使用Trizol试剂(Invitrogen,Carlsbad,CA,美国)提取总RNA。使用Prime-Script RT试剂试剂盒(完美的实时,日本Takara)合成互补的DNA(cDNA)。3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)用作内部对照基因,并使用2 – DDCT公式计算折叠诱导。使用SYBR Premix ex Taq进行定量实时PCR分析(日本Takara。Inc.目录编号DRR041A)(PCR协议:阶段1:早期讲述,重复:1;95℃30s阶段2:PCR反应,重复:40; 95℃5 s; 60℃30s阶段3:熔体曲线:熔体曲线:95℃15s; 60 s; 60 s; 60 s; 95 s; 95 s; 95 s;95℃15s)。使用了以下引物:ARID1A(F)5'-CTTCACTCAGTCAGCTCCCA-3',arid1a(r)5'-GGTCACCCCACCCTCATCTCATACTCCTTT-3',gapdh(f)5'-GGGTGGTGGTGGTGGTGGTGGTGGTGGTCTCTCTCTCTCTCCTGATCTCAACA-3',and gapdh(R) 5'-GTTGCTGCCCAAATTCGTTGT-3'。GAPDH用作内源性对照。每次三份重复每个样本,并使用相对定量软件(Applied Biosystems)分析。
摘要:我们用转基因编码四环素诱导的金黄色葡萄球菌核酸酶,并结合了易位信号。我们调整了未修饰和核酸酶工程的细胞系在无血清培养基中的悬浮液中生长,分别产生HEK293TS和NUPRO-2S细胞系。瞬时转染产生的1.19×10 6慢病毒转染来自Nupro-2S细胞的每毫升(TU/mL),HEK293TS细胞的1.45×10 6 Tu/ml。DNA梯子消失揭示了以四环素诱导的方式由NUPRO-2S细胞引起的中等居民核酸酶活性。DNA杂质水平在NUPRO-2S和HEK293TS细胞引起的慢病毒材料中无法通过SYBR安全琼脂糖凝胶染色检测到。通过PICOGREEN试剂进行直接测量表明,在HEK293TS细胞的慢病毒材料中,DNA以636 ng/ml的形式存在,在Nupro-2S细胞的慢病毒材料中,杂质水平降低了89%至70 ng/ml。通过使用50个单位/mL苯并酶处理HEK293TS衍生的慢病毒材料,这种还原与23 ng/ml相当。关键词:慢病毒,哺乳动物细胞,生物普应,基因治疗,核酸酶
摘要。亚细胞细胞器(植物)的DNA矩阵的拷贝数可以作为光合作用和氧化磷酸化过程的强度的指标。我们评估了三种葡萄品种的年轻和成熟叶子中线粒体和叶绿体DNA的相对拷贝数(RCN):“ Traminer Pink”,“ Chardonnay”和“ Syrah”和“ Syrah”,在田间条件下生长。叶样品(5-10 mg),以进行随后的总DNA提取。使用LightCycler 480 SYBR Green I Master Mix(Lifescience,Roche)和LightCycler 96自动分析仪(Roche Life Science)进行QRT-PCR反应。使用GAPDH基因(染色体DNA)确定NAD1基因(线粒体DNA)和RPS16基因(叶绿体DNA)的相对拷贝数。使用2 -∆ CT 2- ∆ΔCT算法进行定量评估。已经确定,叶绿体和线粒体DNA的相对拷贝数(RCN)值变化,并取决于葡萄的品种和叶片成熟度。RCN在成熟的葡萄叶中的光合作用强度和成熟葡萄叶片的氧化磷酸化强度更高。在评估宏观能力平衡(MEB)指标时,可以得出结论,通过光合作用过程在叶绿体中获得的能量的2%至4%用于生产年轻叶子和成熟叶片中各种葡萄品种的线粒体中的宏观能。我们开发的实验方案可以成功用作测试系统,以评估各种葡萄品种的潜在产量。
抽象的咀嚼棒和海绵用于加纳和其他非洲国家的口腔卫生。除了可负担性外,它们还具有抗微生物和Ti-Plague特性的其他优势。它们通常在较低的卫生条件下在公开市场上出售,使它们暴露于环境病原体中。由于使用前大多未对其进行灭菌,因此筛查存在对随机选择的样品的重要性重要性很重要。这项初步研究使用了分子测定法对轮状病毒A,Salella Typhi,Vibrio Cholerae和Escherichia Coli进行筛选10个咀嚼棒和海绵样品,从Accra的Agbogbloshie市场随机购买。在室温下将样品在无菌蒸馏水中孵育过夜,以清除病原体。脱落的病原体。使用RADI Prep DNA/RNA试剂盒从浓缩物中提取总核酸。使用2X SYBR绿色混合物和病原体特异性引物进行所有PCR分析。在筛查的四种病原体中,仅检测到大肠杆菌(分别为40%和60%的咀嚼海绵和棍子样品)。尽管咀嚼棍棒和海绵具有优势,但在样品上检测大肠杆菌是引起关注的原因,因为它们表明粪便污染并可能引起腹泻疾病。建议在用于口腔健康之前清洁咀嚼棒和海绵。另一种选择是培训当地生产商和零售商,以改善这些基本清洁剂的卫生包装老化和处理。
