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基于CRISPR-Cas的工具的开发和应用
成簇的规律间隔的短回文重复序列-CRISPR相关（CRISPR-Cas）系统作为细菌和古菌中一种重要的RNA引导的适应性免疫系统，其功能是防御病毒、质粒和转座子等移动遗传元件（MGEs）的侵害（Sorek et al., 2013; Faure et al., 2019; Koonin and Makarova, 2019; Makarova et al., 2019）。CRISPR位点由Cas基因和CRISPR阵列组成。CRISPR-Cas系统的功能主要分为三个阶段。第一阶段是适应阶段，Cas蛋白如Cas1和Cas2将外来的原型间隔序列插入到CRISPR阵列中，使其成为新的间隔物。第二阶段为表达阶段，CRISPR阵列转录为前CRISPR RNA（crRNA），随后加工为成熟的crRNA。最后是干扰阶段，crRNA引导CRISPR效应蛋白裂解病毒、质粒等外来靶序列（Barrangou et al., 2007; Brouns et al., 2008）。此前人们认为CRISPR系统仅存在于细菌和古菌中，但最近在巨型噬菌体中发现，CRISPR系统缺少适应阶段所需的Cas蛋白，如Cas1、Cas2和Cas4，而相应的效应蛋白也具备基因编辑能力（Al-Shayeb et al., 2020; Pausch et al., 2020）。这些CRISPR-Cas系统可能靶向宿主基因组，调控宿主基因表达，增强噬菌体的生存力（Al-Shayeb et al.，2020）。CRISPR-Cas系统与MGEs竞争，促进了CRISPR-Cas系统的进化，大大增加了其多样性（Koonin and Makarova，2019）。目前的CRISPR-Cas系统根据效应模块分为1类和2类（Makarova et al.，2015）。1类系统具有由多个Cas蛋白组成的效应模块，包括3种类型和16种亚型，而2类系统包含一个大蛋白，包括3种类型和17种亚型（Makarova et al.，2019）。在过去的十年中，CRISPR-Cas系统已经发展成为多种编辑工具。由于1类成员的复杂性，目前开发的基因编辑工具较少（Özcan等人，2021；Dolan等人，2019；Cameron等人，2019）。目前，2类成员正在被开发成大量的基因编辑工具。2类系统分为三类，包括II型、V型和
2019 年 9 月/10 月第 44 卷第 5 期 445–556 - Allen Press
社论 445 特邀社论 ST Grennell 临床技术/病例报告 446 在直接 II 类复合树脂修复中使用透明尖端获得紧密的近端接触 V Alonso • M Caserio • IL Darriba 临床研究 452 瓷贴面牙齿的牙龈健康：回顾性评估 R Arif • JB Dennison • D Garcia • P Yaman 459 漂白凝胶储存温度对牙齿颜色和敏感度影响的临床研究 D Hortkoff • B Fortes Bittencourt • J Mendes Nadal • OM Mongruel Gomes • M Rezende • PB de Almeida Farhat 469 含偏磷酸钠的口香糖对咖啡渍的增白效果：安慰剂对照、双盲原位检查 S Makino • C Kawamoto • T Ikeda • T Doi • A Narise • T Tanaka • C Almas • M Hannig • R Carvalho • H Sano 476 简化粘合系统在 2 年随访中对非龋性颈部病变的粘合性能：一项双盲随机临床试验 RF Zanatta • TM Silva • MALR Esper • E Bresciani • SEP Gonçalves • TMF Caneppele 实验室研究 488 使用复合材料分层技术掩盖变色背景：老化后掩盖能力的颜色分析 - 第二部分 BG Perez • LL Miotti • AH Susin • LB Durand 499 CQ 胺和 TPO 的组合增加了聚合收缩应力并且没有改善大块填充复合材料的固化深度 MG Rocha • DCRS de Oliveira • MAC Sinhoreti • JF Roulet • AB Correr 510 通用粘合系统应用于酸蚀冲洗和自酸蚀策略对天然牙本质龋齿的粘合系统 V Hass • AFM Cardenas • FSF Siqueira • RR