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通过AMP编码质粒引起的免疫力无法增加对欧洲海鲈鱼侵害诺达病毒的保护
抗菌肽（AMP）是先天免疫系统的有效臂，可以直接杀死病原体并诱导免疫调节。在海洋水产养殖中，欧洲鲈鱼（Dicentrarchus labrax L.）是最繁荣的物种之一，但对诺达病毒（NNV）非常容易受到影响，该物种在幼虫和少年阶段产生高死亡率。因此，我们旨在评估AMP是否在鲈鱼中发挥免疫调节性和/或NNV预防作用。To do this, plasmids encoding the sea bass AMPs dicentracin (pDIC), beta- defensin (pDB1), hepcidin (pHAMP2) or NK-lysin (pNKL) were generated and intramuscularly injected into sea bass juveniles to evaluate their immunomodulatory and anti-NNV roles.海低音肌肉转录AMP，并产生循环水平的增加，并增加抗菌活性。免疫相关的基因分析表明，在注射部位，炎症反应的激活和嗜中性粒细胞的募集。然而，AMP编码的质粒，即Phamp2，通过增加鱼类死亡率对NNV疾病的负面影响。总而言之，编码AMP的质粒显示出对欧洲鲈鱼的免疫刺激作用，但不能提高对NNV的抗性。
Janelia Atalanta质粒为果蝇提供了一个简单有效的CRISPR/CAS9介导的同源性修复平台
。cc-by 4.0未经同行评审获得的未获得的国际许可证是作者/筹款人，他已授予Biorxiv的许可证，以永久显示预印本。它是此预印本的版权持有人（该版本发布于2024年5月11日。; https：//doi.org/10.1101/2023.06.17.545412 doi：biorxiv preprint
污染与腺相关病毒基因治疗后肝组织中存在的制造质粒和破坏的载体基因组
a）pa的肝活检显示出明显的外围和小叶infmmaɵon以及界面infmmaɵon（*）;存在许多带有气囊的肝细胞（**）。A中的盒子在B中被放大。b）气囊肝细胞的高亮片highlighɵngngngngngngngngngngngngngng。c）rna原位杂化剂检测到smn1基因在球囊核细胞核中显示出强烈的红色信号，该肝细胞被严重的免疫细胞隔开（*）。盒在D中被放大。d）气囊肝细胞的高亮纤维显示了核中的posiɵve信号，并在肝细胞和免疫细胞（*）的肝细胞胞质中具有轻度至中度的，标点的信号。免疫组织化学div>肝脏中的炎症表现为div>通过免疫组织化学CD4（E），CD8（F）和CD20（G）显示。bar，A和C，400微米，B，60微米，D，100微米，E-G，300微米。
尺寸减小的质粒中的 Cas9 切割序列可增强原代人类 T 细胞中 CAR 的非病毒基因组靶向性
荆瑞平，焦佩玲，陈建军，孟晓燕博士，吴晓，段永刚博士，尚凯，钱琳，孙杰教授 浙江大学医学院附属第一医院细胞生物学系和骨髓移植中心 杭州 310058，中国 电子邮件：sunj4@zju.edu.cn 荆瑞平，焦佩玲，陈建军，孟晓燕博士，吴晓，段永刚博士，尚凯，钱琳，孙杰教授 浙江大学血液学研究所 & 浙江省干细胞与免疫治疗工程实验室 杭州 310058，中国 荆瑞平，焦佩玲，陈建军，孟晓燕博士，吴晓，段永刚博士，尚凯，孙杰教授 浙江省系统与精准医学实验室 浙江大学医学中心 杭州 310058，中国 黄勇，高晓燕教授浙江省西湖大学生命科学学院杭州 310058 刘菁，尹文教授浙江大学生物医学工程与仪器科学学院生物医学工程教育部重点实验室杭州 310058
在Escherichia col
一种理论模型，该模型试图考虑到革兰氏阴性细菌中的周质 / - 乳糖确定的青霉素抗性水平（22）。The relevant parameters are the kinetic characteristics (Ki,m Vmax, and amount of enzyme produced) of the /)-lactamase, a perme- ability parameter (C) for the diffusion of the antibiotic across the outer membrane, and the concentration of the ,8-lactam antibiotic in the periplasmic space (Sp), specifically the concen- tration, SP, necessary for lethal inhibition内膜中的位点（一个或多个青霉素结合蛋白[17]）。使用这种方法Zimmermann和Rosselet（22）成功地解释了TEM，B-乳糖果酶（在这种情况下，由R Plasmid RTEM编码）赋予Escherichia coli K-12的Ampicilin抗性，以及该enzyme diseme concememe conceporance conceporance的无能为力。对于阴茎lin g，该方法失败了。作者考虑了这样的解释，即在微型抑制浓度（MIC）检测过程中，外膜的屏障功能发生了变化（22）。但是，他们对SP的估计也可能是错误的。此处报告的实验为模型提供了不同的测试。通过使用对几种底物的亲和力改变的突变Fi-内酰胺酶，我们避免了估算SP的必要性，而是比较了由突变体直接确定的青霉素耐药性与由野生型酶确定的抗性。
