摘要。最近,科学家和临床医生对利用唾液作为诊断媒介的非侵入性诊断方法的兴趣越来越大。特定唾液微元素水平的变化在龋齿,牙周疾病加剧,局部免疫疾病中起着至关重要的作用。由于入口门处的免疫系统的状态与急性呼吸道感染的频率有关,因此我们的研究旨在探索唾液研究不足的毒性微元素的影响与经常性呼吸道感染儿童的局部免疫力的指标。目的:研究小学时代儿童唾液中有毒和潜在有毒金属的水平,并分析其与口腔局部免疫标记物的相关性。这项研究涉及30名5-7岁的儿童,患有复发性呼吸道感染(主要组)和10名经历过发作性急性呼吸道感染(对照组)的实际健康儿童。主要组中急性呼吸道感染发作的数量为7.64(1.02)(M(SD)),而在对照组中为1(0.63)。这项研究是根据赫尔辛基医学协会宣布涉及人类受试者的医学研究的伦理原则进行的。唾液样品的有毒金属水平,包括铝(Al),铅(Pb),钡(BA),thallium(TL),镉(CA),腹膜(SR),Bismuth(bi),bismuth(bi)和潜在有毒金属和潜在有毒金属,例如银(AG),胆汁(AG),壁炉(ga)和Indium(ga)和Indium(ga)和Indium(in Indium)。测量。在测试系统的帮助下,使用微板块的光度计(HIPO MPP-96)测量了分泌性IgA和溶菌酶作为局部免疫力的指标。对主要
t eChniquers i n M Olecular b Iology - 用于P LASMID DNA I求解DNA分离的方法:分子生物学技术在复杂基因组分析中的应用取决于准备纯质粒DNA的能力。大多数质粒DNA隔离技术有两种口味,简单 - 低质量的DNA制剂,更复杂,耗时但高质量的DNA制剂。对于许多DNA操作,例如限制酶分析,亚克隆和琼脂糖凝胶电泳,简单的方法就足够了。大多数DNA测序,PCR操作,转换和其他技术都需要高质量的制剂。大多数方法都以大量细菌细胞开头,这些细菌细胞包含选择的质粒并离心至颗粒。然后,细胞在基本条件下通过洗涤剂钠硫酸盐(SDS)的混合物裂解,或添加蛋白酶(溶菌酶)以削弱和破坏宿主细胞壁。这两种方法的结果都导致紧凑型超螺旋质粒DNA分子释放到溶液中。下一个问题是将RNA,基因组DNA和其他细胞成分与细胞分开。如何完成此操作取决于所使用的方法。碱性裂解制剂是隔离少量质粒DNA的最常用方法,通常称为小型质子。此方法将SDS用作弱洗涤剂,以在NaOH存在的情况下使细胞变性,该清洁剂可将细胞壁和其他细胞分子水解起来。高pH值通过添加乙酸钾进行中和。这将质粒DNA和RNA留在溶液中。钾对样品有额外的影响。钾离子与SD相互作用,使其成为不溶性的洗涤剂。SD会很容易沉淀,并且可以通过离心分离。这样做的不溶性SDS会捕获较大的基因组DNA并将其从上清液中清除。通常通过添加RNASEA消化去除RNA。这仅留下溶液中的蛋白质,碳水化合物和RNA核苷单体。原发性醇(例如乙醇或丙醇)用于沉淀DNA。这是通过对水的重新排序来实现的,使DNA聚集体并变得不溶性。结果是一种纯净的DNA颗粒,可以重悬于温和缓冲的溶液或水中。建议使用大量培养物中煮沸的微型REIPREP来制备少量的质粒DNA。虽然此方法非常快,但产生的DNA质量低于碱性裂解小型培训的质量。在碱性裂解小型方法中,溶菌酶用于水解负责使细菌细胞壁具有其强度的广泛交联蛋白。然后将细胞煮沸以进一步使蛋白质结染并破坏细胞壁。然后用酒精沉淀质粒DNA。这两种方法都将仅产生几µg质粒DNA。对于纯度较高的较大数量,需要许多其他步骤。通过在非常高的重力力下在氯化丘密度梯度中离心,根据其密度分离其密度。氯化剖腹梯度产生的高质量质粒DNA不含大多数污染物,但使用溴化乙锭来识别DNA(潜在的诱变剂),并且需要长时间的超级离心运行以建立密度梯度。该方法是通过使用碱性裂解方法裂解细胞的,并在350,000 x g下离心14小时。首先,将CSCL梯度在小管中制成,并用溴化乙锭添加DNA。在旋转时,DNA将向下迁移,直到达到与质粒相同的CSCL的密度。因此,较大的DNA将与紧凑的质粒DNA分离。用紫外线可视化质粒带,用针切除,然后重复该过程。您可以看到,这是一种非常复杂且乏味的方法,用于隔离DNA,通常不经常在柱分离的出现中使用。现在存在一种更流行的方法,它利用了质粒DNA的物理特性和碱性裂解方法中发现的污染物的差异。核酸是负电荷的,因此可以使用阴离子交换
