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方法:本研究从Gracilaria coronopifolia中经过富集培养、初筛和复筛获得菌株GDSX-4,并初步通过形态学和16SrDNA对其进行表征。对菌株GDSX-4纯培养物进一步进行细菌基因组测序组装和生物信息学分析。具体来说,利用同源组簇(COG)注释、CAZy(碳水化合物活性酶)数据库注释和CAZyme基因组簇(CGCs)注释来识别潜在的多糖降解功能。在不同条件下评估酶活性,包括底物、温度、pH和金属离子的存在。使用薄层色谱法(TLC)和电喷雾电离质谱法(ESI-MS)分析水解产物。
方法 在本系统评价和荟萃分析中,我们搜索了 MEDLINE、Embase、Cochrane 图书馆、Web of Science 核心合集、全球医学索引、谷歌学术、ClinicalTrials.gov 和世卫组织国际临床试验注册平台,查找从 2005 年 1 月 1 日至 2022 年 10 月 14 日期间发表和未发表的关于耐药结核病靶向 NGS 的报告,并在 2024 年 2 月 13 日之前更新了我们在 Embase 和 Google Scholar 中的搜索内容。符合系统评价条件的研究描述了使用原始样本、参考菌株集合或从疑似或确诊结核病患者中培养的分离株来预测结核分枝杆菌感染耐药性的靶向 NGS 方法。我们的搜索对研究类型或语言没有限制,但只筛选了英文、德文和法文的报告以确定是否符合条件。对于荟萃分析,我们纳入了使用任何参考标准的测试准确性研究,并使用诊断准确性研究质量评估-2 工具评估偏倚风险。荟萃分析的主要结果是靶向 NGS 诊断耐药结核病的敏感性和特异性,与表型和基因型药物敏感性测试相比。我们使用贝叶斯双变量模型生成总体和按药物和样本类型分层的汇总接收者操作特征图和诊断准确度测量。本研究已在 PROSPERO 注册,编号为 CRD42022368707。
RNA丰度定量已成为常规和可行的,这要归功于高通量的“短阅读”技术,这些技术在基因水平上提供了准确的分子计数。对确定的全长的准确量化,转录本同工型仍然是一个固执的挑战,尽管在广泛的问题中具有明显的生物学意义。“长阅读”测序平台现在产生的数据类型,原则上可以驱动常规的确定形式量化。然而,当代长读数据型的一些细节以及同工型复杂性和遗传变异,当前的生物信息学挑战。我们在这里使用ONT数据显示,可以快速准确地量化长阅读数据,并且可以通过外部限制来改进。进行量化,我们开发了LR-Kallisto,它适应了长阅读技术的Kallisto散装和单细胞RNA-SEQ量化方法。
此外,传统测序技术依赖于通过PCR扩增的,从而消除了诸如甲基化的基础修饰,这意味着如果没有额外的时间消耗且经常效率低下的样品处理方法22。不需要纳米孔测序,不需要PCR,可以保留并直接测序碱基的修改。基础修饰检测不仅提供了更大的基因组表征深度,而且还可以用于支持元基因组重叠式嵌合,移动遗传元件与其宿主基因组的关联以及识别错误的元原核重叠群的鉴定23。元基因组数据的应变特异性甲基化模式可以进一步支持复杂微生物基因组的分辨率。
已经确定了100多种自然发生的RNA修饰,其中一些在基因表达调节中起了各种作用。[1-3]作为真核mRNA中最丰富的内部修饰,n 6-甲基拉丹代氨酸(M 6 A)受动态调节,并参与了mRNA代谢的许多方面,例如替代拼接,[4]核输出,[5]稳定性,[5]稳定性,[6] [6]转换[7,8]和dean。[9]近年来,关于其他mRNA修饰的整个转录组测序的研究也已经出现。报告的排序方法可以分组为:(1)基于抗体的M 6 A 4,M 1 A,[10-13] AC 4 C 14,15,M 5 C 16和HM 5 C 17。这些方法依赖于基于抗体的富集,但既不能达到碱基精度也无法揭示绝对修饰的部分。(2)逆转录(RT)基于停止的方法,例如基于CMC的假喹啉测序[18]和基于低DNTP的2'-O-O-ME测序。[19]尽管这些方法可以以基础分辨率检测修饰位点,但它们通常具有很高的假阳性速率,因为RT停止签名可能是非特定于特定特定的。[20](3)基于RT突变的AP促进,例如映射M 6 A,[21-24] M 7 G [25-27]和M 1 A [28]的方法,这些方法在修改的位点产生突变特征以实现单个基础分辨率,以低背景。(4)基于RT缺失的方法,例如BS诱导的定量假氨酸测序。[29,30] RNA修饰中的另一个考虑是每个位点的修饰化学计量法。修饰分数是与修饰动力学及其调节功能直接相关的生物学参数。5-甲基胞嘧啶(5MC),5-羟基甲基环胞嘧啶(5HMC)和5-甲基辛糖苷(5FC)是DNA中重要的中间体的DNA修饰,是活性DNA 5MC
