XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search Systemphosphorylation
下一代Farnesylsylansferase抑制剂KO-2806，阻止多个节点的致癌信号传导，以增强KRAS G12的抗肿瘤功效
图3。NCI-H2122 KRAS G12C NSCLC CDX模型中KO-2806和Adagrasib结合使用的信号传导抑制。（a）在多个节点上抑制信号传导的示意图与FTI，KO-2806和KRAS G12C抑制剂Adagrasib的组合。NCI-H2122肿瘤，并使用（b）Western印迹和（c）免疫组织化学（IHC）分析。（b）KO-2806与AdagrasiB的组合导致HER3蛋白表达的大幅度降低，增强了对MAPK信号传导（ERK1/2和P90 RSK磷酸化）的抑制作用，增加了MTOR活性的抑制（S6和4EBP1磷酸化），以及对单个Cell Cycer Cyprant（RB Pranscratib）的抑制。（c）KO-2806与Adagrasib的组合导致细胞增殖标记Ki67的降低，而与单药adagrasib相比，凋亡标记裂解的caspase 3（CC3）的增加。此外，与单药Adagrasib治疗相比，HER3水平降低了，而HER2和EGFR水平的组合处理大多是没有变化的。halo用于IHC图像分析，并用n = 3量化H得分。
通过反相蛋白阵列 (RPPA) 分析肺腺癌的代谢蛋白质组，强调线粒体是治疗目标
尽管针对致癌驱动因素和免疫检查点抑制剂的疗法取得了成功，但肺癌仍然是全球癌症相关死亡的主要原因。尽管代谢酶为治疗提供了额外的靶点，但肺腺癌的精确代谢蛋白质组尚不清楚，阻碍了其临床转化。在此，我们使用反相蛋白阵列量化 128 个肿瘤和配对的肺腺癌非肿瘤邻近组织中糖酵解酶、丙酮酸氧化、脂肪酸代谢、氧化磷酸化、抗氧化反应和蛋白质氧化损伤的变化，以分析代谢蛋白质组。脂肪酸氧化、氧化磷酸化和抗氧化反应的线粒体蛋白的稳态水平是肺腺癌患者生存和/或疾病复发的独立预测因子。接下来，我们讨论了 ATPase 抑制因子 1（氧化磷酸化的生理抑制剂，是疾病复发的独立预测因子）的过度表达预防转移性疾病的机制。我们强调，IF1 过度表达会促进肺腺癌细胞更脆弱、侵袭性更低的表型。最后，作为概念验证，我们在患有肺腺癌的小鼠中研究了针对脂肪酸同化或氧化与氧化磷酸化抑制剂联合治疗的治疗潜力。结果表明，与顺铂治疗相比，这种治疗方法显著延长了小鼠的寿命，并为小鼠提供了更好的福利，支持将线粒体活动作为肺腺癌患者治疗的目标。
第三届激酶靶向药物研发峰会
• Lumit 免疫测定细胞系统是一种均质生物发光免疫测定，它将免疫检测与酶亚基互补相结合，可直接在细胞裂解物中测量目标分析物 • 蛋白质磷酸化检测：Lumit 免疫测定能够快速、无需清洗地检测激酶信号通路（如 RAS-MAPK/ERK）中的磷酸化，以进行抑制剂评估和分析 • 靶向蛋白质降解 (TPD)：Lumit 免疫测定能够有效分析多种细胞系中 PROTAC 介导的蛋白质降解，支持靶向激酶降解 • 高通量筛选 (HTS)：Lumit 免疫测定针对可扩展的 HTS 进行了优化，能够有效筛选 384 孔和 1536 孔格式的激酶途径调节剂
针对 S6K1 的化合物可阻碍脂肪量扩张并减轻饮食引起的肝脂肪变性
简介 肝脏和脂肪组织控制着体内脂质稳态。长期食用含有大量脂肪的饮食时，这些器官的相互功能障碍可能会加剧与肥胖相关的代谢紊乱 (1)。其中，血脂异常（包括高甘油三酯血症和高胆固醇血症）是肥胖相关代谢失衡的共同特征，可能引发一系列并发症，即所谓的代谢综合征 (2)。此外，肝脏脂肪变性是脂质稳态紊乱的关键致病因素，可加速动脉粥样硬化，并使血脂异常处于肥胖与心血管和代谢疾病风险的交汇点 (3–5)。因此，一种能降低脂肪量膨胀并改善肝脏脂质处理、预防肝脂肪变性和血脂异常的药理学化合物将为治疗与肥胖表型相关的代谢综合征带来重大进展。核糖体蛋白 S6 激酶 1 (S6K1) 在哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物 1 (mTORC1) 下游起作用，后者控制对激素和有丝分裂原的反应，还协调细胞对营养物质和能量输入的反应 (6)。S6K1 的激活由一系列有序的构象变化和磷酸化步骤介导，其中 mTORC1 对 T389 的磷酸化为磷酸肌醇依赖性激酶 1 (PDK1) 创造了一个对接位点，从而允许 T229 磷酸化 (7)。
