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标题：使用自动化平台Lustro作者和分支机构在酵母中进行高通量光遗传学实验：Zachary P. Harmer 1和Meg
摘要：该协议描述了如何使用自动化平台卢斯特罗来进行酵母中光遗传系统的高通量表征。摘要：光遗传学通过遗传编码的光敏感蛋白来精确控制细胞行为。但是，优化这些系统以实现所需的功能范围通常需要许多设计建造测试周期，这是耗时且劳动力的。为了解决这个问题，我们设计了Lustro，该平台将光刺激与实验室自动化相结合，以实现光学遗传系统的高通量筛选和表征。lustro使用配备有照明设备，摇动设备和板读取器的自动化工作站。编程机器人臂以在设备之间移动微孔板，以刺激光遗传学菌株并测量其响应。在这里，我们提出了一种使用lustro来表征酿酒酵母中的基因表达控制的光遗传系统的方案。该协议描述了如何设置Lustro的组件，将照明设备与自动化工作站集成在一起，并提供用于编程照明设备，板块读取器和机器人的说明。简介：光遗传学是一种强大的技术，它使用光敏感蛋白来控制高精度1-3的细胞行为。但是，原型遗传构建体并识别最佳照明条件可能很耗时，这使得很难优化光遗传系统4、5。高通量方法快速筛选并表征了光遗传系统的活性，可以加速设计建造循环的原型构造，
固态发酵，用于链霉菌链球菌生产梅罗帕霉素。菌株MAR01
在链霉菌的自由培养系统中产生了抗生素梅罗帕霉素。菌株MAR01。筛选了五个固体底物（大米，小麦麸，贵格会，面包和玉米玉米），以支持其在固态发酵中支持梅罗帕霉素产生的能力。在批处理培养中，小麦麸皮记录了最高的抗菌活性，残留底物值最低。记录了地面玉米和贵格会的最高残留底物值。另一方面，未检测到水稻作为固体底物的抗菌活性。与自由培养系统相比，淀粉硝酸盐培养基在固态发酵中的原始强度可产生较低的抗菌活性。将这种介质的强度加倍，导致活动的增加，等效于自由培养。培养基的初始pH（7.0）和2 mL的孢子悬浮液（1 mL含5×10 9孢子/ml）是抗生素产生的最佳选择。水是从固态培养物中提取抗生素的最佳洗脱液。十分钟分钟足以使用混合器提取抗生素，而摇动时需要60分钟。使用渗透方法的半连续产生产生梅罗帕霉素，在4次运行（450-480 µ g/ml）上表现出或多或少恒定的抗菌活性。在固定床生物反应器中监测抗生素的半连续产生，并在第四次运行后获得最大活性（510 µg/ml），并且整体过程持续了85天。
SIM AGAR ISO 15213-2
*根据需要调整和/或补充以满足性能规格。方法原理肽和酪蛋白的酶促消化物提供生长所需的氨基酸，氮，碳，维生素和矿物质。硫酸铵和硫代硫酸钠通过形成黑色沉淀物作为硫化氢（H 2 S）生产的指标。琼脂是固化剂。低浓度的琼脂使培养基半固体允许视觉确定运动性。制备悬浮在1升的蒸馏水或去离子水中29.9克粉末。热量经常摇动，直到完全溶解为止。将10毫升倒入管中。在121°C的高压灭菌15分钟。允许在直立位置冷却。所需的材料，但未提供标准的微生物供应和设备，例如：高压灭菌器，试管，接种环，孵化器，质量控制生物。测试程序按照ISO 15213-2概述的步骤，刺入带有血琼脂板或营养琼脂板上厌氧的菌落的SIM琼脂管。在带有松动帽的厌氧气氛中在37±1°C下孵育20-24小时。注意：测试生物必须在纯文化中。应从固体培养基中取走接种物，因为液体悬浮液的接种物可能会延迟结果。如果瓶盖在孵育过程中不松动，则可能会发生错误的结果。
使用 IBEACON 保障女性安全的智能可穿戴设备
