XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search Systemnk
HLA I 类基因敲除可将同种异体原代 NK 细胞转化为适合“现成”免疫疗法的效应细胞
到目前为止，使用嵌合抗原受体 (CAR) 的细胞免疫疗法几乎只使用自体外周血来源的 T 细胞作为免疫效应细胞。然而，对于患有恶性肿瘤和造血功能紊乱且接受过大量预先治疗的患者，收集足够数量的 T 细胞通常具有挑战性。此外，这种 CAR 产品始终针对单个患者。相反，由于这些先天免疫细胞缺乏同种反应，因此可以在非 HLA 匹配环境中进行 NK 细胞输注。尽管如此，输注的 NK 细胞仍会被患者的免疫系统识别和排斥，从而限制了它们在体内的寿命并破坏了多次输注的可能性。在这里，我们设计了基因组编辑和先进的慢病毒转导方案，使原代人类 NK 细胞对受体 CD8 + T 细胞的同种异体反应不敏感/有抵抗力。通过 CRISPR/Cas9 靶向 B2M 基因敲除 HLA I 类分子的表面表达后，我们还共表达了单链 HLA-E 分子，从而通过“缺失自我”诱导的裂解防止 NK 细胞与 B2M 敲除 (KO) 细胞自相残杀。重要的是，这些基因工程 NK 细胞在表型和对不同 AML 细胞系的天然细胞毒性方面与未改造的 NK 细胞在功能上没有区别。在共培养试验中，B2M-KO NK 细胞既不会诱导同种异体 T 细胞的免疫反应，也不会重新激活使用相应 NK 细胞供体的辐照 PBMNC 扩增/引发的同种异体 T 细胞。我们的研究证明了在原代同种异体 NK 细胞中进行基因组编辑的可行性，可以减少不匹配的 T 细胞对其的识别和杀伤，并且是使用非 HLA 匹配的原代人类 NK 细胞作为现成的“现成的”免疫效应物用于人类癌症的各种免疫治疗适应症的重要先决条件。
鉴定一种新型变构口服 CBL-B 抑制剂，该抑制剂可在体内和体外增强 T 细胞反应并增强 NK 细胞杀伤力
这里我们报告了我们的主要抑制剂系列中的一种，一种通过应用我们的 Smart AllosteryTM 平台识别的具有皮摩尔结合亲和力的低纳摩尔强效抑制剂。该抑制剂与 CBL-B 的非活性形式结合，其在识别的热点中的结合模式由共晶体结构证实。它抑制激酶对 CBL-B 的磷酸化，抑制 CBL-B 的 E3 连接酶活性，促进细胞因子释放并增强 T 细胞增殖以及 NK 细胞活化和杀伤。在体内，我们的 CBL-B 抑制剂有效增强了抗 CD3 治疗小鼠的 T 细胞反应。我们在此通过预测和用药重要免疫肿瘤学靶点上的调控热点，证明了我们专有的 Smart Allostery™ 平台的验证，而该靶点迄今为止很难用药。
多路复用 CRISPR-Cas12a 基因编辑的健康供体来源的 NK 细胞疗法，增加颗粒酶 B 和脱颗粒，支持改进的连续杀伤
SK-OV-3 肿瘤细胞 +10 ng/mL TGF-β 随时间变化，E:T 比例为 5:1；100 小时后测量肿瘤细胞。代表来自 n=2 名捐赠者的 3 次独立实验。误差线为标准偏差。CISH，细胞因子诱导的含 SH2 蛋白；E:T，效应物：靶标；GzmB，颗粒酶 B；NK，自然杀伤细胞；TGFBR2，转化生长因子 β 受体 II。
一项具有同种异体干细胞移植的“现成” NK细胞的II期临床试验，可减少高风险患者的疾病复发
图1：从健康供体的leukopak中分离出的外周血单核细胞（PBMC），使用过表达膜结合的白细胞介素21（IL21）和CO0刺激分子4-1bbl的膜颗粒（PM21）膨胀了两周。*SAR445419（以前称为KDS-1001）是一种同种异体，冷冻保存，现成的NK NK细胞研究免疫疗法，该疗法源于使用PM21质膜膜颗粒表达膜结合IL-21和4-1BBL的PM21质膜NK细胞的离体扩展。所得扩展的NK细胞具有高度一致但独特的表型和功能谱，其特征是对转化细胞的有效炎症细胞因子的产生和细胞毒性。
EDIT-201 的临床前开发，这是一种多重 CRISPR-Cas12a 基因编辑的健康供体来源的 NK 细胞疗法，表现出更好的持久性
*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001；****p<0.0001，双向方差分析。10:1 E:T（A、D）和 100 小时（B、C、E、F）时随时间变化的球体分析。+10 ng/mL TGF-β（A、B、D、E）。+10 ng/mL TGF-β 和 10 mg/mL 曲妥珠单抗（C）。+10 ng/mL TGF-β 和 10 mg/mL 西妥昔单抗（F）。对 SK-OV-3 球体进行至少三次独立实验，实验对象为四个独特的 NK 细胞供体；对 PC-3 球体进行至少五次独立实验，实验对象为十个独特的 NK 细胞供体。
对肿瘤的制造CAR -NK -Chin J Cancer res
尽管嵌合抗原受体-T（CAR-T）细胞疗法在人类恶性肿瘤中具有显着的有效性，但它与众多挑战有关（1）。除了优化CAR-T细胞疗效外，自然杀手（NK）细胞的替代作用还引起了人们的重大兴趣。与CAR-T细胞相比，嵌合抗原受体受体（CAR-NK）细胞的独特特征突出了它们具有抗肿瘤功效的优势潜力（2）。除了CAR介导的细胞毒性外，NK细胞还可以通过NK特异性细胞毒性裂解具有下调或缺乏靶抗原的癌细胞，表明CAR-NK细胞是消除异质固体瘤的极好候选者（3）。CAR-NK治疗比CAR-T细胞疗法更安全，因为体内CAR-NK细胞的短期存活和独特的细胞因子谱（4）。“多个来源”是CAR-NK治疗的另一个重要优势。除了自体外周血衍生的NK细胞外，多个同种异体NK细胞进一步增强了制造现成的可能性
