获得了与上述基因表达相对应的(德国Sigma Aldrich)。理想稀释比和检索缓冲液在染色之前确定(ITGA-2:1:100,MMP-1:1:1:1:1:1:1:1:1:1:250)。简短地,将组织切片用二甲苯脱蜡,并随着酒精浓度降低而补液。使用柠檬酸盐缓冲液(10 mmol/L,pH 6.0)在微波炉(600 W)中进行热诱导的表位检索后,在室温下使用载玻片,用针对ITGA-2,TEK,TEK,TEK,MMP-1的主要抗体进行1小时。Ultravision LP检测系统(Lab Vision Corporation,Fremont,California)用于根据制造商的建议检测抗体结合。抗体结合位点通过添加3-3-二氨基苯胺颜色褐色。最后,进行了用苏木精三世(Merck,Darmstadt,Germany)对Tis-Sue样品的抗染色。所有载玻片均分配给标记表达式的四类类别之一:0 =负; 1 =弱:在<30%的细胞中染色; 2 =中度:30%至60%的细胞染色;和3:超过60%的细胞中的染色强。采用核心污渍的平均值来确定染色强度。阳性对照是根据制造商的协议进行的。使用Olympus BH-2显微镜(Olympus America,Melville,New York,New York)分析样品。
为了克服这些缺陷,2010 年首次分离出牛奶来源的外泌体(参考文献 18),并因其可用性、成本和无毒性而逐渐发展成为潜在的药物递送载体。10 该载体已被证明可以降低游离 Dox 19 的全身毒性并增强药物在肿瘤组织中的蓄积。据报道,负载化疗药物的牛奶来源的外泌体对肺癌和乳腺癌表现出更好的抗肿瘤效果。10,20 更重要的是,由于牛奶来源的外泌体可以穿过胃肠道屏障,未来口服化疗可能会实现。21 然而,由于其被动靶向性,负载化疗药物的外泌体会大量积聚在各个器官中,并可能对肝脏、肾脏或心脏造成损害。 16 因此,有必要通过主动靶向策略提高外泌体的肿瘤靶向性。Alvarez 等提出利用神经元特异性 RVG 肽修饰的 DCs 衍生外泌体,并装载治疗性 siRNA,用于治疗阿尔茨海默病。
人类表皮生长因子受体 (EGFR) 也称为 ErbB-1 或 HER1,是 ErbB 受体家族的成员。它是一种广泛研究的致癌基因,影响基因表达、增殖、血管生成、凋亡抑制、细胞运动、转移、粘附和血管生成。作为精准治疗的首要目标之一,尤其是由于肺癌中发现的高水平突变,人们自然而然地认为头颈癌患者可能受益于 EGFR 靶向疗法。这是因为 EGFR 在超过 90% 的头颈部肿瘤中过表达 (2),并且这种关联意味着患者生存期较短 (3-5)。HNSCC 的 EGFR 表达显著增加,EGFR 扩增频率高,单核苷酸变异 (SNV)/插入缺失率低 (6)。