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HPV 血清学实验室 SOP 模板
试剂部分 # 5X 洗涤缓冲液 10 1X 洗涤缓冲液 11 HPV 包被缓冲液 12 DPBS 和 0.2% TWEEN® 20 (DPBS_0.2T) 13 2N H 2 SO 4 14 0.36NH 2 SO 4 15 柠檬黄溶液 16 293TT 解冻培养基 (293TT TM) 17 293TT 维持培养基 (293TT MM) 18 293TT 冷冻培养基 (293TT FM) 19 70% 乙醇 20 293TT VLP/PsV 转染培养基 (DMEM-TF/DMEM-10A) 21 293TT VLP 转染混合培养基 (DMEM 2%) 用于 Transporter 5 22 293TT VLP 转染混合培养基 (DMEM SF) 用于 PEI 23 DPBS-MGCl 2 10mM A/A (DPBS_MgCl_AA) 24 10% Brij58 25 DPBS/0.8M 盐缓冲液 (DPBS_0.8M) 26 46% OptiPrep 27 27% OptiPrep 28 33% OptiPrep 29 39% OptiPrep 30 293TT 假病毒中和试验培养基 (PBNA_M) 31 1M 硫酸铵 32 HPV VLP 转染裂解缓冲液 33 HPV 假病毒 (PsV) 转染裂解缓冲液 34 DPBS+1%BSA (稀释剂) 35 10% TWEEN® 20 (10_T20) 36 PBS+0.05% TWEEN® 20 (PBS_0.05T) 37 PEI 含5% 葡萄糖 (PEI) 38 DPBS/0.5M 盐缓冲液 (DPBS_0.5M) 39 50 MG Sulfo-NHS 40 DPBS+1% Triton X-100 (DPBS_1%TX) 41 50mM MES 42 组氨酸储存缓冲液 43 鞘液 44 PBST-BSA 缓冲液 (PBST_BSA_PAK) 使用干粉包 45 PBST-BSA 缓冲液 (PBST_BSA) 46 PBS+0.05% TWEEN® 20 (Luminex_Wash) 47 板涂层 48 封闭缓冲液 49 Luminex 珠储存缓冲液 50
LPA 海报 ASGCT 2023
A) RT4 细胞转染 312 pM TALEN mRNA 16 小时后的免疫荧光显微镜图像。B) RT4 细胞转染 TALEN mRNA 5 天后，通过 RT-qPCR 测量 LPA 转录本的剂量反应性减少。C) TALEN mRNA 转染后 RT4 全细胞裂解物中 Apo(a) 蛋白水平的毛细管电泳图像。D) TALEN mRNA 转染后 RT4 细胞的靶向基因编辑分析。通过基因组 DNA (gDNA) 模板的 PCR 扩增子的下一代测序 (NGS) 确定导致移码的插入和缺失的频率 (编辑百分比)。E) mRNA 序列优化的示意图。转染 TALEN-Ex3_v2 mRNA 后 RT4 全细胞裂解物中 Apo(a) 蛋白水平的毛细管电泳图像 (F) 和靶向基因编辑分析 (G)。
a d v an c in g b io m e dic a l r e se aCh
Aumsilence Asos是使用最先进的化学修饰设计和制造的，在没有转染试剂的情况下，可以高效的细胞递送，从而消除与脂质转染试剂和电动膜相关的细胞毒性。Aumsilence ASO具有有效的自我传递和出色的性能，并且在各种细胞类型，难以转化的原代细胞（B细胞，T细胞，T细胞，神经元等）中起作用。）以及体内研究模型。
将质粒 DNA 和杆状病毒 DNA 共转染（同源重组）到 SF9 细胞中
1. 每瓶接种 5x10 6 个 SF9 细胞，另留一个瓶作为阴性对照。2. 按照 A 部分中概述的方法，使用以下体积和量：10uL 杆状病毒 DNA（0.1ug/uL）2ug 质粒 DNA 1mL 转染缓冲液 B 5mL 未添加的 Grace 培养基洗涤液 1mL 转染缓冲液 A 5mL 未添加的 Grace 培养基洗涤液 7mL TMN/FH
肽官能化的脂质纳米颗粒，用于靶向的全身mRNA向大脑递送
