aptiva乳糜泻IgG试剂盒包含两个不同的颗粒群。一个涂有重组组织转基谷氨酰胺酶抗原的颗粒和一个涂有合成脱膜麦醇溶蛋白肽的颗粒,另一种涂有山羊抗人IgG抗体的额外的第三个颗粒作为对照验证。Aptiva系统稀释了患者样本1:23,然后将等分的稀释患者样品和试剂组合成比色杯。混合物在37°C下孵育。在洗涤周期后,将共轭抗人IgG抗体添加到颗粒中,并在37°C下孵育该混合物。在另一个洗涤周期中除去过量的共轭物,并将颗粒重新悬浮在系统流体中。系统生成多个图像以识别和计算两个唯一的分析物粒子,并确定每个粒子上的共轭量。第三个粒子涂有山羊抗人IgG抗体,是在试剂中存在的,作为对照在样品中标记低浓度IgG的对照,作为测定验证步骤。每个分析物的中位荧光强度(MFI)与与人IgG结合的共轭物的浓度成正比,这与与相应粒子区域结合的IgG抗体浓度成正比。系统使用每个区域的至少50个颗粒的MFI。颗粒的身份取决于颗粒的独特特征。Aptiva腹腔疾病IgG试剂中的每个分析物被分配为预定义的批次特定主曲线。v实质性等价信息:谓词设备名称:分析物特定的主曲线存储在试剂墨盒RFID标签上(射频标识)。基于运行校准器获得的结果(单独提供),该系统创建了特定于仪器的工作曲线。工作曲线从每个样品获得的MFI值中计算每个分析物的荧光单元(流感)。基于每个分析物的定义截止值,每个样品的测试结果均为“正”或“阴性”,每种测定的FLU的测试值,即DGP IgG和TTG IgG。
该过程的原理QMS毒素分析是一种均匀增强的浊度构象免疫测定法。 该测定基于样品中的药物与涂覆在微颗粒上的药物之间的竞争,用于毒素抗体试剂的抗体结合位点。 在存在抗杂霉素抗体试剂的情况下,在样品中没有任何相互竞争的药物的情况下,在存在抗杂霉素抗体试剂的情况下迅速凝集了毒素的微粒试剂。 吸光度变化的速率是光度测量的。 添加含有毒素的样品时,凝集反应被部分抑制,从而降低了吸光度变化的速度。 可以在最低的毒素浓度下以最大的凝集速率获得浓度依赖性的经典凝集抑制曲线,而在最高毒素浓度下,可以以最低的毒素浓度和最低的凝集速率获得。该过程的原理QMS毒素分析是一种均匀增强的浊度构象免疫测定法。该测定基于样品中的药物与涂覆在微颗粒上的药物之间的竞争,用于毒素抗体试剂的抗体结合位点。在存在抗杂霉素抗体试剂的情况下,在样品中没有任何相互竞争的药物的情况下,在存在抗杂霉素抗体试剂的情况下迅速凝集了毒素的微粒试剂。吸光度变化的速率是光度测量的。添加含有毒素的样品时,凝集反应被部分抑制,从而降低了吸光度变化的速度。可以在最低的毒素浓度下以最大的凝集速率获得浓度依赖性的经典凝集抑制曲线,而在最高毒素浓度下,可以以最低的毒素浓度和最低的凝集速率获得。
嘌呤和嘧啶的气相色谱分析已经完成,但是它们的挥发性和热稳定性不足以从气相色谱柱中洗脱出来。在气相色谱分析之前,需要用合适的试剂进行衍生化。使用的试剂例如双(三甲基硅基)三氟乙酰胺[12-15],五氟苯甲酰氯,五氟苯磺酰氯或七氟丁酸酐[16],N,N-叔丁基二甲基硅基三氟乙酰胺[13]和N-(叔丁基二甲基硅基)N-甲基三氟乙酰胺[14]。虽然用不同的硅基试剂进行衍生化虽然有效,但需要非水介质进行衍生化。简单且廉价的试剂可以在水相中使用,可能对嘌呤和嘧啶的气相色谱测定有价值。氯甲酸乙酯已被用作水-有机相中的衍生试剂,用于气相色谱测定胺和氨基酸 [17]。Husek 报道了氯甲酸酯作为气相色谱通用试剂的应用 [18],Simek 和 Husek 报道了烷基氯甲酸酯作为酯化试剂的应用 [19]。已经使用氯甲酸酯对多种氨基化合物进行了气相色谱分析 [20]。
