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一拳怎能将你击倒？
人类手部的比例与其他灵长类动物不同，后者的手指往往较长。造成这种情况的最可能原因是进化压力，即提高手动灵活性，以便更好地使用工具。然而，人类手的形状也使其能够握成拳头，用来发出有力的拳头。这在史前时期可能非常常见，有人认为，强行支配他人的能力也促进了人类手部的进化 ( 1 )。尽管最早的拳击可能是为了解决暴力冲突，但在早期的历史记录中也提到了有组织的比赛，例如荷马的《伊利亚特》。这里描述了泰伦如何组织一场打斗，其中埃佩乌斯用他粗壮的拳头将欧律阿洛斯打倒在地，并赢得了一头强壮的 6 岁骡子作为第一名的奖励。这种古老的拳击被称为皮格马奇亚（pygmachia），古代奥运会上也有这种拳击。这一传统在罗马帝国延续下来，并在几个世纪中逐渐改变，最终演变成现代拳击。虽然仅用拳头进行格斗的传统似乎仅限于中东和欧洲，但世界各地有许多将拳头与踢腿和投掷相结合的武术。这些做法现在已经结合成一个大规模的娱乐产业，尽管头部被击中的已知症状包括永久性脑损伤和死亡。
使用药物盒在体内淘汰基因
“基因敲除”或“敲除”是一种使基因功能失活的突变。这些突变对于经典的遗传研究以及包括功能基因组学在内的现代技术非常有用。过去，细菌基因的敲除通常是通过转座子诱变做出的。在这种情况下，需要费力的屏幕才能找到感兴趣的基因的淘汰赛。传统上，首先使用体外基因工程来修改质粒或细菌性人工染色体（BAC）的基因，然后将这些修饰的构建体移至细胞培养技术感兴趣的生物。利用基因工程和体内同源重组的组合的其他方法充其量效率低下。重新组合提供了一种直接在细菌染色体上产生基因敲除突变的新方法，或者将体内任何质粒或BAC修改为在其他生物体中敲除的前奏。构造设计为基础对，
CLDN1 敲除角质形成细胞作为研究多种皮肤病的模型
图 2 CLDN1 敲除会降低 N/TERT-2G 单层细胞和器官型细胞浸没培养物中的屏障完整性。浸没单层细胞培养物在高 Ca 2 + 培养基中分化。通过 (A) 分化后 5 天内每天的跨上皮电阻 (TEER) 或 (B) 分化后 1、2 和 3 天的通透性测定来量化屏障功能。WT、pCLDN1 KO 和 A8 克隆细胞用于开发器官型培养物，并且 (C) 在提升到气液界面 10 天后测量电阻抗。-gRNA、pCLDN1 KO n = 4 个实验（A、B）。B6、A8、H1 克隆 n = 3 个实验和 D5 克隆 n = 1 个实验（A、B）。n = 3-9 个来自三个实验的总构建体，不同的符号代表各个实验（C）。通过配对 t 检验 (A、B) 或 ANOVA (A、B、C) 评估与相关 WT 对照的统计差异。数据以平均值 ± SEM 表示。 * p < 0.05，** p < 0.01。
使用 TMS320C25 或 TMS320C30 DSPS 进行频谱分析以检测发动机爆震
简介 1 ．。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。...... div>...........什么是发动机爆震？ div>1 .....。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。....爆震传感器 1 .。。。。。。。。 < /div>...........。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。...直接测量 1 ...................。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。.........远程测量 1 .............。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。................爆震检测概述 2 .........。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。.......................光谱特征 2 ....。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。适配要求 2.。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。信号调理 2 .。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。检测策略 3.。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。控制策略 4.。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