Pacheco • PMW Zago • DO Silva • MC Bandeca • AD Loguercio 521 一种使用紫光进行牙齿漂白的新方法，使用或不使用美白凝胶：漂白效果研究 MO Gallinari • TC Fagundes • LM da Silva • MB de Almeida Souza • ACS Barboza • ALF Briso 530 传统和酸改性酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙霜对酸刺激前后牙本质渗透性的影响 K Kijsamanmith • D Banomyong • MF Burrow • P Kanchanasantikul • S Wipawiwat • S Srikam • S Laojarungphesatchakorn 536高透明度树脂基复合材料 YB Piccoli • VP Lima • GR Basso • VE Salgado • GS Lima • RR Moraes 545 热机械循环后自粘树脂水泥与蚀刻玻璃化氧化钇稳定四方氧化锆多晶陶瓷的粘结强度稳定性 EV Maroun • JGA Guimarães • WG de Miranda Jr • LRC Netto • AB Elias • EM da Silva 部门 556 仅在线文章 仅在线文章 E212 使用即时或延迟牙本质封闭粘结的锂二硅酸盐后牙部分冠存活率的前瞻性随机临床试验：对牙齿敏感性和患者满意度的短期结果 C van den Breemer • MMM Gresnigt • M Özcan • W Kerdijk • MS Cune E223 大体积填充和自粘树脂复合材料的水解和生物降解 OFF de Brito • ILM de Oliveira • GQM Monteiro E234 氟化漆防龋功效的体外研究 L Al Dehailan • EA Martinez-Mier • GJ Eckert • F Lippert E244 不同厚度的陶瓷整体系统的机械行为 D Longhini • COM Rocha • LT de Oliveira • NG Olenscki • EA Bonfante • GL Adabo E254 热循环对 CAD/CAM、大体积填充和传统树脂复合材料双轴弯曲强度的影响 EB Benalcázar Jalkh • CM Machado • M贾尼尼·I·贝尔特拉米尼·MMT·皮萨·PG·科埃略·R·平田·EA·邦凡特
咖啡热循环后先进锂二硅酸盐陶瓷的半透明度、颜色稳定性和双轴弯曲强度
1. Aziz A、El-Mowafy O、Paredes S。使用 CAD/CAM 技术制作的锂二硅酸盐玻璃陶瓷冠的临床结果：系统评价。Dent Med Probl。2020；57(2)：197-206。2. Marchesi G、Camurri Piloni A、Nicolin V、Turco G、di Lenarda R。椅旁 CAD/CAM 材料：临床应用的当前趋势。生物学。2021；10(11)：1170。3. Stawarczyk B、Özcan M、Trottmann A、Schmutz F、Roos M、Hämmerle C。CAD/CAM 树脂块及其牙釉质拮抗剂的双体磨损率。J Prosthet Dent。2013；109(5)：325-332。 4. Arif R、Yilmaz B、Johnston WM。用于层压贴面和全冠的 CAD-CAM 修复材料的体外颜色染色性和相对半透明度。J Prosthet Dent。2019；122(2)：160-166。5. Corado HPR、da Silveira P、Ortega VL 等人。用于 CAD/CAM 的基于锂二硅酸盐和氧化锆增强锂硅酸盐的玻璃陶瓷的抗弯强度。Int J Biomater。2022；2022：1-9。6. Chen Y、Yeung AWK、Pow EHN、Tsoi JKH。锂二硅酸盐在牙科中的现状和研究趋势：文献计量分析。J Prosthet Dent。2021；126(4)：512-522。 7. Abad-Coronel C、Ordoñez Balladares A、Fajardo JI、Martín Biedma BJ。使用 CAD/CAM 系统制造并使用不同热单元和程序结晶的锂二硅酸盐长石修复体的抗断裂性。材料。2021；14(12)：3215。8. Lubauer J、Belli R、Peterlik H、Hurle K、Lohbauer U。