这项研究旨在评估补充益生菌的饮食(芽孢杆菌),益生元(壳聚糖)和合成生物学在120天内的生长性能,先天免疫系统,抗氧化剂水平,肠道社区和粮食质量。实验性鱼(15.5±0.352g)随机分布到12个矩形聚乙烯储罐中,每个储罐60鱼。测试了四种重复的四种治疗方法:对照,益生菌(Sanolife®Pro-F,Pro),益生元(壳聚糖,PRE)和合成生素(益生菌和壳聚糖的组合,SYN)。结果表明,在益生菌治疗中,溶解的氧浓度显着增加和pH水平提高。与对照组相比,所有处理中的联合氨(NH3)水平均降低。益生元补充的饮食显着改善了最终体重,最终长度,体重增加,状况因子,平均每日体重增加,特定的生长速度和存活率。在补充益生菌的所有处理中,血清溶菌酶活性和一氧化氮水平均高。此外,益生菌组中肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)酶水平明显更高,而马发二醛(MDA)水平降低。益生菌的添加和合成生的存在增加了四个月的鱼类肠和池塘水的总细菌数量。病原性气管疏松性仅在对照组的水中鉴定出来。大肠杆菌和沙门氏菌。16S rDNA基因测序在益生菌处理的水中鉴定出了sphaericus sphaericus,在对照处理的肉体中鉴定出cile胶菌菌。添加芽孢杆菌菌株和壳聚糖分别增强了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的生长和健康。
摘要:膜是化学净化、生物分离和海水淡化的关键部件。传统的聚合物膜普遍存在渗透性和选择性之间的权衡,这严重阻碍了分离性能。纳米多孔原子薄膜(NATM),如石墨烯 NATM,有可能打破这种权衡。由于其独特的二维结构和潜在的纳米孔结构可控性,NATM 有望通过分子筛获得出色的选择性,同时实现极限渗透性。然而,石墨烯膜的概念验证演示和可扩展的分离应用之间存在巨大的选择性差异。在本文中,我们提供了一种可能的解决方案来缩小这种差异,即通过两次连续的等离子体处理分别调整孔密度和孔径。我们证明,通过缩小孔径分布,可以大大提高石墨烯膜的选择性。首先应用低能氩等离子体来使石墨烯中高密度缺陷成核。然后利用受控氧等离子体选择性地将缺陷扩大为具有所需尺寸的纳米孔。该方法具有可扩展性,制备的具有亚纳米孔的 1 cm 2 石墨烯 NATM 可以分离 KCl 和 Allura Red,选择性为 104,磁导率为 1.1 × 10 −6 ms −1 。NATM 中的孔可以进一步从气体选择性亚纳米孔调整到几纳米尺寸。制备的 NATM 在 CO 2 和 N 2 之间的选择性为 35。随着扩大时间的延长,溶菌酶和牛血清白蛋白之间的选择性也可以达到 21.2,渗透性比商用透析膜高出大约四倍。这项研究提供了一种解决方案,可以实现孔径可调的 NATM,其孔径分布较窄,适用于从气体分离或脱盐中的亚纳米到透析中的几纳米的不同分离过程。关键词:纳米多孔石墨烯膜、纳米多孔原子级薄膜 (NATM)、蛋白质选择性膜、等离子蚀刻、纳米孔工程
免疫与生殖是雌性昆虫生存和种群维持的重要功能。然而由于资源有限,这两个功能无法同时满足,从而导致它们之间需要进行能量权衡。值得注意的是,这种免疫-生殖权衡的机制尚不清楚,而能量竞争可能在其中起着核心作用。本研究以飞蝗为研究对象,对参与脂质合成和昆虫能量代谢的关键基因脂肪酸合酶(FAS)进行了研究。利用细菌感染和RNA干扰(RNAi)技术研究了不同处理下蝗虫的免疫、繁殖力和能量代谢模式的变化。本研究结果表明,藤黄微球菌感染可触发蝗虫的免疫反应,显著上调防御素3(DEF3)和Attacin的表达,并增强酚氧化酶(PO)活性。当 FAS2 沉默后,细菌攻击在较小程度上上调了 DEF3 和 Attacin 的表达,导致溶菌酶活性增加而不是 PO。此外,细菌感染导致脂肪体中糖原和葡萄糖含量降低,同时三酰甘油(TAG)含量显著增加。然而,在 FAS2 敲低后,脂肪体中的脂质和碳水化合物含量均显著降低。与单独的细菌感染相比,低 FAS2 表达进一步加剧了蝗虫的繁殖力受损。卵黄蛋白 A ( VgA ) 和卵黄蛋白 B ( VgB ) 的表达水平显著降低,卵巢萎缩严重。值得注意的是,卵巢重量仅为对照组的 21%。此外,雌性表现出最少的产卵行为。总之,我们的研究结果表明,在 FAS2 基因沉默后,蝗虫更倾向于免疫刺激能量激活,而生殖投入减少。该研究成果将有助于进一步探索蝗虫免疫和生殖能量之间权衡的分子机制。