在主要非洲疟疾媒介阵线菌群中发现敲低抗性
资金：这项研究得到了从Bill＆Melinda Gates Foundation获得的资金（授予号Inv-002138）致F.O.O.，F.B.，H.M.F。 霍华德·休斯医学研究所基金会国际研究学者奖（授予号） OPP 1099295）至F.O.O.和医学科学学院Springboard奖（参考：SBF007 \ 100094）至F.B. 本出版物中的发现和结论是作者的发现和结论，不一定反映了HHMI，BMGF或AMS的立场或政策。 疟疾载体天文台得到多个机构和资助者的支持。 Wellcome的参与得到了Wellcome的资金（220540/Z/20/A，“ Wellcome Sanger Institute Quinquennial Review 2021-2026”）和Bill＆Melinda Gates Foundation（Inv-001927）的支持。 利物浦热带医学学院的参与得到了美国国家过敏和传染病研究所（[NIAID] R01-AI116811）的支持，并得到了医学研究委员会的额外支持（MR/P02520X/1）。 后者的赠款是英国资助的奖项，是欧盟支持的EDCTP2计划的一部分。 马丁·唐纳利（Martin Donnelly）得到皇家学会（RSWF \ ft \ 180003）的支持。 泛非蚊子控制协会的参与是由Bill and Melinda Gates Foundation（Inv-031595）资助的。Inv-002138）致F.O.O.，F.B.，H.M.F。霍华德·休斯医学研究所基金会国际研究学者奖（授予号OPP 1099295）至F.O.O.和医学科学学院Springboard奖（参考：SBF007 \ 100094）至F.B.本出版物中的发现和结论是作者的发现和结论，不一定反映了HHMI，BMGF或AMS的立场或政策。疟疾载体天文台得到多个机构和资助者的支持。Wellcome的参与得到了Wellcome的资金（220540/Z/20/A，“ Wellcome Sanger Institute Quinquennial Review 2021-2026”）和Bill＆Melinda Gates Foundation（Inv-001927）的支持。利物浦热带医学学院的参与得到了美国国家过敏和传染病研究所（[NIAID] R01-AI116811）的支持，并得到了医学研究委员会的额外支持（MR/P02520X/1）。后者的赠款是英国资助的奖项，是欧盟支持的EDCTP2计划的一部分。马丁·唐纳利（Martin Donnelly）得到皇家学会（RSWF \ ft \ 180003）的支持。泛非蚊子控制协会的参与是由Bill and Melinda Gates Foundation（Inv-031595）资助的。
使用CRISPR/CAS9系统在DMD基因中淘汰外显子48
抽象背景：DMD基因中的框架突变导致Duchenne肌肉营养不良（DMD），这是一种神经肌肉进行性遗传疾病。在DMD患者中，缺乏肌营养不良蛋白会导致进行性肌肉变性，从而导致心脏和呼吸道衰竭导致过早死亡。目前，尚无对DMD的某些治疗方法。dmd基因是2.2巨型碱基对的人类基因组中最大的基因，并包含79个外显子。在过去的几年中，基因疗法被认为是一种有希望的DMD治疗，在各种基因编辑技术中，CRISPR/CAS9系统被证明更加精确和可靠。这项研究的目的是评估使用一对SGRNA敲除外显子48的可能性。方法：一对指导RNA（GRNA）设计用于切割DMD基因，并诱导外显子48的缺失。将GRNA转接为HEK-293细胞系，然后通过PCR分析基因组DNA中的DELENEC，然后通过PCR和随后的Sanger测序分析。结果：外显子48被成功删除，因此外显子47连接到外显子49。结论：此结果表明CRISPR/CAS9系统可用于精确编辑DMD基因。关键字：CRISPR/CAS9，肌营养不良，基因编辑，肌肉营养不良简介
CRISPR/CAS9介导的基因组敲除酪氨酸羟化酶和板球bimaculatus中的黄色基因
