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木制物种中的转换系统（B. rapa，...
农杆菌介导的转化是一种将外源基因转化为植物的广泛使用的方法。烟草（Nicotiana tabacum L.）是遗传转化中的模型植物。下面描述了将烟草用作模型植物的几个原因如下：（1）烟草叶片很容易被器官发生再生（Constantin等，1977）。（2）当植物需要从实验室转移到温室状况时，烟草植物很容易采用环境的变化（Chandra等，2010； Jube＆Borthakur，2007）。良好采用环境会提高再生率。（3）烟草植物的生物量产量很高，因此可以轻松生产重组蛋白来用于分子种植（Twyman等，2003）。如今，烟草的分子遗传学和基因组图进行了充分的研究，几乎完成了（Jube＆Borthakur，2007）。烟草中遗传转化的研究和应用为其他植物的转化系统提供了前景和参考。
brargl1在调节木制乳头螺栓和开花
gibberellin（GA）在控制胸前Rapa茎发育中起着重要作用。作为GA信号转导的基本负调节剂，Della蛋白可能对茎发育产生重大影响。然而，该调节基础的调节机制尚不清楚。在这项研究中，我们使用BrapdS（植物脉络化酶）和Brargl1（关键DELLA蛋白）基因中的CRISPR/CAS9基因编辑系统报告了高效和遗传的诱变。我们观察到由于GRAS结构域中的两个氨基酸而引起的Brargl1功能丧失突变。Brargl1突变体的花芽分化和螺栓固定时间明显进展。在这些突变体中，Ga-调控蛋白（Bragasa6），开花相关基因（BrasoC1，Bralfy），膨胀蛋白（BRAEXPA11）和木聚糖蛋白（BraxTH3）基因的表达也显着上调。brargl1-过表达的植物显示了对比的表型。brargl1突变体对GA信号传导更敏感。brargl1与Brasoc1相互作用，而GA 3处理后的相互作用强度降低。此外，BRARGL1抑制了BrasoC1对Braxth3和Bralfy基因的转录激活能力，但是GA 3的存在增强了BrasoC1的激活能力，这表明Brargl1-Brasoc1模块调节B. Rapa通过GA信号转移的B. Rapa的开花。因此，我们假设brargl1被降解，并且在GA 3存在下释放了Brasoc1，从而促进了braxth3和bralfy的表达，从而诱导了Rapa的茎发育。此外，Brargl1-M突变体促进了花蕾的分化，而不会影响茎的质量。因此，brargl1可以作为早期成熟品种分子繁殖的宝贵靶标。
木制rapa孤儿基因在很大程度上影响可溶性糖代谢
摘要孤儿基因（OG S）是特定分类群独有的基因，在原代新陈代谢中起着至关重要的作用。然而，对于我们先前的研究中鉴定出的铜管rapa og s（brog s）的功能意义知之甚少。为了研究其生物学功能，我们在拟南芥中开发了43个基因的Brog过表达（Brog OE）突变库，并评估了植物的表型变异。我们发现43个Brog OE突变体中有19个表现出突变体表型，而42个显示出可变的糖含量。选择了一个突变体Brog1 OE，具有显着升高的果糖，葡萄糖和总糖含量，但蔗糖含量降低，以进行深度分析。Brog1 OE显示出拟南芥合成酶基因（ATSUS）的表达和活性降低；但是，转化酶的活性没有变化。In contrast, silencing of two copies of BrOG1 in B. rapa, BraA08002322 ( BrOG1A ) and BraSca000221 ( BrOG1B ), by the use of an ef fi cient CRISPR/Cas9 system of Chinese cabbage ( B. rapa ssp.campestris）由于brsus1b，brsus3的上调，果糖，葡萄糖和总可溶性糖含量降低，并且特定于编辑的Brog1转基因线中的BRSUS5基因。此外，我们观察到蔗糖含量增加和Brog1突变体中的SUS活性，转化酶的活性保持不变。因此，Brog1可能以SUS依赖性方式影响了可溶性糖代谢。这是研究Brog S在可溶性糖代谢方面的功能的第一份报告，并强化了OG S是营养代谢的宝贵资源的观念。
正宗胸罩Rapa黄酮合酶1的基因编辑1产生二氢类黄酮含量的中国卷心菜
黄酮是绿色卷心菜的主要类黄酮类（Brassica Rapa subsp。pekinensis）。B. rapa基因组拥有七个黄酮醇合酶基因（BRFLS），但在功能上没有表征它们。在这里，转录组分析显示四个BRFL在中国卷心菜中主要表达。中，只有BRFLS1显示出主要的FLS活性和其他黄酮3β-羟化酶（F3H）活性，而BRFLS2和BRFLS3.1仅表现出边际F3H活性。我们使用CRISPR/CAS9介导的基因组编辑生成了BRFLS1-KNOCKOUT（BRFLS1- KO）中国卷心菜，并在T 1代中获得了没有脱靶突变的无靶向突变的无抗纯合植物，这些植物进一步前进到T 2生成t显示正常表型的T 2。UPLC-ESI-QTOF-MS分析表明，T 2植物中黄酮醇糖苷急剧降低，而二氢黄酮醇糖苷同时累积到与降低黄酮醇水平相对应的水平。定量PCR分析表明，BRFLS1-KO植物中苯基丙型和类黄酮生物合成途径的早期步骤上调。在符合BRFLS1-KO植物中，总酚类酚含量略有增强，这表明在Cabyylypopanios和Flavavonys中具有负面作用。表型调查显示，BRFLS1-KO中国卷心菜表现出正常的头部形成和生殖表型，但观察到其头部的细微形态变化。此外，与对照组相比，它们的幼苗对渗透压敏感，这表明黄酮醇在b.rapa幼苗中对渗透胁迫耐受性起积极作用。在这项研究中，我们表明CRISPR/CAS9介导的BRFLS1 -KO成功地产生了具有独特代谢性状的中国白菜的宝贵育种资源，并且CRISPR/CAS9可以有效地应用于功能性的中国白菜繁殖中。