本公告是在关键数据的自然细胞生物学中最近出版的,进一步阐明了MAF生物标志物周围的生物学。INBIomotion联合创始人Roger Gomis教授Roger Gomis教授领导的IRB巴塞罗那的一支团队在此出版物中揭示了MAF基因扩增会增加乳腺癌患者转移风险的机制。这一发现是理解转移分子基础的关键步骤,并且对治疗具有相关的临床意义。关于Inbiomotion Inbiomotion是IRB巴塞罗那和ICREA的衍生作品,该衍生作用是由Roger Gomis教授于2011年成立的,此后将MAF基因鉴定为预测乳腺癌中骨转移的生物标志物。Inbiomotion基于MAF基因扩增(MAFTest®)的检测开发了一种诊断套件,以促进精确医学并改善乳腺癌患者的治疗。该公司拥有200多项专利和专利申请,涵盖其专有MAFTest®鱼,并在早期乳腺癌患者的辅助治疗中使用双膦酸盐。公司的主要投资者是YSIOS Capital,Caixa Capital Risc,Alta Life Sciences和Vila Casas Foundation。有关更多信息,请访问www.inbiomotion.com。关于Spa Farma Spa Farma是一家家族拥有的公司,由创始人Rodolfo Ferrari的孙女AliseéMattaEchaurren拥有。公司的遗产深深植根于长期以来的创新和成功遗产。Spa Farma成为战后不久的第一家在意大利生产和商业化青霉素的公司之一,创造了历史。由于与亚历山大·弗莱明爵士的科学合作,这项成就之后是溶菌酶的发展。在60年代,该公司将其业务扩展到其他治疗领域,目前的主要领域是:骨/疼痛,心脏代谢,肿瘤学和肾脏病。最近,该公司在西班牙和葡萄牙建立了一个会员,请访问www.spafarma.com。关于MAF基因MAF(间充质肌动纤维骨肉瘤基因,AP-1家族的转录因子)在原发性癌症肿瘤中放大。它与转移的增加有关,尤其是骨转移。MAF的转录控制基因,例如PTHRP,该基因调节了与转移相关的细胞过程,例如生存,起始,代谢重新布线和对骨髓的粘附 -
牛奶脂肪球(MFGS)是自然创造力的一个非凡例子。人牛奶(HM)含有3-5%的脂肪,0.8–0.9%的蛋白质,6.9-7.2%的碳水化合物,碳水化合物计算为乳糖和0.2%矿物质成分。大多数这些营养素都在这些MFG中携带,这些MFG由富含能量的三酰基甘油(TAG)核心组成,周围是三重膜结构。膜含有极性脂质,专门的蛋白质,糖蛋白和胆固醇。这些生物活性成分中的每一个都具有重要的营养,免疫学,神经和消化功能。这些MFG旨在迅速在胃肠道上迅速释放能量,然后在肠道内持续一段时间,以便将保护性的生物活性分子传递到结肠。这些特性可能会塑造发展中胃肠道的微生物定植和先天免疫特性。牛奶中的牛奶脂肪小球来自人类和反刍动物的结构可能类似于结构,但大小,轮廓,成分和特定成分存在很大差异。有可能不仅可以以目标为导向的方式增强营养成分,以纠正婴儿中的特定缺陷,而且还可以将这些脂肪球用作需要特定治疗的婴儿的营养素。提到一些,在防御胃肠道和呼吸道感染,提高胰岛素敏感性,治疗慢性炎症和改变血浆脂质的情况下,可能有可能增强神经发育的可能性。新生儿(2024):10.5005/jp-journals-11002-0085本综述提供了MFG各个组成部分的组成,结构和生物学活动的概述。我们已经从我们自己的实验室中吸收了研究结果,并对文献进行了广泛的综述,利用PubMed,Embase和Science Direct在内的多个数据库中的关键术语进行了综述。为了避免在研究中识别偏见,关键字是轶事体验和PubMed的医学主题(网格)词库的先验名单。
