补充材料。材料与方法文库制备和 Miseq (Illumina®) 测序使用文库制备指南 (LPG) ( https://support.illumina.com/downloads/16s_metagenomic_sequencing_library_preparation.html ) 中报告的 Illumina 接头序列和引物悬垂部分(正向和反向)扩增 16S rRNA 基因的 460 bp V3-V4 高变区。使用以下 PCR 反应扩增每个 DNA 样本:2.5 µl 5 ng/ µl DNA、5 µl 引物正向悬垂部分、5 µl 引物反向悬垂部分、12.5 µl 2x KAPA HiFi HotStart ReadyMix (KAPA Biosystems)。使用 LPG 中报告的循环程序。 PCR 产物在 2% 琼脂糖凝胶(GellyPhor LE,Euroclone SPA,意大利米兰)上电泳分离,并用 GelRed™ 核酸凝胶染料(Biotium,美国加利福尼亚州海沃德)染色。通过紫外光透射仪观察预期长度的 PCR 产物的存在。然后,用 NucleoMag 试剂盒纯化 DNA 扩增子以清理和选择 NGS 文库制备反应的大小(Macherey-Nagel),并按照制造商的说明使用 Illumina® DNA/RNA UD Indexes Tagmentation 试剂盒对每个样本进行索引。在验证和定量之前,对文库进行进一步纯化。在 Agilent 4150 TapeStation D1000 ScreenTape 检测仪(安捷伦科技公司)上对文库进行验证,以验证大小,而定量则使用 Qubit 4 荧光计(赛默飞世尔科技,美国)。根据 DNA 扩增子的大小,应用 Illumina LPG 中报告的公式,以 nM 为单位计算最终的 DNA 浓度。最后,将每个文库中的 5 µl 稀释 DNA 等分试样混合,以合并具有唯一索引的文库。在 Miseq 加载之前,根据 Illumina LPG 说明对合并的文库进行变性和稀释。使用 MiSeq Reagent Micro Kit v2(500 个循环)加载合并的文库,运行包括 20% PhiX 作为内部对照。生物信息学分析测序数据包含在包含带有原始读取的 FASTQ 文件的文件夹中(R1 文件包含每个样本的正向读取,R2 文件包含每个样本的反向读取),使用 FastQC(英国剑桥 Babraham Institute)进行质量检查。然后,使用 DADA2 R 包(Callahan 等人,2016 年)处理 R1 和 R2 文件以生成扩增子序列变体 (ASV)(图 1)。最终生成了 ASV 表,总结了每个样本的不同 ASV 的数量。
从历史角度来看,人类文明始于石器时代,当时人们只使用天然材料,如石头、粘土、兽皮和木材,用于制造武器、工具、住所等。因此,优质石材的储藏地成为人类文明的早期殖民地。然而,对优质工具的需求日益增长,引发了探索,从而进入了青铜时代,随后是铁器时代。当人们发现铜并知道如何通过合金使铜变硬时,青铜时代开始于公元前 3000 年左右。铁和钢是一种更坚固的材料,在战争中占了上风,大约在公元前 1200 年开始使用。铁资源丰富,因此不仅限于富人。这种材料的普遍性在许多方面影响了每个人,因此获得了民主材料的名称。人类文明的下一个重大进步是公元 1850 年左右发现了一种廉价的炼钢工艺,这使得铁路和工业世界现代基础设施的建设成为可能。民主材料最显著的特征之一是用户数量激增。因此,几个世纪以来,对人力和物力资源的需求一直存在,而且这种需求仍然很强烈。人们一致认为,我们目前正处于太空时代,其特点是许多技术发展朝着材料发展,从而导致
2π,其中k是x方向上的波形,n是频带索引。要考虑到自旋轨道的影响,我们将假设ψk,n和u k,n都是二维旋转器。我们将幅度E的电场施加到平行于边缘(即X方向)的方向上,即,汉密尔顿人受到潜在项EE ˆ X的扰动,其中 - e是电子电荷,而位置操作员ˆ x。对于具有锯齿形和胡须边缘(保留山谷数)的石墨烯纳米替宾,坐标(x,y)的作用由单位单元格L和组合索引(M,σ)播放,其中m = 1。。。n表示每个单位单元格中的两个原子水平行,其中σ原子(a或b)中的两个原子行(见图1(a),(c)在主文本中)。请注意,一排可能会错过任何一个sublattice的原子,如图1(c),在每个单元单元的第1行中错过了一个A原子。在显示纳米孔中的密度和电流的结果时,在Y轴上的位置只能解析到行数中。 因此,Y坐标将被离散索引所取代,该索引将采用整数值,以在一行中标记位置,并在行之间标记位置(中途)。在Y轴上的位置只能解析到行数中。因此,Y坐标将被离散索引所取代,该索引将采用整数值,以在一行中标记位置,并在行之间标记位置(中途)。
分子遗传学,适当的动物模型的重大进展以及分析技术的改进有助于对心脏发展的更多了解。现代的 - 杜克胚胎学现在将分子和细胞生物学技术与跨多个模型系统的传统胚胎学方法结合在一起。我们的理解中很大一部分继续源自非人类的实验模型,并补充了从结构畸形的人心脏中估算的观察结果[1]。在早期研究中,鸟类胚胎是最受欢迎的实验模型,因为可以轻松地观察和操纵它们。由于遗传和分子研究工具的强度,该小鼠现已成为研究心脏发育的首选模型。表1.1提供了对人,小鼠和鸡胚胎中发育分期的简化比较[2-8]。了解心脏发展不仅对分类和管理先天性心脏病有影响,而且还为儿童和成人的新型管理方法提供了一个平台。的目标是简化对复杂发展结构的描述,在本章中,我们努力使用与人类发展的描述术语进行统一的命名术语。“背心肌突出”称为“前庭脊柱”。因此,“前后轴”被“背腹轴”或“颅骨 - 尾audal”取代。 “前”通常被“腹侧”或“颅骨”取代。 “后部”经常被“背面”或“尾骨”取代。 “ CONUS”被“近端流出道”代替,而“ Truncus”被远端流出道取代。