简介:抗甲状腺过氧化物酶自身抗体(TPO)是您ROID腺体自身免疫性疾病的重要诊断工具。但是,由于方法之间的差异,TPO结果并不总是可比的。在这里,我们旨在研究两种现代实验室测量方法之间的差异:电化学发光(ECLIA)和化学发光微粒(CMIA)免疫测定。方法:对两种方法进行了234种血清样品:Cobas-E601(ECLIA)和Alinity I(CMIA)。tpo结果在统计上进行了定量和定性的比较(根据ECLIA/ CMIA参考范围,将结果编码为正/阴性。 div>结果:与制造商的主张相比,两种方法的精度都是可以接受的。两种方法之间存在非常强但不令人满意的相关性(Pearson r = 0.85)。传球回归显示线性(cusum p <0.01)和不可接受的定量关系存在明显的危险:截距-7.61,斜率1.10。此外,对总体和医学决策水平的平坦平淡 - 阿尔特曼情节的视觉分析证实了缺乏定量协议。对于定性分析,方法之间的一致性率为218/234(93.1%)。根据评估者一致性测试:加权Cohenκ= 0.805,该协议被认为是好的。结论:COBAS-E601(ECLIA)和Alinity I(CMIA)之间的定性一致性很好,因此,这两种方法可用于初步测试涉嫌患有甲状腺自身免疫性疾病的患者。然而,由于定量一致,这两种方法不应互换用于监测,因为结果可能会误导医生和患者,这可能导致医疗错误。关键字:CMIA,ECLIA,方法比较,甲状腺过氧化物酶抗体,TPO
场梯度(见公式 1),这可以通过尖锐的电极几何形状产生。这样,亚微米颗粒(例如聚苯乙烯珠和病毒颗粒)也可以通过 DEP 分离或固定 [4,5]。尽管该现象背后的机制仍然是近期研究和讨论的主题 [6–10],但蛋白质 [11,12]、酶分子 [13] 甚至小染料分子 [14] 也可以通过 DEP 操纵。由于在纳米电极上的固定无需标记并且在几秒内完成 [15,16],DEP 可能成为生产生物传感器的一种首选方法。此外,蛋白质分子可以单个固定,正如对平面纳米电极尖端和 R-藻红蛋白 (RPE) 所展示的那样 [12]。首次尝试生产用于单分子实验的蛋白质纳米阵列时,将牛血清白蛋白 (BSA) 固定在一个由 9 个电极组成的小纳米电极阵列上,电极尖端直径为 30 nm。根据施加的场强,蛋白质分子被永久或暂时固定,但尚未证明可以分离为单个分子 [15]。为了将单个酶或蛋白质分子固定在阵列上,需要直径小于颗粒直径的尖锐电极尖端 [16, 17]。通过反应离子刻蚀在硅基电极阵列的标准互补金属氧化物半导体生产工艺方面取得的最新进展使足够小的电极尖端的生产标准化成为可能:生产出数千个锥形电极的阵列,其最小直径约为 1.5 nm,通过化学机械抛光可以调整到更大的直径 [16]。对于生物传感器、芯片实验室设备和单酶分子实验,不仅要确保可靠的捕获,还要确保所涉及酶的高残留活性。原则上,估算了固定化的BSA 的量[18],并显示了抗RPE 抗体和辣根过氧化物酶 (HRP) 的活性[13, 19]。但无法对固定物的活性进行绝对量化。为了评估DEP 固定化酶阵列的适用性,本研究对仅通过DEP 永久固定的酶分子活性进行了定量测定。选择HRP 作为模型酶。HRP 是单亚基、44 kDa 血红素蛋白,具有已知的三维结构和催化途径以及复杂的糖基化模式[20, 21]。这种酶已被深入研究了几个世纪,由于其可用性、高稳定性以及在比色和荧光测定中的高活性,已成为诊断试剂盒和免疫测定的标准化学品[22]。出于类似的原因,它是单酶分子实验的原理验证中很受欢迎的酶[23–28],并且已经证明在纳米电泳后具有活性。
jiaxin 1,Basabdev maity 1*,Tadaomi Furuta 1*,Tizheng Pan 1,Takafumi Ueno 1,2* 1生命科学与技术学院日本226-8501 2 226-8501,生命科学技术系,自治系统材料研究中心(ASMAT),综合研究所,科学研究所,东京4259 Nagatsuta-Co,Yagawa,Yagawa 226-KU maity.b.aaa@m.titech.ac.jp,fururuta@.ac.ac.ac.ac.jp,ueno.t.b33@m.isct.jp