本文介绍了一款使用 IBEACON 技术保护女性安全的智能可穿戴设备。如今，女性的安全是最重要的问题，这款设备旨在为女性提供更安全的环境，并在她们可能面临任何危险时保护她们。本文包括支持 BLE-Wi-Fi 的 Beacon 模块、AI 控制器，并使用 MEMS 加速度计传感器检测异常。在发生性骚扰或紧急情况时，加速度计传感器会检测到震动警报，该警报作为设定的阈值输入。该设备通过向预定义的紧急联系人或当局发送短信警报和呼叫警报自动激活。受影响人员的详细信息将持续传输到与 AI 控制器接口的信标模块。信标模块可以扫描和访问任何网络连接，不受密码保护的影响，因此在关键时刻，受害者的实时位置可以通过主云服务器进行跟踪和监控，而无需受害者的 Wi-Fi 需求。拟议的系统带有紧急开关，可触发蜂鸣器，向她周围的人发出警报。所提出的框架灵活、可互操作，无需人机界面，提高了准确性，有效地解决了这一问题。关键词：IBEACON 技术、MEMS 加速度计传感器、GPS、AI-Tensilica 控制器。
稻米和牛奶发酵培养物中细菌的自然耕种识别
由于从美国西海岸到檀香山的运输时间，精神细菌的潜在增加（He等，2010）。用自来水以1：2（杯/杯）的比例将米饭洗涤。将前两个洗涤米水（200毫升）收集在一个干净的玻璃罐中（满满2/3）。罐子上覆盖着薄纸，并用橡皮筋固定以防止害虫。覆盖的罐子在室温（24 o -26 o C）远离直接光线下存放。罐子储存两天而不会发抖，此时米饭会发出略带酸味的气味。在第3天，顶层形成的垫子泡沫。通过倒出并丢弃垫层来收集底部的多云液体（发酵冲洗水）。然后，在一个新的干净罐子中，将大约200毫升（1部分）与约400毫升（2份）全牛奶混合。罐子像以前一样被薄纸覆盖。罐子在室温下储存，远离直接光。四天后，将罐子的内容分成浮动的固体分数和黄色的液体分数。通过将黄色液体收集到新的容器中并存放在冰箱中，从而停止了发酵。重复三次收集发酵液的过程。
了解糖尿病中的血糖峰值和蘸酱
了解这些波动对于有效管理糖尿病并预防并发症至关重要。几个因素可以导致这些峰值，包括饮食选择，胰岛素或药物不足，缺乏体育锻炼和压力。例如，食用高碳水化合物的食物，尤其是糖果，面包或含糖饮料等精制糖，可能会导致血糖水平迅速升高。发生这种情况是因为这些食物会很快消化并转化为葡萄糖，从而压倒了人体加工它的能力。此外，当胰岛素或糖尿病药物未正确调整时，人体可能没有足够的胰岛素将葡萄糖带入细胞中，从而导致血糖尖峰。压力和疾病也可以升高血糖，因为人体释放了压力激素，例如皮质醇，这标志着肝脏释放储存的葡萄糖进入血液中。最后，久坐的生活方式会加剧血糖峰值，因为体育锻炼可以帮助肌肉使用葡萄糖进行能量，从而降低血糖水平。这使得防止血糖尖峰成为治疗糖尿病并保护整体健康的重要方面。低血糖会引起症状，例如在极端情况下颤抖，出汗，头晕，混乱，甚至意识丧失。低血糖通常是由胰岛素或药物剂量和食物摄入量之间的不平衡引起的。例如，相对于所食用的食物量，服用过多的胰岛素会导致血糖危险下降。跳过
帕金森氏病
引言詹姆斯·帕金森（James Parkinson）希望他的专着题为一篇关于摇晃的麻痹的文章，在其中，他详细介绍了六名患者“非自愿颤抖的动作，肌肉力量减弱，即使在受到支持的情况下也无法采取行动，并倾向于弯曲树干向前弯曲并从步行步行到跑步节奏的倾向”，他对某种态度的态度说明了一个不适的障碍。1,2在承认伦敦药剂师的清晰描述中，神经病学之父让·马丁·夏科特（Jean Martin Charcot）提出，该综合症应称为Maladie de Parkinson（帕金森氏病）。该疾病的发生率随着年龄的增长而陡峭地上升，从50至59岁的100千年中的17·4人中的年龄在70至79岁之间的100千年中的93·1人中，有终生的风险，即产生1·5％的疾病。3,4发病年龄为60岁，诊断到死亡的疾病的平均持续时间为15年，死亡率为2至1。5，由于西方人群的老化，可以预期高于当前1的频率。在大多数情况下，精确的死亡模式很难识别，但肺炎是最常见的证书原因。有充分的证据表明，男性的发展帕金森氏病的可能性是女性的1·5倍，但在不同的研究中，这种不同的可能性并不相同，并且更明显，并且可能仅限于西方人口70岁以上的人。6