提取方法在裂解后,将预填充的试剂墨盒加载在Magbinder®Fit24上,并选择了MB FIT24™CFDNA试剂盒的预加载提取脚本并在仪器上运行。所有样品均在Magbinder®拟合24仪器上运行,同时将磁杆一致工作,以在试剂盒的不同井中拾取,转移和释放磁性颗粒,以在末端在电流管中提供纯化的CFDNA。cfDNA在100 µl的体积中洗脱,使用Magbinder®拟合24的协议时间约为55分钟,从弹药放置到CFDNA洗脱。
预期的使用DNA/RNA Shield™拭子收集旨在用于通过基于核酸的测定法分析的临床标本的收集和运输。DNA/RNA Shield™试剂已预先填充到小瓶中,可确保在没有制冷或专业设备的环境温度下运输/存储期间的样品稳定性。可以延长收集的标本(-20/-80°C)长时间。该试剂与市售的核酸提取试剂盒和自动工作流程兼容。在DNA/RNA Shield™收集管中收集并存储的标本适合与合法市场的分子诊断设备一起使用。可以使用标准的临床实验室操作程序来处理存储和运输的DNA/RNA SHIELD™试剂中的临床标本,以检测具有分子扩增测定法的核酸。核酸扩增技术的主要目的是有助于诊断传染病,因此应保留运输和储存过程中临床样本的核酸完整性。DNA/RNA Shield™培养基培养基灭活并防止病毒感染性,因此DNA/RNA Shield™不打算用于基于培养的技术。每个单元由包含两个组件的软件包组成:
在这个实验中,我们尝试使用 CRISPR-Cas9 技术和 LNP 来修改 SRD5A2 基因。SRD5A2 编码酶 ' 类固醇 5 α还原酶 2 ',这种酶将睾酮转化为更有效的双氢睾酮。这种酶影响男性性发育,包括毛发生长和外生殖器的形成,因此编辑这种基因将有助于治疗秃顶。为了实现这些目标,我们首先确认了具有 CRISPR 成分 DNA 形式的 Cas9-sgRNA 复合物的活性。然后,我们通过设置不同的对照来对 SRD5A2 基因编辑进行研究——我们通过制作 CRISPR 成分的 mRNA 形式、使用假尿苷和封端试剂以及不使用这种试剂来检查基因编辑的效率,据说这些试剂可以稳定 mRNA 表达。
暴露于传感器时的细胞凋亡。caspase-3/7分析(Cellevent™caspase-3/7绿色检测试剂,热泡器)由荧光底物组成,该基材具有与DNA结合染料共轭的四个氨基酸肽(DEVD)。在凋亡细胞中caspase-3/7的激活时,Devd肽被裂解,产生6-氨基硫化蛋白,染料与DNA结合,产生明亮的荧光反应。响应的强度与caspase-3/7活性的量成正比。该测定法对caspase-3/7激活高度特异性,可用于通过活细胞荧光成像监测其激活。由于裂解的试剂标记了caspase 3/7阳性细胞的核,因此污渍可用于评估
寡核苷酸和基于序列的试剂 PCR 引物 本研究 从 IDT ssODN 合成 Ittiprasert 等人,2019 年和本研究 Ultramer DNA Oligos, 从 IDT 合成向导 RNA Ittiprasert 等人,2019 年和本研究 从 IDT 合成 化学品、酶和其他试剂 Alt-R® CRISPR-Sp HiFi Cas9 酶 V3 Integrated DNA Technologies 1081060 Alt-R® CRISPR-AsCas12a 酶 V3 Integrated DNA Technologies 1081068 DNAzol® ES 试剂 Molecular Research Center DN127 RNAzol® RT 试剂 Molecular Research Center RN190 Opti-MEM FisherScientific Gibco™ 31985062 DMEM FisherScientific 88364 胎牛血清 FisherScientific Gibco™ 26140079 100x 青霉素-链霉素-两性霉素 B FisherScientific SV30079.01 NucleoSpin® 凝胶和 PCR 纯化 Takara 740609