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肽抑制剂和荧光探针，用于选择性抑制和标记第XIIIA转谷氨酰胺酶
摘要：第XIIIA（FXIIIA）是一种主要治疗兴趣的转谷氨酰胺酶，这是由于其在血液凝结级联反应中的重要作用而发展抗凝剂。虽然已经报道了许多FXIIIA抑制剂，但由于缺乏代谢稳定性和对转谷氨酰胺酶2（TG2）的选择性低，因此未能达到临床评估。此外，用于研究FXIIIA活性和定位的化学工具非常有限。为了消除这些缺点，我们设计，合成和评估了21个新型FXIIIA抑制剂的库。亲电战争头，接头长度和疏水单位在小分子和肽支架上有所不同，以优化同工酶的选择性和效力。然后，将先前报道的FXIIIA抑制剂改编成具有若丹明B部分的探针设计，从而产生创新的KM93作为首次已知的溶液探针，旨在选择性地标记具有较高功能的活性FXIIIA（k Inact / k Inact / k I = 127,300 m-1-1-1-5-5-5）。探针KM93在骨髓巨噬细胞中促进了荧光显微镜研究，在细胞培养中标记具有较高效率和选择性的FXIIIA。这些新型抑制剂和探针的结构 - 活动趋势将有助于对活动，抑制和定位FXIIA的未来研究。
在人类血吸虫曼氏血吸虫的基因安全港进行定向插入和报告转基因活性
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2023 年 1 月 4 日发布。；https://doi.org/10.1101/2022.09.02.506379 doi：bioRxiv preprint
Plodia Pantry中有效的多动性Piggybac转基因...
虽然基于Piggybac转座子的转基因被广泛用于各种新兴模型生物，但其在黄油环和飞蛾中相对较低的换位速率却阻碍了其用于鳞翅目常规遗传转化的使用。在这里，我们测试了密码子优化的多活跃pigbac转座酶（hypbase）mRNA形式的适用性，以将转基因盒递送和整合到储藏室的基因组中。与供体质粒共同注射，成功整合了1.5 - 4.4 kb的表达盒，驱动荧光标记物EGFP EGFP，DSRED或EYFP与3XP3启动子中的眼睛和Glia中的EYFP。从72小时的胚胎和幼虫，pupae和携带隐性白眼突变的成年人中，可以从72小时的胚胎中检测到转基因在G 0中的体细胞整合和表达。总体而言，注射卵中有2.5％存活到具有镶嵌荧光的成年成年人中。随后的荧光G 0创建者脱离了3xp3 :: eGFP和3xp3 :: eyfp的单插入副本，并产生了稳定的同源线。表达3xp3 :: DSRED的G 0创始人的一小部分G 0的随机跨跨跨跨，产生了一个稳定的转基因线，以一个以上的转基因插入位点分离。我们讨论了如何使用hypbase在Plodia和其他飞蛾中产生稳定的转基因资源。
94 个 CRISPR-Cas9 表达 T0 转基因烟草株系的基因编辑谱揭示了目标基因的高嵌合编辑频率
摘要：嵌合编辑是基因编辑中经常报道的技术。为了评估嵌合编辑的普遍情况，我们构建了携带标记β-葡萄糖醛酸酶基因（gusA）的转基因烟草品系，并将CRISPR-Cas9编辑载体引入转基因烟草品系中以敲除gusA，然后研究T0代及后续代中gusA的编辑效率。编辑载体携带一个由花椰菜花叶病毒35S启动子驱动的Cas9基因，以及两个引导RNA，gRNA1和gRNA2，分别由拟南芥U6（AtU6）和U3（AtU3）启动子驱动。两个gRNA被设计用于敲除gusA编码区的一个42个核苷酸的片段。利用农杆菌介导的转化和潮霉素选择将编辑载体转化到含有gusA的烟草叶中。使用抗潮霉素的独立 T 0 转基因株系通过组织化学 GUS 测定、聚合酶链式反应 (PCR) 和 PCR 扩增子的下一代测序来评估 gusA 编辑效率。