原发性代谢调整的自然变化决定了模型中的铵耐性。
酶活性通过用500μl的提取缓冲液进行vig口摇（20％（v/v）甘油，1％triton X-100（v/v），50 mm hepes – koH（ph 7.5），10 mm mgcl 2，1 mm edta，1％triton x-100（v/v），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（V/V），1％Triton X-100（v/v），1％X-100（v/v），1％MM emMM MM E.酸，1 mm苯甲米丁，20μM亮肽素，0.5 mM DTT，1 mM苯基甲基磺酰基氟化物，10％聚乙烯基 - 丙吡咯烷酮（W/V）]。葡萄糖激酶（GK），FRUC TOKINAPE（FK），谷氨酸脱氢酶（GDH），磷酸烯醇丙酮酸羧化酶（PEPC），苹果酸脱氢酶（MDH），丙酮酸激酶（PK），总浓酸酯（CM），米尔酸酯（CS），米尔酸酯（CM），米尔酸酯（CM）通过分光光度法测定NADP依赖性的异戊酸脱氢酶（ICDH）酶，并用机器化的微孔板测定法测定（Gibon等人。，2004）。在25°C孵育后，NAD（P）H的演变在340 nm处被固定在340 nm处。通过循环反应在570 nm处测量了GDH的活性，涉及在存在醇脱氢酶和苯嗪硫代硫酸盐的情况下，涉及3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑四唑。cs ac ac titive。（2003）。通过检查生物标准（番茄叶提取物）的恢复，并确保提取物的稀释对活动的估计没有影响，如Bénard和Gibon（2016）所述，可以通过检查生物标准的恢复（番茄叶提取物）来验证。
膜的空气过滤应用
膜的另一组常见应用是消费者和工业真空吸尘器。这些应用中有两种通用过滤器类型：保护设备本身的过滤器，即真空电机和那些过滤排气的电机。真空吸尘器过滤器以非常高的空速运行。面部速度为10至20 cm/s。EPTFE和UPE膜在这些较高的空速下提供了高效率，而低压下降则可以随着功耗降低而高空气流速率。真空吸尘器的进一步优势来自膜的表面载荷特性和鲁棒性。使用后，可以通过摇动或水喷雾轻松清洁装满滤清器表面的灰尘蛋糕，膜过滤器恢复到其原始压降和效率附近。膜空气过滤器在许多医学和生物制药应用中都是理想的选择。低压下降，ULPA效率和疏水膜特性在手术和医院气道管理中至关重要，可保护患者和设备。相同的特性非常适合排气应用，例如造口术袋。膜通常被层压成浸入碳浸渍的非织造。组合过滤器提供了升压，这是液体流经滤清器的绝对障碍，并减少了气味。取决于特定要求，可以对膜进行处理以增强其含有含水性的含含水性含量。这些排气过滤器需要在生物制药中，EPTFE和UPE过滤器用于发酵和细胞培养过程中产生的气体。
定量分析
i）用给定的酸溶液冲洗干净的鼻腔ii）夹具倾斜架上的尺寸。使用漏斗用酸溶液填充尺寸。将酸溶液倒入Reniscus水平后必须去除此漏斗。iii）避免在底片内的溶液中避免用碱或基本溶液冲洗干净的2ocm³或25厘米的移液器，给定v）液化剂20厘米或25厘米的碱或底座或底座成一个干净的缝隙瓶。应在半月板一级准确阅读移液器。vi）切勿用要放置的溶液冲洗锥形瓶。锥形瓶应干净，但不一定干燥。vii）将2或3滴指示剂加到圆锥瓶中的底座或碱。viii）从滴定表上的弯月板级别写下最初的质量质量读数。必须通过将酸溶液逐渐从瓶中运行到烧瓶中的碱溶液，并在添加酸时轻轻摇动烧瓶，从而将读数至少放在十进制IX）滤液中。x）立即停止滴定，烧瓶中溶液的颜色发生了变化。这称为终点。xi）重复滴定3 0R 4次，并根据结果计算平均过滤器值。读数的差异和平均滤波器值不得超过±0.2。指示器在滴定过程中使用染料，以指示其颜色的变化，当达到终点时。指示剂通常是有机酸或碱，它们在溶液中稍微电离以产生确定颜色是否变化的离子。