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图1。血红蛋白的过氧化物酶类似活性:开发用于H 2 O 2分解的增强子。(a)HRP依赖性amplex红色H 2 O 2分析的示意图。(b)ROS-GLO H 2 O 2分析的示意图(HRP-独立)。(c)Amplex红色H 2 O 2分析中HTPEB的剂量依赖性响应曲线。(d)ROS-GLO H 2 O 2在没有HRP的ROS-GLO H 2 O 2分析中的剂量依赖性响应曲线(E)ROS-GLO分析中HTPEB的剂量依赖性响应曲线,其HRP与Amplex红色测定法中使用的HRP相同。(f)ros-glo H 2 O 2分析中HRP的剂量依赖性响应曲线,有或没有HTPEB。(g)反应时间依赖性响应曲线在ROS-GLO H 2 O 2分析中,有或没有HTPEB。(h至j)各种内源性过氧化物酶家族(Hb,CAT,GPX)的剂量依赖性响应曲线,在有或没有HTPEB的情况下,在Ros-Glo H 2 O 2分析中。(k)KDS衍生物的化学结构,KDS12008、17和25。(l)用Hb的ROS-GLO H 2 O 2分析中HTPEB,KDS12008、17和25的剂量依赖性响应曲线。(m)在ROS-GLO H 2 O 2分析中,Kds12008、17、25和丙酮酸钠的剂量依赖性响应曲线,以评估直接H 2 O 2清除。(n)ITC分析描述了HB和KDS12025之间的结合相互作用。(O)结合模式和KDS12025和HTPEB的结合能(ΔG结合)与对接模拟提出的HB。
III类过氧化物酶(POD)在各种发育过程中以及对生物和非生物胁迫的响应中发挥关键功能。然而,III类POD基因在小麦种子休眠(SD)和发芽中的特定作用仍然难以捉摸。在这里,我们根据转录组数据和表达分析确定了一个名为Taper12-3a的小麦III类POD基因。taper12-3a分别通过SD采集和释放显示出降低和增加的表达趋势,表明与SD和发芽有显着关联。它在小麦种子中高度表达,并位于内质网和细胞质中。发芽测试表明,锥度12-3a在第411条背景下用甲烷硫酸乙酯(EMS)的小麦突变体进行了负调节的SD,以及在转基因拟南芥和水稻线以及小麦突变体中呈阳性介导的发芽。进一步的研究表明,锥形12-3a通过与gibberellin和脱甲酸生物合成,分解代谢和转基因水稻种子中的信号通路来调节SD和发芽。这些发现不仅为调节小麦SD和发芽的锥形12-3a的未来功能分析提供了新的见解,而且还有助于理解这些过程中涉及的复杂调节机制。
z-DNA和G-四链体DNA在生物膜基质中很丰富,并且使用与鼠植入物相关的骨髓炎模型在体外和体内生长的生物膜中通常存在于网络类似结构中。在体外,在生物膜生长期间没有NaCl或机械摇动的情况下,或在EDNA或外多糖产生的细菌菌株中没有形成结构。因此,我们推断出EDNA和多糖相互作用,当通过盐稳定时,在机械应力下导致非典型的DNA结构,我们证实了来自感染植入物的生物膜中的G-四链体DNA和Z-DNA也存在。哺乳动物DNase I缺乏针对Z-DNA和G-四链体DNA的活性,而微球菌核酸酶可能会降解G-四链体DNA,而S1 Aspergillus核酸酶可能会降解Z-DNA。因此,源自金黄色葡萄球菌的微球菌核酸酶可能是分散生物膜在葡萄球菌中的关键。除了其结构作用外,我们首次表明,生物膜中的埃德纳在Hemin存在下形成具有过氧化物酶样活性的DNAZyme。虽然过氧化物酶是针对病原体防御的一部分,但我们现在表明生物膜可以在细胞外基质中具有内在的过氧化物酶活性。
