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CRISPR介导的Brugia Malayi的转染
由于这些生物的困难生物学，反向遗传学在人类丝状寄生虫中的应用滞后。最近，我们开发了一种共同培养系统，该系统允许转染Brugia Malayi的感染性幼体阶段并有效地发展为Fecund成年人。这是开发基于Piggybac Transposon的工具包的，该工具包可用于生产具有稳定整合到寄生虫基因组中的转基因序列的寄生虫。然而，PiggyBac系统通常已被基于群的常规间隔短篇小学重复序列（CRISPR）技术取代，这允许精确编辑基因组。在这里，我们报告了适应b。马来语用于CRISPR介导的敲入插入寄生虫基因组。在b的基因间区域中鉴定出合适的CRISPR插入位点。马来语基因组。修改了双重记者Piggybac载体，用插入位点的序列替换了Piggybac倒的末端重复区域。b。用合成引导RNA，修饰的质粒和cas9核酸酶转染马来语或其。将转染的寄生虫植入沙鼠中，并允许发展为成年人。后代微丝菌进行了筛选，并筛选了质粒中编码的分泌的荧光素酶报告器的表达。发现大约3％的微丝虫分泌荧光素酶；所有这些都包含插入寄生虫基因组中预期位置的转基因序列。这些数据表明CRISPR可用于修改B的基因组。使用适配器介导的PCR测定法，检查了转基因微丝菌是否存在关闭目标插入；没有发现脱靶插入。马来语，开辟了精确编辑这种重要人类丝状寄生虫的基因组的道路。
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淋巴纤维和尾cer虫是两种主要被忽视的热带疾病，负责全球5000万人造成严重的残疾，而兽医细胞（Heartwormis）是一种潜在的伴侣动物的致命寄生虫感染。迫切需要安全，短期治愈的（杀菌剂）药物来消除这些使人衰弱的寄生虫感染。We investigated combination treatments of the novel anti- Wolbachia azaquinazoline small molecule, AWZ1066S, with benzimidazole drugs (albendazole or oxfendazole) in up to four different rodent filariasis infection models: Brugia malayi— CB.17 SCID mice , B. malayi— Mongolian gerbils, B. Pahangi - 蒙古的沙鼠和litomosoides Sigmodontis-蒙古gerbils。组合处理在5天的治疗中从雌性蠕虫中引起阈值（> 90％）的阈值（> 90％），使用2倍的AWZ1066剂量可膨胀的剂量比单一疗法低。短道降低剂量AWZ1066S-α-α-组合处理还提供了部分成人活性和/或长期抑制胚胎发生，从而在B. pahangi和L. sigmodontis gerbil模型中完全传播封锁。我们确定短期AWZ1066S-α-阿替唑的共同治疗显着增加了马来人蠕虫的种系和皮下注射组织中沃尔巴基亚种群的耗竭，