。可以在0.2毫升标准96韦尔的两种类型的块中选择此设备,快速0.1ml 96 Well型号,所有块都可以在30分钟内操作快速协议。。96well样品块由至少三个毛毡轮胎块组成,并且块之间的最大温度偏差为25°C,并且在相邻块中的最大温度偏差最高可达5°C。。0.1ml 96孔盖模型支持10μl反应体积,设计为在0.2ml 96孔盖模型中使用10μL至100μL。4。设备是通过将其纠正到FAM™,SYBR®GreenI,Vic®,Ned,Aby,Jun,Jun,Tamra和Rox™染料。。设备中的曲线或哈利熔化发生在0.015°C≤t≤3.66°C之间的多种阶段。6。块的最大响应速度为每秒6.5ºC。7。平均寿命维持了5年以上,持续时间很长,并且光源至少具有60,000小时的寿命。8。可以在没有计算机连接的情况下单独操作操作。9。可以使用任何特殊插头的任何转换或要求。10。将反应液体的蒸发量最小化,该结构将反应液体的蒸发加热,该结构加热样品所在的板的顶部。11。本设备中使用的触摸屏界面可以存储协议以快速在没有计算机的情况下操作设备。12。触摸屏接口通过样本,目标和实验过滤,以通过各种扩增配置实现屏幕。13。之间。14。触摸屏允许自定义支持服务/更正的公告设置。15。触摸屏接口擅长通过保护方法来创建用户的访问代码。16。触摸屏接口可以在操作设备时停止。此过程中的用户
由于耐药性的出现,抗疟药物的疗效正在下降。据报道,所有可用的抗疟药物,包括青蒿素,都出现了耐药性,因此对替代药物候选物的需求一直存在。传统的药物发现方法是对大型化合物库进行高通量筛选 (HTS) 以识别新药线索,这种方法耗时且资源密集。虽然虚拟计算机筛选是解决这个问题的一种方法,但模型的泛化并不理想。人工智能 (AI) 利用基于结构或基于配体的方法,在化学性质预测领域表现出高度准确的性能。利用现有数据,AI 将成为盲目搜索 HTS 或基于指纹的虚拟筛选的合适替代方案。AI 模型将学习数据中的模式并帮助有效地搜索命中化合物。在这项工作中,我们引入了 DeepMalaria,这是一种基于深度学习的过程,能够使用化合物的 SMILES 预测其抗恶性疟原虫抑制特性。基于图形的模型在葛兰素史克 (GSK) 数据集中的 13,446 种公开可用的抗疟原虫命中化合物上进行训练,这些化合物目前正用于寻找治疗疟疾的新型候选药物。我们通过预测大环化合物库中的命中化合物和已批准用于重新利用的药物来验证该模型。我们选择了大环化合物,因为这些配体结合结构在疟疾药物发现中尚未得到充分探索。该过程的计算机模拟流程还包括对内部独立数据集的额外验证,该数据集主要由天然产物化合物组成。利用从大型数据集进行的迁移学习来提高深度学习模型的性能。为了验证 DeepMalaria 生成的匹配结果,我们使用了常用的基于 SYBR Green I 荧光测定的表型筛选。DeepMalaria 能够检测到所有具有纳摩尔活性的化合物和 87.5% 的抑制率超过 50% 的化合物。进一步的实验揭示了这些化合物的作用机制,结果表明,其中一种热门化合物 DC-9237 不仅能抑制恶性疟原虫的所有有性阶段,而且是一种速效化合物,这使其成为进一步优化的有力候选者。
1。PR抓地力,EA反射,MN Sotto,NY Valentine,Aoki V,JF Carb和Al。血管病水平:切割。伟大的皮肤病。2011; 86:961--72。GT的Haunson,Judy DW,NC Prack,Mille RA。 话语品种:综述发病机理,现在,现在,诊断工作和治疗。 cutis。 2012; 90:302--6 3。 eb。 Bartones,健康和所有伟大的生物。 兽医皮肤托尔。 2017:28,96-E2 4。 Lines KA,Drummond先生,Velho Penf。 权限云。 伟大的皮肤病。 2019; 94:594--602。 5。 LH Pitassia,PP Dinice Pain,DG Scorpio,Drummond先生,Lania BG,ML和Al。 spp barton。 来自Campinas的献血者的面包症。 巴西。 PLOS NEGL TROP DIS。 2015; 9:9:00034 6。 德拉蒙德先生,BG Lania,PPVP俱乐部,R,DMR Demolin,DG Scorpio和Al。 改善了巴顿持有人DNA检测,其中通过结合和培养方法进行血液样本。 J Clin Microbiol。 2018; 56:-1 7。 MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。 我的患者和患者综合征的验尸。 与圣trop保罗一起修订。 2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。GT的Haunson,Judy DW,NC Prack,Mille RA。话语品种:综述发病机理,现在,现在,诊断工作和治疗。cutis。2012; 90:302--63。eb。Bartones,健康和所有伟大的生物。兽医皮肤托尔。