摘要：大核酸（例如mRNA）向大脑的全身递送，部分原因是由于血脑屏障（BBB）和输送车辆在肝脏中积聚的趋势。在这里，我们设计了一个肽官能化的脂质纳米颗粒（LNP）平台，用于靶向mRNA向大脑的递送。我们利用点击化学来用肽在脑内皮细胞和神经元中靶向过表达的肽，即RVG29，T7，AP2和MAPOE肽。我们评估了LNP靶向在体外对脑内皮和神经元细胞转染的影响，研究了血清蛋白吸附，细胞内运输，内皮胞质症和外体分泌等因素。最后，我们表明LNP肽功能化增强了小鼠脑中的mRNA转染并减少全身给药后的肝输送。具体而言，RVG29 LNP改善了体内神经元转染，确立了其作为将mRNA传递给大脑的非病毒平台的潜力。关键字：脂质纳米颗粒，mRNA，肽，脑输送，血脑屏障，神经元
抗原呈递细胞模拟脂质纳米粒子用于快速 mRNA CAR T 细胞癌症免疫治疗
嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞疗法在治疗血液系统恶性肿瘤方面取得了显著的临床成功。然而，生产这些定制的抗癌细胞是一个复杂的体外过程，涉及白细胞分离术、人工 T 细胞活化和 CAR 构建体的引入。活化步骤需要 CD3/TCR 和 CD28 的参与，对 T 细胞转染和分化至关重要。虽然抗原呈递细胞 (APC) 促进体内活化，但体外活化依赖于与磁珠结合的抗 CD3 和 CD28 抗体。虽然这种人工活化是有效的，但它增加了 CAR T 细胞生产的复杂性，因为在临床实施之前必须去除磁珠。为了克服这一挑战，这项工作开发了模拟 APC 的活化脂质纳米颗粒 (aLNP)，以结合磁珠的活化和 LNP 的转染能力。结果表明，aLNPs 能够一步激活和转染原代人类 T 细胞，产生的 mRNA CAR T 细胞可减轻小鼠异种移植模型中的肿瘤负担，验证 aLNPs 是快速生产 mRNA CAR T 细胞的有前景的平台。
热爱创新
PSC 和神经元细胞培养 Essential 8 培养基 500 mL A1517001 StemFlex 培养基 500 mL A3349401 StemScale PSC 悬浮培养基 1 L A4965001 B-27 Plus 添加剂 10 mL A3582801 Neurobasal Plus 培养基 500 mL A3582901 蛋白表达系统 Expi293 表达系统试剂盒 1 套 A14635 ExpiCHO 表达系统试剂盒 1 套 A29133 ExpiSf 表达系统入门试剂盒 1 套 A38841 Expi293 GnTI 表达系统试剂盒 1 套 A39250 Expi293 诱导表达系统 1 套 A39251 Expi293 诱导 GnTI 表达系统试剂盒 1 套 A39252 CTS 产品 CTS Essential 8 培养基 500 mL A2656101 CTS 氙气电穿孔系统1 个系统 A50301 CTS Rotea 逆流离心系统 1 个系统 A44769 CTS NK-Xpander 培养基 500 mL A5019001 CTS AIM V 培养基，不含酚红，不含抗生素 2 L A4672701 CTS AIM V SFM 1,000 mL 0870112DK CTS LV-MAX 慢病毒生产系统 1 套 A35684 CTS OpTmizer Pro SFM 1 L A4966101 CTS 病毒生产培养基 1 L A5144001 CTS 病毒生产细胞 2.0 1.5 mL A48400 CTS AAV-MAX 转染试剂盒 用于 1 L 生产 A5427701 CTS AAV-MAX 裂解缓冲液 100 mL A5152101 转染产品 Lipofectamine 3000 转染试剂0.1 毫升 L3000001 Neon NxT 电穿孔系统入门包 1 套件 NEON1SK 根据您的需求在 thermofisher.com/transfectionselect 查找转染产品
CRISPR-SNIPER 基因编辑白皮书
除了用作筛选和分析工具外，将 SNIPER 添加到 CRISPR-Cas 系统还可用于促进该技术设计和交付阶段所需的优化步骤。可以在棋盘内的不同培养条件下评估组件设计、多组件交付和转染策略，以优化和选择细胞类型和转染条件的最佳组合，从而无需在预分析阶段进行多个优化步骤。至关重要的是，通过应用 CRISPR-SNIPER，可以在工作流程的早期阶段确定成功或失败，确保将不成功的基因编辑尝试的时间和成本保持在最低限度。