探索中国的关键采用障碍
接下来，我们进行了多元COX回归分析。分析表明，NKCAS以及年龄，M期和肿瘤等级都是GC患者的独立预后因素（表1）。接下来，我们通过整合临床因素和NKCAS风险模型来预测GC患者的短期和长期存活率（图在1年，3年和5年中，列图的AUC值分别为0.763、0.858和0.847（图5b-d）;随着时间的流逝，这些值仍然高于其他因素，因此表明该杂物图在预后方面具有良好的预测性能（图5e）。校准曲线表明预测值与观察值高度一致（图5f）。此外，DCA发现该列图在临床上比
2.7撒哈拉以南非洲
CôteD'Ivoire500 [4] 5 3.4 [1 X GHANA 6,314 [6] I 40.1 [4] X X GUINEA I AM X X X KENYA 30,500 [4 X利比里亚457 [11] 7 3.9 [12] 8我去马达加斯加15,500 [4] 4.8 [4 45.5 [4] 97.1 [4 80,000 [39] 3.1 [4 [24] X Sehechelles 2,560 [26] 12 12.7 [26] 76 [26] 1 [26] 1 x 13 x Sierra Leone 1,500 [4] 8.5 [1.5] 14.2 [4] 54.7 [28] 14 5 [29]，， [3我是zimbabwbean x x，x，CôteD'Ivoire500 [4] 5 3.4 [1 X GHANA 6,314 [6] I 40.1 [4] X X GUINEA I AM X X X KENYA 30,500 [4 X利比里亚457 [11] 7 3.9 [12] 8我去马达加斯加15,500 [4] 4.8 [4 45.5 [4] 97.1 [4 80,000 [39] 3.1 [4 [24] X Sehechelles 2,560 [26] 12 12.7 [26] 76 [26] 1 [26] 1 x 13 x Sierra Leone 1,500 [4] 8.5 [1.5] 14.2 [4] 54.7 [28] 14 5 [29]，， [3我是zimbabwbean x x，x，
引用Lugthart，G。（2018年3月27日）。造血干细胞移植后T和NK细胞免疫。取自https://hdl.handle.net/1
Love Al，Steen DM的Van，Van MM Loenen，Handway RS，Boer MD，Red Ro AH，Lugtart GJ，Van KC，Hiemstra PS，Hiemstra PS，犹太人I，Griffioen MD，Veelen PA，Veelen PA，Falkenburg JH，MH。PRAME特异性的Allo-HLA-Strict T细胞具有有效的反应性反应使用T-sell基因转移。Clin.Cancer Res。 2011; 17：5615-5625。 Lugthart G，Albon SJ，MG的奶酪，Meij P，湖泊AC，Amrolia PJ。 对称生成器 J.Mumunother。 2012; 35：42-5 Albon SJ，Mancao C，Gilmour K，Ship G，Rich I，Brewin J，Lugthart G，Wallace R，Amrolia PJ。 优化CD71 的方法 细胞疗法。 2013; 15：109-1 Rich I，Brewin J，Blugthart G，Albon SJ，Puls M，Amrolia PJ。 EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。 AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。Clin.Cancer Res。2011; 17：5615-5625。 Lugthart G，Albon SJ，MG的奶酪，Meij P，湖泊AC，Amrolia PJ。 对称生成器 J.Mumunother。 2012; 35：42-5 Albon SJ，Mancao C，Gilmour K，Ship G，Rich I，Brewin J，Lugthart G，Wallace R，Amrolia PJ。 优化CD71 的方法 细胞疗法。 2013; 15：109-1 Rich I，Brewin J，Blugthart G，Albon SJ，Puls M，Amrolia PJ。 EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。 AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。2011; 17：5615-5625。Lugthart G，Albon SJ，MG的奶酪，Meij P，湖泊AC，Amrolia PJ。对称生成器J.Mumunother。 2012; 35：42-5 Albon SJ，Mancao C，Gilmour K，Ship G，Rich I，Brewin J，Lugthart G，Wallace R，Amrolia PJ。 优化CD71 的方法 细胞疗法。 