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大鼠神经母细胞瘤细胞系在无血清
合成培养基通常需要补充血清来支持培养细胞的增殖或存活。然而，血清的加入可能会显著影响实验的可重复性，因为即使是在混合血清样本中，由于供体的年龄、性别、营养和生理状态的差异，批次也会发生变化。此外，血清复杂而不确定的性质也使评估调节剂（如激素或神经递质）对培养神经系统细胞分化特性的影响变得复杂。这对于长期研究尤其重要，因为如果删除血清，细胞数量可能会大幅减少，在许多情况下，细胞可能会在数小时或数天内完全死亡。为了避免这些问题，已经对几种细胞系进行了改造，使其能够在无血清培养基中增殖（1-4）。然而，成功适应这些条件通常需要很长的时间，而且很少有细胞系能够表达分化功能。此外，这些适应性细胞系很可能已经丧失了一些更有趣的生理特性，例如对血清激素的反应。本实验室最近成功采用了另一种方法，即在无血清实验培养物中添加激素和生长因子。由于细胞从含血清培养基转移到无血清补充培养基后会继续生长，几乎没有或根本没有因转移而导致的滞后，因此似乎不涉及选择或适应。迄今为止，大鼠垂体 GH3、人宫颈 HeLa 细胞、小鼠黑色素瘤 M2R、小鼠胚胎癌 PCC.4 aza-1 和 F9、大鼠神经胶质瘤 C6、小鼠成纤维细胞 BALB 3T3 和 Swiss 3T3、正常大鼠滤泡 RF-1 以及正常睾丸 TM4 细胞系已被证明能在补充无血清培养基中增殖 (5-8)。 B104 大鼠神经母细胞瘤是一种中枢神经系统来源的细胞系，它表现出分化神经元的许多特性，例如动作电位的产生、神经递质的合成以及神经递质的存在
激活激活磷脂酰肌醇3-激酶的激动剂激活血清和糖皮质激素调节的蛋白激酶是由3-磷酸糖介导的
PTDINS（3,4,5）p $依赖性蛋白激酶B（PKB）通过3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1和-2（分别为PDK1和PDK2）（分别为PDK1和PDK2）是介导信号激活PTDINS 3-KINASE的信号的关键事件。血清和糖皮质激素调节的蛋白激酶（SGK）的催化结构域与PKB相同，尽管缺乏PTDINS（3,4,5）P $ $ - 结合Pleckstrin sologology in and Phosplosed pleckstrin sogy and phosplosed＃phosplosptried＃phosphored＃phsphosphored＆pdk1 and pdk2 in ther #2k2 and pdk2 and pdk2 in in #2k2 in thy #2k2 SGK。在这里我们表明PDK1通过磷酸化thr＃＆'激活ITRO中的SGK。我们还表明，在响应胰岛素样生长因子-1（IGF-1）或过氧化氢时，转染的SGK通过PTDINS 3-激酶依赖性途径在293个细胞中激活，涉及THR＃＆'和Ser％##的磷酸化。PDK1在ITRO中激活SGK在ptdins（3,4,5）p $中不影响Ser％##向AlA废除，并且由于SER％##的突变## ser％##对ASP的突变大大增强（尽管这种突变没有激活SGK本身）。与这些发现一致，