲酰胺 (DMF)、己烷、乙醚、乙酸乙酯、薄层色谱法 (TLC) 硅胶 60 玻璃板、无水磷酸氢二钠、无水磷酸二氢钠、CENTA、二甲基亚砜 (DMSO)、三氟乙酸 (TFA)、苯甲醚、硫醇官能化的 4 臂聚乙二醇 (4 臂-PEG-SH; 20 kDa)、来自蜡样芽孢杆菌的 β L (β L-BC; cat.# P0389, 28 kDa, 2817.8 U/mg 蛋白, 4.72% 蛋白)、来自铜绿假单胞菌的 β L (β L-PA; cat.# L6170, 30 kDa, 1080 U/mg 蛋白,1% 蛋白)、来自阴沟肠杆菌的 β L(β L-EC;目录号 P4524,20-26 kDa,0.37 U/mg 蛋白,56.45% 蛋白)、来自溶组织梭菌的胶原酶、磷酸盐缓冲盐水 (PBS)、硝酸钠、阳离子调整的 M¨uller-Hinton 肉汤 (CMHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸、1-[双 (二甲氨基) 亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶 3-氧化物六氟磷酸盐 (HATU)、N,N-二异丙基乙胺 (DIPEA) 和盐酸 (HCl) 均购自 Millipore Sigma(密苏里州圣路易斯)。甲醇、硅胶、胰蛋白酶大豆肉汤 (TSB) 和 SYLGARD 184 硅胶弹性体试剂盒购自 Thermo Fisher Scientific (马萨诸塞州沃尔瑟姆)。甲氧基聚乙二醇硫醇 (mPEG-硫醇;1.7 kDa) 购自 Laysan Bio, Inc. (阿拉巴马州阿拉伯)。金黄色葡萄球菌菌株 25923 和 29213、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) MW2、蜡样芽孢杆菌 13061、大肠杆菌 25922 和阴沟肠杆菌 13047 购自 ATCC (弗吉尼亚州马纳萨斯)。铜绿假单胞菌 PA01 由沃尔特里德陆军研究所 (马里兰州银泉) 慷慨捐赠。大肠杆菌 DH5-α 购自 Life Technologies (加利福尼亚州卡尔斯巴德)。双马来酰亚胺-PEG 3(mal-PEG-mal,494.5 Da)购自 BroadPharm(加利福尼亚州圣地亚哥)。Repligen Biotech 纤维素酯 500-1000 Da 分子量截留 (MWCO) 透析管购自 Spectrum Labs Inc.(加利福尼亚州兰乔多明格斯)。超高纯度氮气(99.999%)购自 Airgas(罗德岛州沃里克)。所有实验均采用超纯去离子水(18.2 MΩ·cm,Millipore Sigma,马萨诸塞州比勒里卡)。本研究中提到的室温 (RT) 约为 23 ◦ C。
在 250 ng PURExpress® 对照 DHFR 质粒和 20 单位 RNase 抑制剂(含有 PURExpress® Δ 核糖体试剂盒的成分)存在下进行 25 µl 反应,在 37°C 下孵育 2 小时,通过 SDS-PAGE 和考马斯亮蓝检测测定,可得到预期的 20 kDa 产物。
在 250 ng PURExpress® 对照 DHFR 质粒和 20 单位 RNase 抑制剂(包含 PURExpress® 体外蛋白质合成试剂盒的成分)存在下进行 25 µl 反应,在 37°C 下孵育 2 小时,通过 SDS-PAGE 和考马斯亮蓝检测确定可得到预期的 20 kDa 产物。
在 250 ng vTPA(截短组织型纤溶酶原激活剂)模板质粒 DNA、1 µl 增强剂 1、1 µl 增强剂 2 和 20 单位 RNase 抑制剂(含有 PURExpress® 体外蛋白质合成试剂盒的成分)存在下进行 25 µl 反应,在 37°C 下孵育 2 小时,通过 SDS-PAGE 和考马斯亮蓝检测测定,可得到预期的 40 kDa 产物。
摘要:对甲烷的氢和二氧化碳发酵,称为生物甲烷,是提供可再生和易于储存能量的一种有希望的方法。生物 - 甲基化的主要挑战是氢气的低气流转移。通过多孔膜注射气体可用于获得微泡和高气流转移。然而,仍然缺少使用发酵汤中膜形成气泡形成的理解。这项研究的重点是液压和流量速率在膜中的影响,气体流量,膜疏水性,表面和孔径对在实际发酵条件下通过多孔膜注入气体的气体对氢的总体气体至液体传输系数(K L A)。已经表明,K l a增加了13%,液压从0.5 bar增加到1.5 bar。与疏水膜相比,亲水膜的使用增加了17%。孔尺寸为0.1 µm的膜产生的k l a值较高,而50 kDa和300 kDa。液体交叉速度在研究范围内不会影响K L A。