2017:28,96-E2 4。 Lines KA,Drummond先生,Velho Penf。 权限云。 伟大的皮肤病。 2019; 94:594--602。 5。 LH Pitassia,PP Dinice Pain,DG Scorpio,Drummond先生,Lania BG,ML和Al。 spp barton。 来自Campinas的献血者的面包症。 巴西。 PLOS NEGL TROP DIS。 2015; 9:9:00034 6。 德拉蒙德先生,BG Lania,PPVP俱乐部,R,DMR Demolin,DG Scorpio和Al。 改善了巴顿持有人DNA检测,其中通过结合和培养方法进行血液样本。 J Clin Microbiol。 2018; 56:-1 7。 MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。 我的患者和患者综合征的验尸。 与圣trop保罗一起修订。 2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。2017:28,96-E24。Lines KA,Drummond先生,Velho Penf。权限云。伟大的皮肤病。2019; 94:594--602。 5。 LH Pitassia,PP Dinice Pain,DG Scorpio,Drummond先生,Lania BG,ML和Al。 spp barton。 来自Campinas的献血者的面包症。 巴西。 PLOS NEGL TROP DIS。 2015; 9:9:00034 6。 德拉蒙德先生,BG Lania,PPVP俱乐部,R,DMR Demolin,DG Scorpio和Al。 改善了巴顿持有人DNA检测,其中通过结合和培养方法进行血液样本。 J Clin Microbiol。 2018; 56:-1 7。 MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。 我的患者和患者综合征的验尸。 与圣trop保罗一起修订。 2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。2019; 94:594--602。5。LH Pitassia,PP Dinice Pain,DG Scorpio,Drummond先生,Lania BG,ML和Al。spp barton。来自Campinas的献血者的面包症。巴西。PLOS NEGL TROP DIS。2015; 9:9:000346。德拉蒙德先生,BG Lania,PPVP俱乐部,R,DMR Demolin,DG Scorpio和Al。改善了巴顿持有人DNA检测,其中通过结合和培养方法进行血液样本。J Clin Microbiol。 2018; 56:-1 7。 MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。 我的患者和患者综合征的验尸。 与圣trop保罗一起修订。 2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。J Clin Microbiol。2018; 56:-1 7。 MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。 我的患者和患者综合征的验尸。 与圣trop保罗一起修订。 2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。2018; 56:-17。MR,Visentiness L,Almeida AR,Angeramia RN,FH Aoki,Velho Penf。我的患者和患者综合征的验尸。与圣trop保罗一起修订。2019:61:3 8。 PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。 9。2019:61:38。PILGER DA,SPILKI FR,VV CANTARELLI。9。多重SYBR®绿色时间PCR(QPCR)测定法,用于检测和分化猫中的Bartonella Henselae和Bartonella clar-Ridgeiae。Rev Inst Med Trop Sao Paulo。2014; 56:93 --- 5。Birkenheuer AJ,Levy MG,Breitschwerdt EB。在犬类血液样本中的babesia gibsoni(亚洲基因型)和B. canis dna的检测和差异化的eminested PCR的开发和评估。J Clin Microbiol。 2003; 41:4172 --- 7。 10。 Diniz PPVP,Maggi RG,Schwartz DS,Cadenas MB,Bradley JM,Hegarty B等。 犬Bartonellisos:血清学和分子 -J Clin Microbiol。2003; 41:4172 --- 7。 10。 Diniz PPVP,Maggi RG,Schwartz DS,Cadenas MB,Bradley JM,Hegarty B等。 犬Bartonellisos:血清学和分子 -2003; 41:4172 --- 7。10。Diniz PPVP,Maggi RG,Schwartz DS,Cadenas MB,Bradley JM,Hegarty B等。犬Bartonellisos:血清学和分子 -