polo样激酶1抑制剂
转移性结直肠癌是一种令人沮丧的疾病，因为尽管对化学疗法和靶向疗法[抗血管内皮生长因子（抗VEGF）（抗VEGF）和抗皮肤生长因子受体（抗EGFR）]，但耐药性迅速出现并变得普遍。因此，二线疗法和贝伐单抗的二线治疗在一线治疗方面进展的RAS突变转移性结直肠癌患者的功效差，根据先前的bevacizumab曝光（1,1,2,2），反应率在10％至15％，无进展生存率（PFSS）范围为6至7个月。化学疗法和贝伐单抗耐药性的机制尚不清楚，因此没有用于晚期结直肠癌的定制二线治疗策略。The key players linked to chemotherapy resistance in advanced colorectal cancer include oxidative phosphorylation (OXPHOS), a main metabolic program in cancer (3), glucose-6-phosphate dehydrogenase, a critical enzyme in the antioxidant-generating pentose phosphate pathway (PPP) (4), and polo-like kinase-1 (PLK1) (5), an enzyme主要与细胞周期调节有关。这些关键的肿瘤途径如何参与获得的抗药性
Susan Cornell-Kennon1，Matthew Hakar1，Hayley ...
蛋白激酶的活性在癌症中促进肿瘤发生和恶性转化的致癌信号通路的异常激活中起关键作用。akt已被证明在癌细胞中既被上调又突变，从而使其成为癌细胞生长和进展的驱动力。抑制AKT激活和活性都是有效发现癌症药物的有吸引力的靶标。 我们开发了全长不活动AKT1，AKT2和AKT3的连续均匀测定。 用磺胺氧氧化荧光团（SOX）修饰的肽底物利用螯合增强的荧光，以实时对Akt活性进行实时读数。 首先，评估了30,000个现有的含Sox序列的子集，以发现Akt1可以磷酸化，选择天然底物，测定鲁棒性和AKT特异性的序列。 鉴定出与生理相关的肽底物，并用于开发动力学测定以监测AKT1激活和底物磷酸化。 与DOPS/DOPC和磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸（PIP3）一起孵育，该磷酸（PIP3）模拟质膜，从而使Pleckstrin同源（pH）结构域允许Akt的akt结构域，使Akt结合，导致构象变化，导致构象的变化，使得tyr-333343333333333333.43433333434333433343333333333.4333333333333343334333。 PDK1和MK2用于完全激活。 在启动测定时，主动Akt磷酸化了传感器肽，并使用荧光强度读数（EX/EM 360/485 nm）以动力学模式读取所得信号（在每个井中启用进度曲线）。抑制AKT激活和活性都是有效发现癌症药物的有吸引力的靶标。我们开发了全长不活动AKT1，AKT2和AKT3的连续均匀测定。用磺胺氧氧化荧光团（SOX）修饰的肽底物利用螯合增强的荧光，以实时对Akt活性进行实时读数。首先，评估了30,000个现有的含Sox序列的子集，以发现Akt1可以磷酸化，选择天然底物，测定鲁棒性和AKT特异性的序列。鉴定出与生理相关的肽底物，并用于开发动力学测定以监测AKT1激活和底物磷酸化。与DOPS/DOPC和磷脂酰肌醇3,4,5-三磷酸（PIP3）一起孵育，该磷酸（PIP3）模拟质膜，从而使Pleckstrin同源（pH）结构域允许Akt的akt结构域，使Akt结合，导致构象变化，导致构象的变化，使得tyr-333343333333333333.43433333434333433343333333333.4333333333333343334333。 PDK1和MK2用于完全激活。在启动测定时，主动Akt磷酸化了传感器肽，并使用荧光强度读数（EX/EM 360/485 nm）以动力学模式读取所得信号（在每个井中启用进度曲线）。