CRISPR/Cas9 介导的 AGAMOUS 样基因编辑导致大白菜 (Brassica rapa ssp. pekinensis) 出现晚熟表型
摘要：由于春季气温突变，大白菜这种食用叶菜类蔬菜会因抽薹而失去其商业价值，即从营养生长转变为生殖生长的现象。在本研究中，我们应用成簇的规律间隔的短回文重复序列/(CRISPR) 相关系统 9 (CRISPR/Cas9) 技术来分析 AGAMOUS 样基因。我们利用 CRISPR/Cas9 介导的大白菜转化技术对与抽薹和开花相关的 AGL19 和 AGL24 基因进行了功能分析。我们创建了脱靶概率低的单向导 RNA (sgRNA) 序列来构建基因编辑载体。进行农杆菌介导的转化，并使用分子生物技术方法分析了试验性的 E 0 AGL 编辑株系。与自交系“CT001”相比，两个 AGL19 编辑系（AGL19 基因靶序列中存在核苷酸序列突变）和四个 AGL24 编辑系（AGL24 基因靶序列中存在核苷酸序列突变）表现出特别晚的抽薹。使用芽授粉的世代进展获得了无 T-DNA 的 E 1 AGL 编辑系，其也表现出晚抽薹。AGL 蛋白功能的丧失是由于 AGL19 和 AGL24 基因中发生了插入/缺失突变，从而导致提前终止密码子。此外，移码突变导致结构变化并在 AGL19 和 AGL24 蛋白中引入提前终止密码子。我们的结果表明，CRISPR/Cas9 介导的 AGAMOUS 类基因编辑会导致晚熟表型，并且 CRISPR/Cas9 是一种用于分析大白菜 (Brassica rapa ssp. pekinensis) 基因功能的有用技术。
与化学施肥相比，真菌 - 细菌生物膜，堆肥和LOF的潜力在支持Pakcoi（Brassica rapa rapa var chinensis）
Abltrak。过多的化肥可以增加碳排放量并加速土地退化。要克服这一挑战，需要缓解努力，例如使用生物膜形成的微生物减少蒸发和家庭废物作为堆肥和液体有机肥料，以提高土壤降解的土壤质量。这项研究旨在确定生物膜生物肥料，堆肥和液体有机肥料（LOF）对Pakcoi植物生长的影响。This study used a three-factor (fertilizer type, inorganic fertilizer doses, and organic fertilizer doses) with a Complete Group Randomized Design with 14 treatments (N0: Control, N1: 100 % NPK + 0 Organic fertilizer, NB 2: 75% NPK + 25% BFBF, NB 3: 50% NPK + 50% BFBF, NB 4: 25 % NPK + 75% BFBF，NB 5：0％NPK + 100％BFBF，NP 2：75％NPK + 25％LOF，NP 3：50％NPK + 50％LOF，NP 4：25％NPK + 75％LOF，NP 5：0 25％NPK + 75％堆肥，NR 5：0％NPK + 100％堆肥）。这项研究中的观察参数包括植物高度，叶子数量和宽度。数据分析是使用ANOVA进行的，并继续使用DMRT进行。结果表明，与对照相比，Pakchoi植物的50％NPK + 50％生物肥料治疗可以增加植物的身高，叶片宽度和新鲜重量，而100％LOF的叶子数量比对照组高16,69％。这些发现通过减少有助于碳排放的化肥，同时采用可持续的农业实践，利用生物膜和有机材料来提高生产力，同时维持生态系统健康，从而支持气候变化策略。
来自种间甘蓝rapa衍生物的新型定量性状基因座改善了甘蓝纳普斯napus
POD破碎是农业相关性的一种特征，可确保植物在其本地环境中取代种子，并在几种宽阔的农作物中受到了驯化和选择的驯化和选择。然而，豆荚破碎会导致菜籽（甘蓝纳普斯L.）作物的显着屈服降低。衍生自B. rapa/b的种间繁殖线BC95042。Napus Cross表现出改善的POD破碎阻力（比易碎的B. Napus品种高达12倍）。为了揭示新品种中的遗传基础并改善了POD破碎的耐药性，我们分析了F 2和F 2：3衍生的种群，来自BC95042和Advanced Breeding系列的交叉，BC95041，并用15,498 Dartseq标记的基因分型。通过基因组扫描，间隔和包容性的复合间隔映射分析，我们确定了与POD破裂能量相关的七个定量性状基因座（QTL），用于POD破碎的抗性或POD强度的度量，并且它们位于A02，A02，A03，A03，A05，A09，A09，A09和C01 Chromosomes上。