b埃及Sohag大学兽医学院生物化学系。 抽象背景:全国最普遍的慢性病之一是糖尿病。 它仍然是死亡的主要原因之一,因此重要的是创建源自没有任何负面影响的植物而产生的尖端,具有成本效益的共同处理技术。 先前的研究表明,豆瓣(Nasturtium officinale)具有抗炎,抗氧化剂和抗糖尿病特性。 目标:研究水瓶水提取物对葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和5'AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在链霉菌蛋白诱导糖尿病大鼠中的影响。 材料和方法:在本研究中使用了六十只健康的雄性白化病大鼠。 动物分为四个相等的组,每组15只大鼠。 第1组:(阴性对照),第2组:(糖尿病阳性对照,注射(45mg /kg体重)链霉菌素腹膜内腹膜内),第3组(糖尿病大鼠接受100毫克水疗水液 /kg水萃取液 /kg的体重8周,每天,每天接受4周的糖尿病重量(每天接受200毫克的水)potter potter potter potter potter potter potter potter fortercress todress k g rasters k rcress /k k k k ic k aq. 在实验的第2、4、6和第8周,在第2、4、6和第8周进行疤痕后收集血液,并在实验的第4周和第8周收集胰腺组织。 通过葡萄糖测量的空腹血糖,通过Elisa Kit.Trigyceride,LDL,HDL,HDL,肌酐,尿素,AST,AST和ALT测量胰岛素激素。 结论。 修订:2024年5月8日。 Osman。(2024)。b埃及Sohag大学兽医学院生物化学系。抽象背景:全国最普遍的慢性病之一是糖尿病。它仍然是死亡的主要原因之一,因此重要的是创建源自没有任何负面影响的植物而产生的尖端,具有成本效益的共同处理技术。先前的研究表明,豆瓣(Nasturtium officinale)具有抗炎,抗氧化剂和抗糖尿病特性。目标:研究水瓶水提取物对葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)和5'AMP激活的蛋白激酶(AMPK)在链霉菌蛋白诱导糖尿病大鼠中的影响。材料和方法:在本研究中使用了六十只健康的雄性白化病大鼠。动物分为四个相等的组,每组15只大鼠。第1组:(阴性对照),第2组:(糖尿病阳性对照,注射(45mg /kg体重)链霉菌素腹膜内腹膜内),第3组(糖尿病大鼠接受100毫克水疗水液 /kg水萃取液 /kg的体重8周,每天,每天接受4周的糖尿病重量(每天接受200毫克的水)potter potter potter potter potter potter potter potter fortercress todress k g rasters k rcress /k k k k ic k aq.在实验的第2、4、6和第8周,在第2、4、6和第8周进行疤痕后收集血液,并在实验的第4周和第8周收集胰腺组织。通过葡萄糖测量的空腹血糖,通过Elisa Kit.Trigyceride,LDL,HDL,HDL,肌酐,尿素,AST,AST和ALT测量胰岛素激素。结论。修订:2024年5月8日。Osman。(2024)。Osman。(2024)。SYBR绿色QPCR主混合物用于测量GLUT4,AMPK和β-肌动蛋白。结果:治疗的组在空腹血糖,甘油三酸酯,总胆固醇,LDL,HDL,HDL,肌酐,尿素,ALT和AST以及与对照相比,胰岛素激素的显着且逐渐增加。与考虑到水瓶作为糖尿病的替代治疗的对照组相比,第四组在4和8周时表现出显着且进行了渐进的GLUT4和AMPK基因的表达。水瓶水提取物对降低和维持正常葡萄糖水平有积极影响。关键字:糖尿病,豆瓣,基因表达,glut4,ampk。*通信:r.asafe@ut.edu.sa doi:10.21608/svuijm.2024.279536.1831收到:2024年3月29日。接受:2024年5月9日。出版:2024年5月12日,本文以:Reda S. Yousef,Sara R. Thabet,Nagwa S. Ahmed,Ahmed S.水瓶(nasturtium officinale)水提取物对糖尿病大鼠GLUT4和AMPK的基因表达的改善作用。SVU International医学科学杂志。第7卷,第1期,第686-697页。第7卷,第1期,第686-697页。