colorcult®预期用途colorcult®培养基用于从血液中培养和恢复微生物(细菌和酵母)的定性程序。摘要Colorcult®培养瓶包含高度营养的培养基,该培养基旨在生长重要的致病微生物,包括血液中存在的小生物。将在Colorcult®培养小瓶中接种要测试的样品。这些小瓶被保存在孵化器中,并定期监测化学传感器的颜色变化以呈阳性报告。原理colorcult®培养基包含各种类型的蛋白质和其他营养素,以支持血液中存在的挑剔和非养生微生物的生长。聚丙醇磺酸钠(SPS)是一种聚苯抗凝剂,抑制补体和溶菌酶活性,会干扰吞噬作用,并使许多抗生素失活。通常认为通过抵抗人类血液的细菌抑制剂来提高细菌分离的速度和速度。在彻底且温和的混合后,将样品添加到Colorcult®培养小瓶中。孵化小瓶并观察到化学传感器的颜色变化,作为微生物生长的证据。每个小瓶在底部包含一个化学传感器,该化学传感器可以检测到微生物的生长产生的CO 2的增加。传感器是在视觉上或通过仪器进行监视的,以进行颜色变化,这与存在的CO 2的数量成正比。正色变化表明在小瓶中推定存在可行的微生物。2。3。4。树脂已被纳入Colorcult®培养瓶中,以增强生物的恢复,而无需进行特殊加工。配方 *ColorCult®培养基的配制为:大豆酪蛋白消化汤3.0%酵母提取物0.4%氨基酸0.05%糖0.5%维生素0.025%抗氧化剂/还原剂/还原剂0.005%钠苯二苯甲酸钠硫酸钠(SPS)硫酸钠(SPS)(SPS)0.05%resin CONIT CONITER CONSIT 15.5%Agar Agar Agar Cation Agar Agar Agar Agar contail 0.5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5% * 5%。其他材料需要针和注射器,以进行血液收集,棉花或纱布,异丙醇(70%),孵化器35°C-37°C,无菌排气单元。标本收集和准备1。必须使用无菌技术收集样品,以减少污染的机会。从成年患者那里收集约8-10 mL的血液,小儿患者收集约1-3 mL。可以使用低至3 mL的样品体积,但是,恢复不会像较大的体积那样大。接种的配色®培养瓶应尽快将其运送到实验室。
化学和解决方案。氯化镁(MGCL 2),碳酸氢铵(NH 4 HCO 3),L-甘氨酸,Trizma®碱基,Tween-20,乙醇胺(EA),N-(3-二甲基氨基氨基丙基)-N'-乙基甲基二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二酰基(EDC) bovine serum albumin (BSA), sodium hydroxide, sodium chloride, 4-morpholineethanesulfonic acid monohydrate (MES), hydrochloric acid, formic acid (FA), streptavidin-alkaline phosphatase from Streptomyces avidinii conjugate (Strep-ALP) and lysozyme from chicken egg white were purchased from Merck (意大利米兰)。磷酸钾(KH 2 PO 4),二氯磷酸二硫酸氢钾(K 2 HPO 4),磷酸钠二迪巴斯二硫酸二硫代十二碳水化酸盐(Na 2 HPO 4·12H 2 O),氯化钾和无rnase含水量和无RNase水的含量是从Carlo Erba(Cornaredo Erba(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo)(Cornaredo),Milan,Milan,Milan,Milan,Milan,Italan,Italan,Italy。氢喹酮双磷酸(HQDP)由Metrohm Italiana(Origgio,意大利Varese)提供。