两种亲本线都为豆荚碎片抗性贡献了等位基因。我们确定了添加剂X添加剂，添加性优势和优势X优势X在A01/C01，A01/C01，A03/A07，A07/C03，A03，A03/C03和C01/C02染色体之间的相互作用之间的五对X添加剂，添加剂优势和优势X优势相互作用。QTL对A03/ A07和A01/ C01的影响处于排斥阶段。比较映射确定了几种候选基因（AG，ABI3，BP1，CEL6，FIL，FIL，FUL，GA2OX2，IND，LATE，LEUNIG，MAGL15，RPL，QRT2，RGA，RGA，SPT，SPT和TCP10），基于QTL和QTL的QTL和上毒QTL相互作用，以实现pod shatter pod shatter shatter shatter shatter shatter shatter shatter shatters。BNAA09G05500D受到在A02，A03和A09上检测到的三个QTL靠近（富有成果的）同源物BNAA03G39820D和BNAAA09G05500D。着眼于FUL，我们研究了推定的图案，序列变体和其同源物的进化速率，373个重新设备的B. napus napus感兴趣。
以自噬为靶点，联合使用氯喹和雷帕霉素，是治疗高分化脂肪肉瘤的新型有效方法
摘要。背景/目的：脂肪肉瘤是一种源自脂肪组织的软组织肉瘤。它在软组织肉瘤中比较常见。抗疟药氯喹 (CQ) 可抑制自噬并诱导癌细胞凋亡。雷帕霉素 (RAPA) 是 mTOR 的抑制剂。RAPA 和 CQ 的组合是自噬的强效抑制剂。之前，我们表明 RAPA 和 CQ 的组合对去分化脂肪肉瘤患者来源的原位异种移植 (PDOX) 小鼠模型有效。在本研究中，我们研究了 RAPA 和 CQ 的组合在体外靶向高分化脂肪肉瘤 (WDLS) 细胞系中的自噬的功效机制。材料和方法：使用人类 WDLS 细胞系 93T449。使用 WST-8 试验检测 RAPA 和 CQ 的细胞毒性。使用蛋白质印迹法检测自噬体组成部分微管相关蛋白轻链 3-II (LC3-II)。还对 LC3-II 进行了免疫染色以进行自噬体分析。使用 TUNEL 试验检测凋亡细胞，并在三个随机选择的显微镜视野中计数凋亡阳性细胞以进行统计验证。结果：RAPA 单独和 CQ 单独抑制细胞活力
安全指南供应商风险管理生命周期
1 ERO企业由NERC和六个区域实体组成。2 The ERO Enterprise Compliance Guidance Policy is located on the NERC website at: http://www.nerc.com/pa/comp/Resources/ResourcesDL/Compliance_Guidance_Policy_FINAL_Board_Accepted_Nov_5_2015.pdf 3 Implementation Guidance provides a means for Registered Entities to develop examples or approaches to illustrate how Registered Entities could comply具有由行业审查并由ERO企业认可的标准。CMEP实践指南与实施指南有所不同，因为它们解决了ERO Enterprise CMEP员工如何执行合规性监控和执行活动，而不是如何实施标准。4个混合资源，其资源作为个人（或单独）资源运行也可以称为共同确定的资源。5 https://www.nerc.com/pa/rapa/pages/bes.aspx5 https://www.nerc.com/pa/rapa/pages/bes.aspx
Hirschfeldia incana 的基因组序列，一种提高光合作用利用效率的十字花科新模型
光合作用是维持植物和人类生命的关键过程。提高农作物的光合能力是增加其产量的一种有吸引力的方法。虽然光合作用的核心机制在 C3 植物中高度保守，但这些机制非常灵活，允许光合特性存在相当大的多样性。这种多样性之一是在高辐照度下保持较高的光合光能利用效率，正如在少数特殊的 C3 物种中发现的那样。十字花科的一种植物 Hirschfeldia incana 就是这样一种特殊的物种，由于它易于生长，因此是研究这种性状的遗传和生理基础的绝佳模型。在这里，我们展示了 H. incana 的参考基因组，并证实了其较高的光合光能利用效率。尽管 H. incana 是十字花科中迄今为止光合速率最高的，但与其密切相关的 Brassica rapa 和 Brassica nigra 的光饱和同化率也很高。H. incana 基因组已通过大规模染色体重排、物种特异性转座子活性和重复基因的差异保留与 B. rapa 和 B. nigra 基因组广泛分化。H. incana 、B. rapa 和 B. nigra 中参与光合作用和/或光保护的重复基因在拷贝数和基因表达之间表现出正相关，这为这些物种高光合效率的潜在机制提供了线索。我们的研究表明，H. incana 基因组是研究高光合光能利用效率的进化和提高作物物种光合速率的宝贵资源。