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比较基于 VLP 和基于 GST-L1 的多重免疫测定法检测首次尿液中疫苗诱导的 HPV 特异性抗体
注意：显示了总人群 (n = 53)、接种疫苗 (n = 36/53) 和未接种疫苗 (n = 17/53) 女性的中位总人类 IgG (µg/mL)、M4ELISA HPV Log 10 抗体水平（HPV6 和 11 为任意单位/mL [AU/mL]，HPV16 和 18 为国际单位 [IU/mL]）、GST‐L1-MIA HPV 抗体水平（103 中位荧光强度 [MFI]）和四分位距 (IQR，Q25-Q75)。a FV 尿液中的抗体水平除以血清水平，表示为中位数%，加上 IQR。b 对于 HPV6/11 抗体；之前接种过二价疫苗的女性（n = 4）被视为未接种疫苗（n = 32/53 接种疫苗；n = 21/53 未接种疫苗）。 * 星号表示的 P 值（Mann-Whitney U 检验）表示接种疫苗的女性和未接种疫苗的女性之间的中位抗体产量存在显著差异。
利用链球菌进行体内多重基因靶向...
胰腺导管腺癌是一种致命的癌症类型，与体细胞中的多种基因突变有关。基因工程小鼠几乎不适用于开发胰腺癌模型，异种移植模型在反映早期胰腺癌方面存在局限性。因此，使用成簇的规律间隔的短回文重复序列进行体内体细胞基因工程用于生成胰腺癌动物模型越来越受到关注。在本研究中，我们选择了 Kras、Trp53、Ink4a、Smad4 和 Brca2 作为靶基因，并应用空肠弯曲菌 Cas9 (CjCas9) 和化脓性链球菌 Cas9 (SpCas9) 通过腺相关病毒 (AAV) 转导来开发胰腺癌。在确认 AAV2 的多灶性和弥漫性转导后，我们生成了 SpCas9 过表达小鼠，该小鼠在两次 AAV 转导后表现出靶基因中高双链 DNA 断裂 (DSB) 和胰腺上皮内瘤变 (PanIN) 病变；然而，三次 AAV 转导的野生型 (WT) 小鼠没有出现 PanIN。此外，将小型 Cjcas9 应用于具有两个 AAV 系统的 WT 小鼠，该小鼠还出现了高广泛性 DSB 和 PanIN 病变。观察到了导管和胰岛细胞中的组织学变化和癌症标志物（如 Ki67、细胞角蛋白、Mucin5a、α 平滑肌肌动蛋白）的表达。此外，研究还揭示了几个发现，例如 1) AAV-CjCas9 的多重 DSB 潜力、2) 导管周围淋巴细胞浸润、3) 多灶性癌症标志物表达，以及 4) 在 AAV 介导的靶向中启动 PanIN 需要 12 个月以上。在这项研究中，我们提出了一种用于体内癌症建模的有用工具，该工具也适用于其他疾病模型。
用于控制大型软执行器阵列的流体多路分解器
软机器人领域致力于创造大部分（如果不是全部）柔软的机器人。虽然软致动器和软传感器都取得了重大进展，但在软控制系统的开发方面所做的工作相对较少。这项研究提出了一种软微流体多路分解器作为软机器人的潜在控制系统。多路分解器只需几个输入即可控制许多输出，增加了软机器人的复杂性，同时最大限度地减少了对外部阀门和其他外部组件的依赖。这项研究中的多路分解器改进了早期的微流体多路分解器，输入减少了近两倍，这一设计特点简化了控制并提高了效率。此外，这项研究中的多路分解器旨在适应软机器人所需的高压力和流速。多路分解器的特征从单个阀门级别到完整的系统参数，其功能通过控制一系列可单独寻址的软致动器来展示。
多重引导RNA表达系统及其对植物基因组工程的功效
摘要背景：化脓性链球菌 CRISPR 系统由 Cas9 内切酶 (Sp Cas9) 和含有靶标特异性序列的单链向导 RNA (gRNA) 组成。理论上，Sp Cas9 蛋白可以切割与基因组中结合的 gRNA 一样多的靶标位点。结果：我们引入了一种无 PCR 的多 gRNA 克隆系统来编辑植物基因组。该方法包括两个步骤：（1）在 pGRNA 载体中的 tRNA 和 gRNA 支架序列之间克隆两个单链寡核苷酸片段的退火产物，该片段的每条链上都含有互补的靶标结合序列；（2）使用 Golden Gate 组装方法将来自几个 pGRNA 载体的 tRNA-gRNA 单元与含有 Sp Cas9 表达盒的植物二元载体组装在一起。我们通过进行靶向深度测序验证了多重 gRNA 表达系统在野生烟草（Nicotiana attenuata）原生质体和转化植物中的编辑效率和模式。Sp Cas9-gRNA 的两次近端切割大大提高了编辑效率，并在两个切割位点之间诱导了较大的缺失。结论：这种多重 gRNA 表达系统能够高通量生产单个二元载体，并提高植物基因组编辑的效率。关键词：CRISPR-Cas9、金门组装、多重 gRNA、植物基因组编辑
通过多重母体血浆DNA测序对三体性的非侵入性产前评估：大规模有效性研究
抽象目的验证了临床疗效和可行性的实际可行性，其可行性的孕产妇血浆DNA测序以筛选胎儿三体性21的高风险怀孕临床上的胎儿三体性筛查或绒毛膜绒毛绒毛采样。使用前瞻性收集或存档的母体等离子体样品对全核分型的设计诊断精度得到了验证。在香港，英国和荷兰设置产前诊断单元。参与者753名胎儿三体术高风险的孕妇，她通过全核分型进行了明确诊断，其中86名患有三体性胎儿。根据两种不同水平的样品吞吐量的方案：2-plex和8-plex测序，干预的DNA分子在母体等离子体中的多重平行测序多重平行。主要结果测量的DNA分子的比例来自染色体21。当染色体21 DNA分子比例的z得分为> 3时，诊断出21个三体胎胎。诊断敏感性，特异性，正预测值和负预测值是针对三体性检测的。的结果可从753例怀孕，具有8-plex测序方案，以及2-plex方案的314例怀孕。2-PLEX协议的性能优于8-PLEX协议的性能。使用2-PLEX方案，以100％的敏感性和97.9％的特异性检测到21胎儿，这导致正预测值为96.6％，负预测值为100％。8-PLEX协议检测到的21胎三体胎儿的79.1％和98.9％的特异性，阳性预测值为91.9％，负预测值为96.9％。