利用AQT0076，DOPS/DOPC，PIP3，PDK1和MK2开发了一种用于Akt激活和底物磷酸化的新颖测定法。与经典AKT抑制剂和变构抑制剂的混合在一起，我们可以通过剂量反应测量来证明抑制活性AKT活性和非活性AKT激活。结论：开发了一种稳健的均质测定，以同时随着时间的推移对Akt激活和底物磷酸化进行监测。通过连续测定格式，可以同时捕获稳态速率和速率加速度作为抑制剂浓度的函数，从而可以精确地定量单个实验格式的Akt抑制剂。因此，该测定法可以用于药物发现中，以评估Akt激活和随后的底物磷酸化的潜在抑制剂，以防止癌细胞的生长和进展。
基于 CUL4B 的 E3 泛素连接酶通过募集磷酸化特异性 DCAF 来调节有丝分裂和大脑发育
旁系同源物 CUL 4 A 和 CUL 4 B 组装 cullin-RING E 3 泛素连接酶 (CRL) 复合物，调节多种染色质相关的细胞功能。尽管它们结构相似，但我们发现 CUL 4 B 独特的 N 端延伸在有丝分裂期间被大量磷酸化，而磷酸化模式在导致 X 连锁智力残疾 (XLID) 的 CUL 4 BP 50 L 突变中受到干扰。表型表征和突变分析表明，CUL 4 B 磷酸化是有效进行有丝分裂、控制纺锤体定位和皮质张力所必需的。虽然 CUL 4 B 磷酸化触发染色质排斥，但它促进与肌动蛋白调节剂和两个以前未被认识的 CUL 4 B 特异性底物受体 (DCAF) LIS 1 和 WDR 1 的结合。事实上，共免疫沉淀实验和生化分析表明 LIS 1 和 WDR 1 与 DDB 1 相互作用，并且 CUL 4 B 的磷酸化 N 端结构域增强了它们的结合。最后，人类前脑类器官模型表明 CUL 4 B 是形成与前脑分化开始相关的稳定脑室结构所必需的。总之，我们的研究发现了以前未被发现的与有丝分裂和大脑发育相关的 DCAF，它们通过磷酸化依赖机制特异性结合 CUL 4 B，但不结合 CUL 4 BP 50 L 患者突变体。
EGFR-TKI组合疗法的临床进展用于EGFR突变的NSCLC：叙事评论
对NSCLC的肿瘤发生和进展的深入研究表明，大多数NSCLC患者的表皮生长因子受体（EGFR）的突变（5）。 egfr是一种跨膜酪氨酸激酶蛋白，正在成为NSCLC治疗的具有里程碑意义的靶标。 eGFR被受体过表达激活，这是各种癌症组织中的常见现象。 egfr的过表达，据报道它与乳房，肺，卵巢，宫颈，膀胱，食管，脑，头部和颈部癌症的侵略性和较差的临床结局有关（6-10）。 Additionally, EGFR activation and phosphorylation by the binding of the ligands, such as epidermal growth factor (EGF) (11), further activate several downstream signaling pathways, such as the rat sarcoma protein (Ras)/rapidly accelerated fibrosarcoma protein (Raf)/mitogen-activated protein kinases (MAPK), phosphatidylinositol-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素（MTOR），Janus激酶（JAK）/信号传感器和转录（STAT）途径激活剂（12）的靶标，在调节多个蜂窝过程中起着重要作用，在调节多个蜂窝过程中起着重要作用，包括繁殖，生存，生存，和apoptosis。对NSCLC的肿瘤发生和进展的深入研究表明，大多数NSCLC患者的表皮生长因子受体（EGFR）的突变（5）。egfr是一种跨膜酪氨酸激酶蛋白，正在成为NSCLC治疗的具有里程碑意义的靶标。eGFR被受体过表达激活，这是各种癌症组织中的常见现象。egfr的过表达，据报道它与乳房，肺，卵巢，宫颈，膀胱，食管，脑，头部和颈部癌症的侵略性和较差的临床结局有关（6-10）。