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Exploring CRISPR-Cas9
CRISPR（成簇的规律间隔短回文重复序列）的发现彻底改变了我们对遗传机制的理解。1987 年，CRISPR 在大肠杆菌中被发现，其独特的结构（29 个核苷酸重复片段与 32 个核苷酸可变序列交错）激发了研究人员的想象力。随着研究的深入，科学家发现了多种短重复回文序列，长度从 24 到 40 个核苷酸不等，并被 20 到 58 个核苷酸的可变序列所划分。最初人们认为它有助于 DNA 修复和复制子分离，2005 年的一项里程碑式发现表明，重复元件之间的许多序列来自噬菌体和质粒——细菌和古细菌基因组的入侵者。这一发现将 CRISPR 重新定义为能够识别和对抗外来遗传物质的原核免疫系统。 CRISPR/Cas9 系统通过利用高精度核酸酶在特定基因组位置诱导双链断裂，彻底改变了基因编辑。然后通过易错非同源末端连接 (NHEJ) 或无错同源定向修复 (HDR) 等细胞过程修复这些断裂，从而实现精确的基因修饰。此类定向编辑为遗传疾病提供了潜在的治疗方法，并有望用于修饰植物、动物甚至昆虫。由 CRISPR 推动的基因探索时代为生物学进步开辟了前所未有的机遇。在我们探索这一新领域时，必须负责任地使用这些强大的工具，在考虑其伦理影响的同时，接受它们提供的深远可能性。
CRISPR 阵列：其机制综述
摘要 成簇的规律间隔的短回文重复序列 (CRISPR) 的字面定义是成簇的规律间隔的短回文重复序列，是细菌的一种适应性免疫系统，使它们能够检测和破坏病毒的 DNA。事实上，CRISPR 是原核细胞的一种防御机制，它诱导对外来遗传内容的抵抗力，例如在质粒或噬菌体中发现的遗传内容。参与这一机制的蛋白质被称为 CRISPR 相关蛋白 (CAS)，它们能够以特定方式搜索、切割并最终转化噬菌体 DNA。CAS 是一种具有酶功能的蛋白质，由于它在 DNA 序列和 CRISPR 阵列中起着特殊的作用，因此可以称为核酸酶。CRISPR 技术允许改变 DNA，从而能够修改和改变任何生物体的任何基因，比所有以前的方法都更准确、更好。在本综述中，我们介绍了 CRISPR 在基因组编辑中的机制和优势，简要回顾了 CRISPR 在基因治疗探索中的应用以及 CRISPR 通过不同修复机制产生不同类型突变的能力。关键词：CRISPR、CAS 蛋白、间隔物、Proto-SPACER、直接重复引文：Mohamadi S、Zaker Bostanabad S、Mirnejad R。CRISPR 阵列：对其机制的综述。J Appl Biotechnol Rep. 2020；7(2):81-86。doi: 10.30491/JABR.2020.109380。
CRISPR 基因组编辑的最佳解决方案 - Bioneer Corporation
CRISPR（成簇的规律间隔的短回文重复序列）- Cas9 基因组编辑工具源自微生物组的适应性免疫系统，可切割目标 DNA 区域并允许 DNA 自然修复。它也被称为“RGENs”（RNA 引导的工程化核酸酶），因为它由 gRNA（向导 RNA）和 Cas9 核酸酶组成。该技术为精确操作基因组提供了更简单、更有效的方法。gRNA 由 crRNA 和 tracrRNA 组成。crRNA 具有 20 nt 的靶标互补序列，而 tracrRNA 具有 Cas9 结合所需的识别序列（图 1）。
Cas9 核酸酶 GFP NLS 蛋白
产品描述 成簇的规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)/Cas9 系统是基因组编辑中最新的 RNA 引导核酸内切酶工具，可实现非常具体的基因组破坏和替换。Cas9 核酸酶 NLS 与 GFP 的融合可实现转染的视觉确认以及随后的 Cas9 从细胞中清除的验证。Cas9 核酸酶-GFP 也可用于 FACS 应用和筛选。Cas9 核酸酶-GFP NLS 在蛋白质的 C 端包含 SV40 T 抗原核定位序列 (NLS)。
EIF2A CRISPR/CAS9 KO质粒（M）：SC-432849
定期间隔间隔的短篇小学重复序列（CRISPR）和CRISPR相关蛋白（CAS9）系统是ARCHEA和细菌用于降解异物（4,6）的适应性免疫反应防御机制（4,6）。该机制可以用于其他功能，包括用于哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除（KO）（KO）（1,2,3,5）。crispr/cas9 ko质粒产物通过利用从基因组尺度CRISPR敲除（Gecko）V2库中得出的指导RNA（GRNA）序列来鉴定和裂解特定基因，该序列在广泛研究所的张实验室中开发的基因组规模CRISPR敲除（Gecko）V2库（3,5）。
WAP CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m): sc-423691
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制，古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能，包括哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列，能够识别和切割特定基因 (3,5)。
ABCD1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h): sc-405301
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制，古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能，包括哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列，能够识别和切割特定基因 (3,5)。
NSUN2 CRISPR/CAS9 KO质粒（H）：SC-405097
定期间隔间隔的短篇小学重复序列（CRISPR）和CRISPR相关蛋白（CAS9）系统是ARCHEA和细菌用于降解异物（4,6）的适应性免疫反应防御机制（4,6）。该机制可以用于其他功能，包括用于哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除（KO）（KO）（1,2,3,5）。crispr/cas9 ko质粒产物通过利用从基因组尺度CRISPR敲除（Gecko）V2库中得出的指导RNA（GRNA）序列来鉴定和裂解特定基因，该序列在广泛研究所的张实验室中开发的基因组规模CRISPR敲除（Gecko）V2库（3,5）。
fcεriαCRISPR/CAS9 KO质粒（H）：SC-416948
定期间隔间隔的短篇小学重复序列（CRISPR）和CRISPR相关蛋白（CAS9）系统是ARCHEA和细菌用于降解异物（4,6）的适应性免疫反应防御机制（4,6）。该机制可以用于其他功能，包括用于哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除（KO）（KO）（1,2,3,5）。crispr/cas9 ko质粒产物通过利用从基因组尺度CRISPR敲除（Gecko）V2库中得出的指导RNA（GRNA）序列来鉴定和裂解特定基因，该序列在广泛研究所的张实验室中开发的基因组规模CRISPR敲除（Gecko）V2库（3,5）。