2013; 15：109-1 Rich I，Brewin J，Blugthart G，Albon SJ，Puls M，Amrolia PJ。 EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。 AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。J.Mumunother。2012; 35：42-5Albon SJ，Mancao C，Gilmour K，Ship G，Rich I，Brewin J，Lugthart G，Wallace R，Amrolia PJ。 优化CD71 的方法 细胞疗法。 2013; 15：109-1 Rich I，Brewin J，Blugthart G，Albon SJ，Puls M，Amrolia PJ。 EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。 AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。Albon SJ，Mancao C，Gilmour K，Ship G，Rich I，Brewin J，Lugthart G，Wallace R，Amrolia PJ。优化CD71细胞疗法。2013; 15：109-1Rich I，Brewin J，Blugthart G，Albon SJ，Puls M，Amrolia PJ。EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。 AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。EBV-规格的产生鼓膜对钙化抑制剂具有免疫适应性的抗性。AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3 lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。 他们将能够调和和调和长期股东： bio。 Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。 2015; 21：293-299。AM.J.Transplant 2013; 13：3244-3lugthart G，老热，MM的老家，CM，Holten MG，MH，Bredius RG，Van Tol MJ，Lankester AC。他们将能够调和和调和长期股东：bio。Lugthart G，Oomen MA，CM的Oomen，Ball LM，Brests D，WJ Cloud，Smiers FJ，FJ，Vermont CL，Bredius RG，Schilham MW，MW，Van To MJ，MJ，Lankester AC。2015; 21：293-299。2015; 21：293-299。Cidofovir对没有T细胞重构的干细胞移植受者中腺病毒血浆DNA水平的影响。biol.blood骨髓移植。Lugthart G，Van Ostaijen-Ten Dam MM，Van Tol MJ，Lankester AC，Schilham MW。CD56（DIM）CD16（ - ）NK细胞表型可以通过冷冻保存诱导。血液2015; 125：1842-1843。
双特异性免疫细胞参与者在体外增强了CD16+ NK细胞和巨噬细胞的抗癌活性，并消除了NK人源化NOG小鼠的癌症转移
抽象背景在肿瘤微环境中发现了多种类型的产生IL-17的免疫细胞。然而，它们在CD8 +肿瘤浸润淋巴细胞（TILS）的肿瘤进展和精疲力尽中的作用尚不清楚。确定17型免疫力在肿瘤中的作用的方法，我们研究了B16F10黑色素瘤的生长以及CD8 + TIL在IL17A - / - 小鼠中的耗尽，IL17A CRE R26 DTA小鼠，RORγT抑制剂造成的小鼠，或其相应的对照组。在B16F10的先天小鼠中进行了肿瘤特异性IL-17产生的T细胞的过继转移。抗CD4或抗Ly6g抗体分别用来耗尽CD4 + T细胞或CD11b + Gr-1 HI髓样细胞的体内。通过询问TCGA数据集，评估了人类癌症中17型免疫力与T细胞衰竭之间的相关性。结果CD4 + T细胞的耗竭促进了CD8 + T细胞的耗尽，而肿瘤中产生IL-17的CD8 + T（TC17）细胞的耗尽。与产生CD8 + T（TC1）细胞不同，肿瘤浸润的TC17细胞表现出CD103 + KLRG1-IL-7RαHIHI组织驻留的记忆样表型，并且细胞溶解度不佳。产生IL-17的肿瘤特异性T细胞的产物转移增加，而产生IL-17的细胞的耗竭降低，肿瘤中PD-1 HI TIM3 + TOX +终末耗尽的CD8 + T细胞的频率。封锁IL-17或RORγT途径抑制CD8 + T细胞的耗尽，还会延迟体内肿瘤的生长。封锁IL-17或RORγT途径抑制CD8 + T细胞的耗尽，还会延迟体内肿瘤的生长。与这些结果一致，人类TCGA分析揭示了多种癌症中17型和CD8 + T细胞耗尽签名基因集之间存在很强的正相关。结论IL-17产生的细胞促进了CD8 + T细胞的末端衰竭和体内肿瘤进展，可以通过IL-17或RORγT途径的阻断来逆转。这些发现揭示了IL-17-产生细胞作为促进CD8 + T细胞耗尽的肿瘤细胞的新作用，并提出17型免疫力作为癌症免疫疗法的有希望的靶标。