Additionally, EGFR activation and phosphorylation by the binding of the ligands, such as epidermal growth factor (EGF) (11), further activate several downstream signaling pathways, such as the rat sarcoma protein (Ras)/rapidly accelerated fibrosarcoma protein (Raf)/mitogen-activated protein kinases (MAPK), phosphatidylinositol-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素（MTOR），Janus激酶（JAK）/信号传感器和转录（STAT）途径激活剂（12）的靶标，在调节多个蜂窝过程中起着重要作用，在调节多个蜂窝过程中起着重要作用，包括繁殖，生存，生存，和apoptosis。
kinomics数组平台
激化组是对细胞或组织裂解物中激酶信号传导的研究。激素学可以帮助阐明因治疗而改变的细胞信号传导途径（即药物或状况变化），或用于比较不同的表型（即增殖与非增生性）。我们的pamstation kinomic阵列平台测量了最多196个酪氨酸或144个丝氨酸/苏氨酸激酶底物的磷酸化，这些丝氨酸/苏氨酸激酶底物印在Pamchip微阵列上。动力学和稳态的单个肽磷酸化的变化是用FITC磷酸化抗体成像的，并且信号在Bionavigator中进行了定量。然后，将改变肽的改变的肽列表通过使用Kinexus phosphonet等工具，以及使用Genego Metacore的高级途径分析和网络建模来输出并分析可能的上游激酶。
新型造血祖细胞激酶1抑制剂KHK-6增强T细胞激活
抑制负调节剂在免疫细胞中的功能作用是开发免疫疗法的有效方法。 丝氨酸/苏氨酸激酶造血祖细胞激酶1（HPK1）参与T细胞受体信号传导途径，通过在Ser-376时通过其磷酸化诱导SLP-76的降解，从而减少了免疫反应，从而减轻了T细胞的活化。 有趣的是，一些研究表明，HPK1激酶活性的遗传消融或药理抑制通过增强T细胞激活和细胞因子产生来改善对CANS的免疫反应。因此，HPK1可能是基于T细胞的癌症免疫疗法的有前途的可药物目标。 为了增加针对癌细胞的免疫反应，我们设计和合成了KHK-6，并评估了其细胞活性以抑制HPK1并增强T细胞活化。 KHK-6抑制了HPK1激酶活性，IC 50值为20 nm，CD3/CD28诱导的SLP-76磷酸化在Ser-376上，KHK-6显着增强了CD3/CD228诱导的细胞因子的产生；表达CD69，CD25和HLA-DR标记的CD4 +和CD8 + T细胞的比例； SKOV3和A549细胞的T细胞介导的杀伤活性。 总而言之，KHK-6是一种新型的ATP竞争性HPK1抑制剂，可阻断SLP-76的HPK1下流流的磷酸化，从而增强了T细胞的功能激活。 总而言之，我们的研究表明KHK-6在抑制HPK1抑制免疫疗法的药物发现中的有用性。抑制负调节剂在免疫细胞中的功能作用是开发免疫疗法的有效方法。丝氨酸/苏氨酸激酶造血祖细胞激酶1（HPK1）参与T细胞受体信号传导途径，通过在Ser-376时通过其磷酸化诱导SLP-76的降解，从而减少了免疫反应，从而减轻了T细胞的活化。有趣的是，一些研究表明，HPK1激酶活性的遗传消融或药理抑制通过增强T细胞激活和细胞因子产生来改善对CANS的免疫反应。因此，HPK1可能是基于T细胞的癌症免疫疗法的有前途的可药物目标。为了增加针对癌细胞的免疫反应，我们设计和合成了KHK-6，并评估了其细胞活性以抑制HPK1并增强T细胞活化。KHK-6抑制了HPK1激酶活性，IC 50值为20 nm，CD3/CD28诱导的SLP-76磷酸化在Ser-376上，KHK-6显着增强了CD3/CD228诱导的细胞因子的产生；表达CD69，CD25和HLA-DR标记的CD4 +和CD8 + T细胞的比例； SKOV3和A549细胞的T细胞介导的杀伤活性。总而言之，KHK-6是一种新型的ATP竞争性HPK1抑制剂，可阻断SLP-76的HPK1下流流的磷酸化，从而增强了T细胞的功能激活。总而言之，我们的研究表明KHK-6在抑制HPK1抑制免疫疗法的药物发现中的有用性。