摘要:由卵质病原体葡萄球菌引起的柔软霉菌是葡萄藤的毁灭性疾病。viticola分泌一系列RXLR效应子,以增强毒力。这些效应子之一PVRXLR131据报道与葡萄(Vitis Vinifera)BRI1激酶抑制剂(VVBKI1)相互作用。BKI1在尼古蒂亚纳·本塔米亚娜和拟南芥中保存。但是,VVBKI1在植物免疫中的作用尚不清楚。在这里,我们发现VVBKI1在葡萄藤和本塞米亚氏菌中的瞬时表达分别提高了对葡萄球菌和phytophthora capsici的耐药性。此外,VVBKI1在拟南芥中的异位表达可以增加其对由透明质球拟南芥引起的降低霉菌的抵抗力。进一步的实验表明,VVBKI1与细胞质抗坏血酸过氧化物酶VVAPX1(一种ROS扫除蛋白)相互作用。VVAPX1在葡萄和本塔米亚乳杆菌中的瞬时表达促进了其对葡萄球菌的耐药性和辣椒菌。此外,VVAPX1转基因拟南芥对拟南芥的抗性更具耐药性。此外,VVBKI1和VVAPX1转基因拟南芥均显示出抗坏血酸过氧化物酶活性的升高和疾病的增强。总而言之,我们的发现表明APX活性与对Oomycetes的抗性之间存在正相关,并且该调节网络在V. Vinifera,N。Benthamiana和A. thaliana中得到了保存。
过氧化氢(H 2 O 2)是生物医学诊断中的重要分析物。在人类生理学中,H 2 O 2充当氧化应激的生物标志物,这可能与诸如阿尔茨海默氏病,帕金森氏病,心肌梗死和癌症等医学疾病有关。[1,2]此外,基于氧化酶的生物传感器检测用于检测葡萄糖,尿酸和神经递质等分析物,依赖于监测在酶促反应过程中产生的H 2 O 2的浓度。[3,4]用于检测H 2 O 2的生物传感器主要在光学和 /或电化学技术上运行,并采用过氧化物酶辣根过氧化物酶(HRP)。尽管基于HRP的生物传感器对H 2 O 2检测具有很高的选择性和敏感性,但诸如高成本,短期货架寿命和环境不稳定性之类的因素限制了其更广泛应用的性能。[2]这导致了许多研究,其中探索了用于生物敏化应用的替代性非酶实体,称为过氧化物酶模拟物,它们具有用于H 2 O 2检测的固有性过氧样催化活性。[5,6]迄今为止,已知多种材料,例如贵金属纳米颗粒,金属氧化物纳米颗粒,基于碳的纳米材料和过渡金属络合物,都模仿过氧化物酶活性。[5,7]
摘要:多氯联苯(PCB)引起重大健康和生态障碍,是持续的有机污染物,但仍在世界各地恢复。微生物PCB生物转化是一种用于污染的有前途的技术,但所涉及的分子机制仍然被误解。木质氨基利因酶被怀疑参与许多PCB转化,但它们的评估仍然很少。为了进一步清单微生物通过其木氨基利性酶转化PCB的能力,我们研究了氧化酶和过氧化物酶在从历史悠久的PCB污染位点分离的一组微生物中的作用。Among 29 isolated fungi and 17 bacteria, this work reports for the first time the PCB-transforming capabilities from fungi affiliated to Didymella , Dothiora , Ilyonectria , Naganishia , Rhodoturula , Solicoccozyma , Thelebolus and Truncatella genera and bacteria affiliated to Peribacillus frigotolerans ,壁画peribacillus,macillus mycoides,蜡状芽孢杆菌,丰尼芽孢杆菌,伪刺杆菌,假单胞菌冠状动脉法,埃尔维尼亚蚜虫和se肉杆菌静脉。以相同的方式,这是对Dothiora maculans Specie和cladosporium属的真菌分离株的第一份报告,分别显示了氧化酶(推定的漆酶)和过氧化物酶活性,在PCBS的存在下(分别超过4倍和20圈),可增强。基于这些结果,怀疑观察到的活动参与PCB转换。
