f:在紫外线桌上,用DNA染料着色的帮派非常明亮,但照片中几乎看不到帮派。那是什么?a:一些溴化乙锭照片过滤器非常狭窄,因此实际上将它们排除在其他波长之外,例如在这种情况下所需的绿色区域。使用宽带照片过滤器或滤波器进行SYBR®绿色。
1. 美洲大学(UDLA)研究总局研究实验室,安提瓜 Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 2. 美洲大学(UDLA)工程与应用科学学院生物技术工程项目,安提瓜 Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 3. 厄瓜多尔基多美洲大学(UDLA)健康科学学院兽医学项目,Antigua Vía a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔; 4. 农业产业与环境科学学院。农业生涯。卡尔奇州立理工大学 (UPEC)。 Antisana S/N 和 University Avenue,图尔坎 EC 040102,厄瓜多尔; 5. 罗萨里奥国立大学(UNR)兽医学院。奥维迪奥拉各斯大道和 33 号公路卡西尔达 – 圣达菲 – 阿根廷; 6. 厄瓜多尔中央大学兽医学与畜牧学院,厄瓜多尔基多,Gatto Sobral 和 Jerónimo Leiton,基多 EC 170521,厄瓜多尔; 7. 美洲大学(UDLA)教学兽医诊所,Shuara 街 N40-55 和 De Los Granados 大道,基多,EC 170503,厄瓜多尔; 8. 美洲大学(UDLA)“一个健康研究小组”,安提瓜 Via a Nayón S/N,基多 EC 170124,厄瓜多尔。通讯作者:Luis Nuñez,电子邮件:fabiann7@yahoo.es 共同作者:ALG:a.abel.loor.giler@gmail.com,SCR:sara.castillo.reyes@udla.edu.ec,SSP:silvanahsp@yahoo.com,MC:rolando.campos@upec.edu.ec,RMP:rpmena@uce.edu.ec,SPC:sdpch2021@gmail.com 收稿日期:2024 年 5 月 8 日,接受日期:2024 年 9 月 11 日,在线发表日期:2024 年 10 月 17 日
使用 SYBR® Green qPCR 和针对大肠杆菌 16S rRNA 基因座的特异性引物,筛选至少 1 µl 脱氧核苷酸 (dNTP) 溶液混合物中是否存在大肠杆菌基因组 DNA。使用由纯化的大肠杆菌基因组 DNA 生成的标准曲线对结果进行量化。大肠杆菌基因组 DNA 污染的测量水平为 1 个大肠杆菌基因组。
使用SYBR®绿色QPCR筛选了至少1 µL的Warmstart®LARMSTART®LARMSTART®LARMSTART®LARMSTART®LARMSTART®LARMSTART®LARMSTART®COLLIEMITRICLAMP MASTER MIX(DNA和RNA),以与大肠杆菌16S rRNA基因座具有特定的引物。使用纯化的大肠杆菌基因组DNA产生的标准曲线对结果进行定量。大肠杆菌基因组DNA污染的测量水平是1个大肠杆菌基因组。
使用 SYBR® Green qPCR 和针对大肠杆菌 16S rRNA 基因座的特异性引物,筛选至少 1 µl 脱氧核苷酸 (dNTP) 溶液混合物中是否存在大肠杆菌基因组 DNA。使用由纯化的大肠杆菌基因组 DNA 生成的标准曲线对结果进行量化。大肠杆菌基因组 DNA 污染的测量水平为 1 个大肠杆菌基因组。
EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂的浓度为 100 µM。使用前请彻底旋涡 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。建议在最终测定中使用 1 - 1.5 µM 的 EvaGreen® 浓度。每次测定时,按照下表所示添加 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。请注意,在定量 PCR 反应中,预混液的制备可能至关重要,以减少移液误差。在检测仪器上选择 EvaGreen®、SYBR® GREEN 或 FAM 的光学设置。
试剂或资源源标识符化学品,肽和重组蛋白Puelink RNA Mini Kit Invitrogen 12183018A ISCRIPT™ISCRIPT™cDNA合成Kit Kit Biorad 1708840 Sybr™SELICS SYBR™SELECT MASTER MASTER MASTER MIST 4-12%,10井Genscript M00653胶原酶II Sigma C2-28-100MG DMEM(无葡萄糖)GIBCO GIBCO 11-966-025 FBS FISHER FISHER FISHER SCOCICILIFIC SH3010903 PENICILLIN SH30103 PhosSTOP Roche 4906845001 IBMX Sigma 410957 Insulin Sigma I5500 Indomethacin Sigma 405268 Triiodothyronine (T3) Sigma T6397 Dexamethasone Sigma 265005 Rosiglitazone Sigma PHR2932 LipidTOX deep red neutral lipid stain Fisher Scientific H34477超级阻止诱因37535抗体抗KHK Sigma HPA007040抗HIF1α(D2U3T)细胞信号传导14179抗PPARγ(C26H12)细胞信号2443 C/EBPα细胞信号8178 Anti-aint-aint-aint-aint-aint-aint-aint-aint-aint-aint-EBPα细胞信号8178 Anti-al timnigin-αtubin tim-αtubin(38)细胞信号2250质粒和siRNA PVSV-G添加剂138479 PCL-ECO ADDGENE 12371 PBABE-NEOLARGE TCDNA ADDGENE 1780人HIF1A 3091 sirna accell drm-a-a-a-a-004018230001生物。n/a
描述DNA梯子步骤100长适合用作估计琼脂糖凝胶中双链DNA分子的长度和数量分析的标准。从质粒DNA中制备的梯子中包含14至3000 bp的14个DNA片段。有关琼脂糖凝胶的简单参考,500 bp和1500 bp片段是双重浓缩的。dna梯子步骤100长。该梯子可以用溴化乙锭或SYBR绿色染料染色。DNA分子量标记
ScienCell 绝对大鼠线粒体 DNA 拷贝数定量 qPCR 检测试剂盒 (ARMQ) 旨在直接比较样本的平均 mtDNA 拷贝数。大鼠 mtDNA 引物组可识别并扩增大鼠 mtDNA 上最保守的区域之一,并且不会扩增核基因组 DNA 上的任何脱靶序列。单拷贝参考 (SCR) 引物组可识别并扩增大鼠 17 号染色体上 100 bp 长的区域,并作为数据标准化的参考。已知 mtDNA 拷贝数的参考基因组 DNA 样本可作为计算目标样本 mtDNA 拷贝数的参考。精心设计的引物确保:(i) 高效,实现可靠的定量;(ii) 无非特异性扩增。每个引物组都已通过 qPCR 验证,包括熔解曲线分析和凝胶电泳,以确保扩增特异性,并通过模板连续稀释来验证扩增效率。 2X GoldNStart TaqGreen qPCR Master Mix(目录号:MB6018a-1)是一种基于 SYBR ® Green 染料的 qPCR Master Mix,具有“热启动”特性。它在单个试管中包含 SYBR ® Green、dNTP、Taq DNA 聚合酶和惰性金色上样指示剂。通过 ScienCell 独特的化学修饰 Taq DNA 聚合酶实现的“热启动”特性可最大程度地抑制引物二聚体的形成。先进的缓冲液配方具有出色的特异性和效率,线性动态范围宽。惰性金色上样指示剂可更好地可视化和跟踪 qPCR 板或试管中的样品上样情况。