gryllus bimaculatus是一种生物学领域的新兴模型生物，例如行为，神经病学，生理学和遗传学。最近，反向遗传学的应用为理解具有特定生理反应的基因调查网络的功能基因组学和操纵基因调节网络提供了机会。bimaculatus。在g中使用CRISPR/ CAS9系统。bimaculatus，我们提出了与昆虫黑色素和儿茶酚胺生物合成途径有关的酪氨酸羟化酶（Th）和黄色Y的有效敲低。作为一种酶，将酪氨酸转化为3,4-二羟基苯基甲基甲基甲烷，限制了途径中的第一步反应。黄色蛋白质（Dopachrome Convertion酶，DCE）也参与黑色素生物合成途径。色素沉着中黑色素生物发生的调节系统和分子机制及其在G中的物理功能。bimaculatus尚未因缺乏体内模型而被很好地定义。在F 0个个体和可遗传的F 1后代都检测到核苷酸的缺失和核苷酸核苷酸的插入。我们确认通过定量的实时PCR分析在突变体中下调了Th和Yel-Y-Y。与对照组相比，Th和黄色基因的突变导致色素沉着缺陷。大多数F 0若虫具有第一个幼体的基因突变，而唯一的成年人在机翼和腿部有很明显的缺陷。但是，我们无法获得第一个龄的所有F 2死亡的TH突变体的任何纯合子。bimaculatus。因此，基因对于G的生长和发展非常重要。当将黄色基因拆除时，g时为71.43％。bimaculatus是浅棕色，腹部有轻微的镶嵌物。黄色基因可以通过杂交实验稳定地遗传，没有明显的表型，除了较轻的表皮颜色。目前的功能研究表明，Th和黄色在色素沉着中的基本作用，TH具有多巴胺合成在G中胚胎发育中的深远而广泛的作用。bimaculatus。
使用 DNA 和蛋白质格式优化转染方法，以实现 Beta-TC-6 细胞中 CRISPR Cas9 介导的基因敲除。
参考文献 • (1) Nessa A、Rahman SA、Hussain K。高胰岛素性低血糖症 - 分子机制。内分泌学前沿。2016；7：29。doi:10.3389/fendo.2016.00029。 (2) Ran FA、Hsu PD、Wright J、Agarwala V、Scott DA、Zhang F。使用 CRISPR-Cas9 系统进行基因组工程。自然协议。2013；8(11):2281-2308。doi:10.1038/nprot.2013.143。 (3) Guo D、Liu H、Ruzi A 等人。使用 CRISPR/Cas9 产生的 ABCC8 缺陷型人类胚胎干细胞模拟先天性高胰岛素症。科学报告。 2017；7：3156。doi:10.1038/s41598-017-03349-w。（4）Nessa A、Rahman SA、Hussain K。先天性高胰岛素血症的分子机制和潜在治疗靶点。孤儿药专家意见。2015；3：8。doi.org/10.1517/21678707.2015.1064819。（5）AP Chandrasekaran、M. Song、KS Kim、S. Ramakrishna。将 CRISPR/Cas9 递送到细胞中的不同方法。Prog Mol Biol Transl Sci，159（2018），第 157-176 页。
使用 RNAi 在中国仓鼠卵巢细胞中同时敲入/敲除 Caspase 8 相关蛋白 2 基因的时间和成本有效的基因组编辑方案
背景：CHO 细胞是生产生物制药的首选，而基因组编辑技术为提高重组蛋白产量提供了机会。靶向凋亡相关基因，如 Caspases 8 相关蛋白 2 (CASP8AP2)，可提高 CHO 细胞的活力和生产力。将强大的策略与 CRISPR-Cas9 系统相结合使其能够应用于 CHO 细胞工程。目标：本研究旨在开发一种经济有效的方案，使用 CRISPR-Cas9 系统结合 HITI 策略同时在 CHO 细胞中缺失/插入 CASP8AP2 基因，并评估其对细胞活力和蛋白质表达的影响。材料和方法：我们通过将 CRISPR/Cas9 与 HITI 策略相结合，开发了一种有效的 CHO 细胞工程方案。使用 CHOPCHOP 软件设计了两个不同的 sgRNA 序列以靶向 CASP8AP2 基因的 3' UTR 区域。使用经济高效的 PEI 试剂将 gRNA 克隆到 PX459 和 PX460-1 载体中，并转染到 CHO 细胞中。采用手动选择系统简化单细胞克隆过程。MTT 测定评估 24、48 和 72 小时的基因沉默和细胞活力。流式细胞术评估 CASP8AP2 沉默的 CHO 细胞中的蛋白质表达。结果：研究证实了将 CRISPR-Cas9 与 HITI 策略相结合的稳健性，在产生敲除克隆方面实现了 60% 的高效率。PEI 转染成功地将构建体传递给近 65% 的克隆，其中大多数是纯合的。该方案被证明适用于资源有限的实验室，只需要倒置荧光显微镜。 CASP8AP2 敲除 (CHO-KO) 细胞经 NaBu 处理后，与 CHO-K1 细胞相比，其细胞存活率显著延长，48 小时时的 IC50 值分别为 7.28 mM 和 14.25 mM（P 值：24 小时 ≤ 0.0001，48 小时 ≤ 0.0001，P 值：72 小时 = 0.0007）。与天然细胞相比，CHO CASP8AP2 沉默细胞的 JRed 表达增加了 1.3 倍。结论：使用 CRISPR-Cas9 和 HITI 策略有效改造 CHO 细胞，同时进行 CASP8AP2 基因缺失/插入，从而提高细胞存活率和蛋白质表达。