1 Institute of Clinical Molecular Biology, Christian-Albrechts-University and University Medical Center Schleswig-Holstein, Kiel 24105, Germany, 2 Center for Genomic Regulation, Centro Nacional de An ´alisis Gen ´omico, Barcelona 08028, Spain, 3 Department of Gynaecology and Obstetrics, University Medical Center Schleswig-Holstein, Campus Kiel,基尔24105,德国,4勒中心,d'Erence,d'Ennovation,d'Expertance et transpert(crefix),PFMG 2025,´evry 91057,法国5,5中心国家de recherche en g'eng en g·eNomique humaine(Cnrgh)巴黎 - 萨克莱,“法国Evry 91057,6,6诊断与研究中心,分子生物医学中心,诊断与研究研究所,格拉兹医科大学,格拉兹医科大学,格拉斯8010,奥地利7号,奥地利7,大学医疗中心Schleswig-Holstein,Schleswig-Holstein,Kiel Kiel Kiel Kiel,Kiel Kiel 24105,surrying surrying,8 Noregian Pssrant forserpl of Norigian Pss toprant of Norigian Pressurant of Norigian Pressurant of Norigian Pressuration。奥斯陆大学医院Rikshospitalet,奥斯陆0372,挪威9号胃肠病学部分,奥斯陆大学医院Rikshospitalet,Oslo 0372,诺斯洛大学,俄勒冈州司法部,俄勒冈大学,司法部,施用疾病和移植,10372 0372, Norway, 11 Department of Gastroenterology, Hepatology and Endocrinology, Hannover Medical School, Hanover 30625, Germany, 12 Institute of Pathology, University Hospital Heidelberg, Heidelberg 69120, Germany, 13 Institute of Pathology and Neuropathology, RKH Klinikum Ludwigsburg, Ludwigsburg 71640, Germany and 14德国罗斯托克大学医学总外科系罗斯托克,罗斯托克
阿尔茨海默氏病(AD)是一种神经退行性疾病,其特征在于大脑中淀粉样蛋白斑块和神经原纤维缠结的积累。尽管进行了数十年的研究,但AD的根本原因仍然知之甚少。然而,最近的证据表明,微生物感染可能在AD的发展和发展中起作用。随着单细胞测序(SCS)技术的出现,研究人员现在拥有一个强大的工具,可以以高分辨率研究AD Brains的微生物群落。本评论文章重点介绍了SC在研究微生物感染与AD之间关系中的作用的最新研究。通过启用特定微生物物种的鉴定和表征及其与AD大脑中宿主细胞的相互作用,SCS为AD的复杂微生物景观提供了新的见解。此外,该技术有可能通过揭示新的治疗干预靶标来影响AD的诊断和治疗。最后,我们还讨论了SCS技术的挑战,局限性,道德和翻译考虑因素以及该领域的未来研究方向。SCS对了解AD中微生物感染的潜在影响很大,并且可能导致对这种毁灭性疾病的新疗法和预防措施的发展。总而言之,这篇综述强调了SCS在促进我们对AD复杂微生物群落的理解及其潜在参与疾病发病机理方面所起的重要作用。
转移性结直肠癌 (mCRC) 仍然是当代肿瘤学的重大挑战,治疗顺序在报告的患者结果中起着关键作用。尽管目前可用的治疗方案已导致总体生存率中位数提高,但 IV 期疾病患者的预后仍然令人沮丧。本文全面回顾了 mCRC 治疗顺序策略的当前状况,重点关注各种方法背后的原理以及支持其疗效的不断发展的证据。我们考虑了化疗、靶向治疗和免疫治疗药物的作用,以及个性化医疗和序贯治疗方案的新兴趋势。“连续护理”的概念已成为一项基本原则,旨在通过个性化方法提供所有可用的治疗方法,以最大限度地提高临床效益。通过阐明 mCRC 治疗顺序的潜在复杂性,本综述旨在指导临床医生优化治疗策略并改善患者护理。