肝癌在恶性肿瘤中发病率居第六位,死亡率居第三位,癌症相关死亡居第四位(1)。肝细胞癌(HCC)占原发性肝癌的75%–85%(2)。2020年HCC的发病率高于其他恶性肿瘤,世界卫生组织(WHO)估计,到2030年将有超过100万人死于HCC(3)。HCC具有高度异质性,病因复杂。该肿瘤的主要原因包括代谢紊乱、慢性肝炎病毒感染、吸烟和过量饮酒(4,5)。由于HCC早期临床症状不明显,发病机制不明,患者诊断时通常已是晚期HCC或已有远处转移,预后不佳(6),因此HCC的治疗具有挑战性。
BLG 是牛奶中的主要过敏原,约 3% 的婴儿和幼儿对牛奶过敏 [1],而全脂牛奶制成的辅食可能会引发严重疾病 [2]。从牛奶中去除 BLG 可降低其致敏性,并提高其作为幼儿食品的潜力。迄今为止,降低牛奶混合物致敏性的主要方法是深度变性蛋白质。实际上,我们谈论的是肽的混合物,但这可能导致形成新的致敏表位。一种现代替代方法是创建具有 BLG 基因敲除的动物的方法[3,4]。在工业化奶牛品种上进行此类工作尤其重要,因为它可以让您创造特定特征,而不会影响其他具有经济意义的特征和生产力。此前,人们结合了转基因、基因敲除和 SCNT,以及 TALEN 和原核微注射。所有这些都显示出足够的有效性。 Crispr/Cas9 基因编辑技术的快速发展 [5, 6] 使我们能够在用于生产的牛品种中有效引入 BLG 基因突变。在本文中,我们介绍了开发和创建用于引入双链
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