基于CRISPR的摘要定向进化是一种有效的繁殖生物技术,可改善植物中的农艺特征。然而,使用单个单个指南RNA,其基因多样化仍然受到限制。我们在这里描述了多重的正交基础编辑器(MOBE),以及随机多重的SGRNA组装策略,以最大程度地提高基因多样化。bobe可以在不同的目标上诱导有效的正交安倍(<36.6%),CBE(<36.0%)和A&CBE(<37.6%),而SGRNA组装策略随机基础编辑各个目标上的基础编辑事件。与稻米乙酰辅酶A羧化酶(OSACC)的第34外显子的每个链中的130和84个靶标相应,我们观察到了随机双重双重和随机三重SGRNA库中的目标 - 折叠组合。我们使用MOBE和大米中的随机双重SGRNA文库进一步进行了OSACC的定向演变,并获得了更强的除草剂耐药性的单个或连接的突变。这些策略对于功能基因的原位定向演变很有用,并且可能会加速大米的性状改善。
摘要 基于 CRISPR 的定向进化是一种有效的育种生物技术,可改善植物的农艺性状。然而,使用单个单向导 RNA 其基因多样化仍然有限。我们在这里描述了一种多重正交碱基编辑器 (MoBE) 和一种随机多重 sgRNA 组装策略,以最大化基因多样化。MoBE 可以在不同的靶标上有效诱导正交 ABE (< 36.6%)、CBE (< 36.0%) 和 A&CBE (< 37.6%),而 sgRNA 组装策略将各种靶标上的碱基编辑事件随机化。对于水稻乙酰辅酶 A 羧化酶 (OsACC) 第 34 外显子的每一条链上的 130 个和 84 个靶标,我们在随机双 sgRNA 和随机三重 sgRNA 文库中观察到多达 27 294 种靶标-支架组合类型。我们进一步利用MoBE和随机双sgRNA文库对水稻中的OsACC进行了定向进化,获得了更强的除草剂抗性的单突变或连锁突变。这些策略可用于功能基因的原位定向进化,并可能加速水稻性状改良。
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可,根据未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者(此版本于 2023 年 7 月 30 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.07.27.550902 doi:bioRxiv 预印本
未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者(此版本于 2023 年 7 月 15 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.07.15.549169 doi:bioRxiv preprint
急性腹部感染,例如穿孔腹膜炎和腹腔内脓肿可能是致命的。此外,抗菌(AMR)细菌的传播现在已成为全球一个严重的问题,这使得抗菌选择极为困难(Thompson,2022)。在2019年,据报道,全球感染AMR引起的死亡人数为495万。据报道,这些死亡人数为127万,是由于直接的AMR感染(Thompson,2022)。AMR发生率增加的原因之一是过度使用广谱抗菌剂。在细菌培养测试中,大约需要5天的时间才能完全识别病原细菌并提供抗菌易感性结果(Pardo等,2016)。因此,严重的病例通常需要使用广谱抗菌剂。这种临床状况强调了迫切需要研究快速鉴定病因生物,以选择适当的较窄的蛋白酶抗菌剂。
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图 1. 现有 Cas12a CRISPRa 技术的评估。A) 采用两种不同的 Cas12a 核酸酶失活突变的 CRISPRa 构建体的比较。通过转导五天后表达 CD4 的细胞百分比来测量激活程度。B) 针对采用直接与 dCas12a (D908A) 连接的 TAD 组合的 12 种 CRISPRa 构建体变体,以基线表达为标准对 CD4 平均荧光强度 (MFI)。C) 示意图描绘了基于流式细胞术的平铺筛选的概览,该筛选用于识别其他活性 Cas12a CRISPRa 指南。D) 根据指南靶位点相对于 CD4、CD26、CD97 和 CD274 的转录起始位点 (TSS) 的位置绘制了每个指南在技术重复中的绝对最小 LFC 的 Z 分数。
保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。(未经同行评审证明)是作者/资助者,他已授予Medrxiv的许可证,以永久显示预印本。此预印本版的版权持有人于2023年4月25日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.04.25.23.23289056 doi:medrxiv preprint
我们提出了一种具有极化多重照明的单次定量差异相比(DPC)方法。在我们系统的照明模块中,可编程的LED阵列分为四个象限,并覆盖了四个不同极化角度的偏振膜。我们在成像模块中的像素之前使用偏振摄像头。通过将自定义LED阵列上的偏振膜与相机中的极化器匹配,可以从单件采集图像中计算出两组不对称的照明采集图像。与相传函数结合使用,我们可以计算样品的定量相。我们介绍了设计,实现和实验图像数据,证明了我们方法获得相位分辨率目标的定量相位图像以及HELA细胞的能力。
6 Assoc.Professor,ECE部,Seshadri Rao Gudlavalleru工程学院,Gudlavalleru -521356,A.P.,印度A.P.,A.P.,India Abstract多路复用器(或MUX)是一个数字电路,它选择了几个模拟或数字输入信号之一,并将选定的输入转发到单个线条中。多路复用器也称为数据选择器。以不同方式实施的多路复用器。绝热逻辑由于热力学过程而消散了较少的能量损失,在这种过程中没有能量交换。绝热逻辑与切换活动的概念一起工作,该概念通过将存储的能量恢复到供应中来降低功率。这些电路是使用可逆逻辑来节省能量的低功率电路。在这三个多路复用器中,使用CMOS逻辑和两种绝热逻辑方法(即有效的电荷恢复逻辑(ECRL)和时钟绝热逻辑(CAL)实现。这些电路是设计,模拟和合成的。结果表明,与ECRL和CMOS逻辑相比,CAL设计消耗的功率更少。引入现代数字系统中功耗的重要性已大大增加。由于电池提供的有限电源,这些设备中涉及的电路必须设计为减少功率。还需要昂贵的噪音冷却机械,电池和电源保护电路。多路复用器是数字设计中必不可少的组成部分。收到二进制信息在数据密集型设计中广泛使用。因此,最小化多路复用器的功率耗散是低功率设计的主要关注点之一。大多数节电技术涉及电源的缩放,这会导致阈值泄漏的大幅度增加,从而在过程变化中引起了不确定的电流。因此,需要其他某些与电压缩放无关的技术。已经发现,计算和功率耗散之间存在基本联系。也就是说,如果可以以某种方式实施计算而没有任何信息损失,那么它所需的能量可能会降低到零。可以通过以可逆的方式执行所有计算来实现。因此,在充电转移阶段的最低功耗称为绝热切换。基于CMOS的常规设计在切换过程中消耗了很多能量。绝热开关技术在充电过程中通过PMOS减少了能量耗散,并重用在放电阶段存储在负载电容器上的某些能量。背景一个多路复用器是具有2N输入线和单个输出线的组合电路。简单地,多路复用器是多输入和单输出组合电路。