质粒
工程细菌基因组或克隆为细菌人造染色体（BAC）的外源DNA取决于辅助质粒的使用，这些质粒的用法将所需的工具暂时输送到细菌中以进行修饰。完成了一项挑剔的作用后，需要固化辅助质粒。为了使这种有效的质粒通过条件扩增子维持或携带反选择标记。在这里，我们描述了可以通过化学诱导或抑制来维持或治愈的新条件质粒。我们的方法基于携带Ori6Kγ起源的质粒的依赖性，其复制起源于蛋白质的存在。基于ORI6Kγ的质粒是严格调控的条件构建体，但通常需要特殊的大肠杆菌菌株才能进行操作。为了避免这种情况，我们将π蛋白表达放在共表达的条件阻遏物的控制下。通过给药或去除化学物质来调节质粒的维护与迄今为止应用的任何其他条件扩增子完全兼容。在这里，我们描述了诱导位点特定重新组合的方法为例。但是，可以使用相同的策略来为基因组编辑方法（例如λred重组酶或CRISPR/CAS成分）的任何其他瞬时成分构建合适的辅助质粒。
通过 Frederick RAS 计划靶向 KRAS 的进展
- 超过 3,000 个单独的 RAS 和 RAS 通路质粒 - 180 个基因中每个基因至少有 1 个请求 - 21 个完整的 RAS 通路试剂盒（每个试剂盒含 360 个质粒） - 23 个完整的 RAS 突变体试剂盒（每个试剂盒含 61 个质粒）
T.Yau High School Science Award 仅用于2024丘成桐中学 ...
2.1 Construction of recombinant plasmids ...........................................................................................9 2.2 Protein expression and purification .............................................................................................. 10 2.3 Electrophoretic characterization of proteins ............................................................................... 11 2.4 Electrical conversion ........................................................................................................................ 11 2.5 Flow cytometry sorting ................................................................................................................... 11 2.6 ELISA reader screening .................................................................................................................. 12 3.Directed evolution of GFP catenane ........................................................................................ 12
AccuTool™ sgRNA-(GFP) 合成 (dRGEN)
DNA 引导的 RNA 引导内切酶 (dRGEN) 是高效、经济且方便的基因组编辑实验工具。AccuTool™ dRGEN 可识别长度为 23 bp 并以两个鸟嘌呤 (GG) 结尾的目标序列。定制 sgRNA 表达质粒可与 Cas9 表达质粒（人类密码子优化，WT/Nickase/Sniper 形式可用）一起使用。质粒可以通过任何标准方法（如脂质转染、纳米颗粒或电穿孔）递送到您感兴趣的细胞中，以实现高效递送。sgRNA-GFP 表达质粒是通过将 GFP 构建体插入现有 sgRNA 质粒中构建的。sgRNA-GFP 表达质粒可让您通过荧光显微镜确认细胞中的活性水平。 AccuTool™ dRGEN 是一种定制设计的 sgRNA，以 sgRNA 表达质粒或 sgRNA-GFP 表达质粒的形式提供。应用
凝胶电泳实验室生物科学学院
质粒是一些细菌所具有的圆形DNA，并且对染色体是额外的。质粒比染色体DNA（通常为几千个碱基对）小得多，并且取决于单个质粒，可能存在于每个细胞的一个拷贝到每个细胞的数百份。质粒也很特别，因为它们可以在细胞之间转移，因此质粒上存在的基因可以通过细菌种群传播。这种传播的经典例子是抗生素耐药性。