通过Milli-Q Element A10系统(Millipore,旧金山,加利福尼亚州,美国)获得了去离子水,并用于缓冲溶液制备。缓冲溶液的组成如下。无RNase缓冲液用于所有RNA适体的实验中。单链DNA序列购自Biomers.net(德国ULM),而C80RNA序列是从代替(Carlo Erba,Carlo Erba,Milan,意大利)。所有的寡核酸均处于干燥状态,适当地等分以避免反复的冻结/解冻周期。在Milli-Q水中以DNA寡核素进行了冻干等分试样的重悬,而C80RNA的无RNase水中的水则达到了供应商建议的100μM终浓度。库存溶液存储在-20°C。MES缓冲液:25毫米ME(pH 5.0); Tris缓冲液:0.1 MTrizma®基础,5 mm MGCL 2(pH 7.4); TRIS-T缓冲液:0.1 MTrizma®基础,5 mm MGCL 2,0.05%w/vtween®20(pH 7.4); TRIS盐水缓冲液:20 mMTrizma®基础,5 mM MGCL 2,0.1 M NaCl(pH 7.4);含镁离子(PBS-MG 2+)的磷酸盐缓冲盐盐水:1.5 mm kH 2 PO 4,8 mm Na 2 HPO 4,137 mm NaCl,2.7 mm KCl,1 mm MGCL 2(pH 7.4);从Thermo Fisher Scientific(美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)购买磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为干燥粉末,其溶解后具有以下成分:0.1 m Na 2 HPO 4,0.15 m NaCl(pH 7.2); Tris甘氨酸钾(TGK)缓冲液:25 mMTrizma®基础,192 mm L-甘氨酸,5 mm K 2 HPO 4(pH 8.3)。
细胞,并重悬于裂解中(20 mM Tris,500 mM NaCl和10 mM Imidazole,pH 8.0),并补充了“完整的蛋白酶抑制剂鸡尾酒”(Merck,CAT,CAT#11697498001)。重悬于重悬酶后,苯并酶核酸酶(默克,CAT#E1014-5KU,每40 ml裂解物10μl)和溶菌酶(默克,CAT#10837059001,1 mg/ml裂解物),并加入冰上30分钟。细胞在Avestin乳液C-5均质器(15-20 kpsi)上被破坏,并通过离心(15,000 g,4°C,15分钟)去除不溶性细胞碎片。在10°C下进行所有随后的色谱步骤。清除的裂解物被加载在5 ml Histrap FF柱上(Cytiva,Cat#17525501)。将树脂用10列的洗涤液(裂解效果)洗涤(但使用20 mM咪唑)洗涤,并用10列的洗脱体洗脱蛋白(裂解效果,但用250毫米咪唑)洗脱。馏分合并,并在透析中稀释至25 mL(250 mM KCl,20 mM HEPES和1 mM DTT和1 mM EDTT和1 mM EDTA,pH 8.0)。使用透析膜管透析在10°C下透析,使用分子量切割为6-8 kDa(光谱/POR标准级再生纤维素,宽23毫米)的透析膜管。1-2小时后,将透析液替换,透析继续过夜。第二天,将透析样品在10 mM HEPE(pH 8)中稀释了两倍(pH 8),并立即加载在5 mL HITRAP肝素HP柱(Cytiva,CAT,CAT#17040601)上,并用Bu效率a(20 mM Hepes,150 mm Hepes,150 mm KCl,pH 8.0)。关注的分数被汇总并上升。将树脂用2柱体积洗涤,并使用bu虫B(20 mM Hepes,2m kcl,pH 8.0)的线性梯度在12柱体积上洗脱蛋白质。含量为2 mL;通过在120 mL SuperDex200凝胶滤光管(Cytiva#28989335)上注射上浓缩样品,以50 mM磷酸钠,300 mM NaCl,300 mM NaCl,0.1 mm EDTA,pH 7.5 AS分离bu e e e e e e e e e e o 进行了最终的色谱步骤。进行了最终的色谱步骤。