94 个 T 0 转基因株系的靶序列图谱显示，这些株系是由未经编辑的细胞再生而来的，随后进行了编辑，并在再生期间或之后在这些株系中产生了嵌合编辑细胞。其中两个株系的 42 bp 核苷酸对的靶片段被去除。详细分析表明，在 4.3% 和 77.7% 的 T 0 转基因株系中分别发现了 AtU6-gRNA1 位点和 AtU3-gRNA2 位点的靶突变。为了解决 T 0 株系中编辑效率极低的问题，我们从嵌合株系进行了第二轮芽诱导，以提高获得所有或大多数细胞都经过编辑的株系的成功率。 T 0 转基因系中的突变谱为理解利用组成型表达的 CRISPR-Cas9 和 gRNA 进行植物细胞中的基因编辑提供了宝贵的信息。
农作物抗生物性的转基因改良
摘要：生物限制因素包括病原真菌、病毒细菌、食草昆虫以及寄生线虫等，造成作物产量损失和品质下降，常规管理措施对这些生物限制因素的效果有限。转基因技术的进步为改良作物的生物抗性提供了直接而有方向性的途径。目前，通过异源表达外源基因和RNAi技术，已培育出上百个抗食草昆虫、病原病毒和真菌的转基因事件和数百个抗性品种，并获准种植和上市，显著减少了产量损失和品质下降。然而，通过过量表达内源基因和RNAi技术进行抗细菌和线虫的转基因改良的探索尚处于试验阶段。 RNAi 和 CRISPR/Cas 技术的最新进展为提高作物对病原细菌和植物寄生线虫以及其他生物限制的抵抗力开辟了可能性。
声音学习的神经分子和转基因模型
图 1 P. discolor 基因组的改进基因注释。UCSC 基因组浏览器截图展示了具有各种改进的基因座示例，包括注释 (A) 先前注释中缺失的基因；CNTNAP2 ，(B) 新外显子；FOXP2 ，(C) 改进的 UTR；THSD1 ，和 (D) 替代异构体；GABRP 。在每个面板中，顶部轨道（浅蓝色）表示 Jebb 等人 2020 年报告的先前注释，第二条轨道（黑色）报告当前研究的更新注释。蓝色和红色的附加轨道表示支持当前注释的实验证据。水平线表示预测或观察到的基因座。垂直线或粗矩形表示通过预测或功能数据识别的外显子。较细的矩形表示从第一个外显子（5'UTR）或最后一个外显子（3'UTR）延伸出来的非翻译区（UTR）。箭头表示编码区（外显子）之间的非编码序列（内含子）和基因组中的编码方向。每个基因下方标有以千碱基 (kb) 为单位的比例尺。
新颖的核糖开关通过口服小分子诱导剂调节哺乳动物中的AAV传递的转基因表达
HEK 293细胞用荧光素酶构建体，其中含有鸟嘌呤适体的核糖开关（左），腺嘌呤适体（中间）或TPP Aptamers（右）。转染的细胞用适体配体以指定的剂量处理。图显示了开关对不同适体粘合剂的剂量反应。con 1是没有核糖开关盒的控制构建体。
泛变异 mRNA-LNP T 细胞疫苗可保护 HLA 转基因小鼠在感染 SARS-CoV-2 Beta 后免于死亡
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2022 年 9 月 30 日发布。；https://doi.org/10.1101/2022.09.23.509206 doi：bioRxiv preprint
输电年度规划报告 - Transgrid
本文件中的信息应结合 AEMO 发布的《电力机会声明》和《综合系统规划》以及其他相关监管咨询文件来阅读。它并不声称包含 AEMO、潜在投资者、NEM 的注册参与者或潜在参与者或任何其他个人或相关方在做出决策时可能需要的所有信息。在准备本文件时，Transgrid 不可能也不打算考虑阅读或使用本文件的每个人或组织的投资目标、财务状况和特殊需求。
输电年度规划报告 - Transgrid
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