把握锂的炒作：洞察现代牙科锂硅酸盐玻璃陶瓷。Dent Mater。2021；38：318-332。9. Gürdal I、Atay A、Eichberger M、Cal E、Üsümez A、Stawarczyk B。热循环后 CAD-CAM 材料和复合树脂水泥的颜色变化。J Prosthet Dent。 2018；120(4)：546-552。10. Phark JH、Duarte S Jr。新型锂二硅酸盐玻璃陶瓷的微观结构考虑因素：综述。牙科美学修复杂志。2022；34(1)：92-103。11. Stawarczyk B、Mandl A、Liebermann A。现代 CAD/CAM 硅酸盐陶瓷及其半透明度以及水热老化对半透明度、马氏硬度、双轴抗弯强度和可靠性的影响。机械行为生物医学材料杂志。2021；118：104-456。12. Gunal B、Ulusoy MM。不同厚度的当代单片 CAD-CAM 修复材料的光学特性。牙科美学修复杂志。2018；30(5)：434-441。 13. Sen N、Us YO。整体式 CAD-CAM 修复材料的机械和光学性能。J Prosthet Dent。2018；119(4)：593-599。14. Kurt M、Banko glu Güngör M、Karakoca Nemli S、Turhan BB。上釉方法对硅酸盐陶瓷光学和表面性能的影响。J Prosthodont Res。2020；64(2)：202-209。15. Donmez MB、Olcay EO、Demirel M。纳米锂二硅酸盐陶瓷在不同老化过程后的抗负载失效性能和光学特性。材料。2022；15(11)：4011。 16. Subas¸ ı MG、Alp G、Johnston WM、Yilmaz B. 厚度对单片 CAD-CAM 陶瓷光学特性的影响。J Dent。2018；71：38-42。17. Çakmak G、Donmez MB、Kashkari A、Johnston WM、Yilmaz B。厚度、水泥色度和咖啡热循环对氧化锆增强锂硅酸盐陶瓷光学性能的影响。J Esthet Restor Dent。2021；33(8)：1132-1138。18. Zarone F、Ruggiero G、Leone R、Breschi L、Leuci S、Sorrentino R。氧化锆增强锂硅酸盐 (ZLS) 的机械和生物学性能：文献综述。J Dent。2021；109：103661。
讲座
m 3讲座的开始，讲座开始讲座的开始，讲座开始M 3 S 1 1 1 1 1 ########疾病医学300_V泌尿生殖系统疾病委员会介绍函数。üyesialper西manoğlum 3 s 1 1 #######üyesifulyaKüçükcuncankurtm 3 S 1 1 1 #######üyesifulyaKüçükcoukukcankurtm 3 s 1 1 ########所有教授AydınBarlasM 3 S 1 1 1 ###### 300_v泌尿生殖系统疾病讲座医学遗传学不育症的遗传原因i是Öğr博士。üyesifulyaKüçükcankurtm 3 S 1 1 #######üyesialper的İşmanoğluMm 3 s 1 1 ####### Öğr。üyesialper的İşmanoğlum 3 s 1 1 #######üyesialper的manoğlum 3 s 1 1 #######üyesialper的İSmanoğluMm 3 s 1 1 ########妇科正常和异常劳动，所有博士。üyesisuatsüphanErşahínM3 S 1 1 #######üyesisuatsüphanErşahínM3 S 1 1 1 #######üyesisuatsüphanErşahínM3 S 1 1 1 #######üyesifulyaKüçükcoukukcankurtm 3 s 1 1 ########临床科学体系系统疾病简介MED 300_V泌尿生殖系统疾病植物学系统的放射学放射学检查（2/2）所有教授ErcanKocakoçM 3 S 1 M 3 S 1 M 3 S 1 M 3 S 1 1 1 1 ######### PAP涂片，双人检查所有Öğr博士。üyesiSüleymanEserdağM3 S 1 1 #######üyesiSüleymanEserdağM3 S 1 1 #######üyesiSüleymanEserdağM3 S 1 1 #######üyesisuatsüphanErşahínm 3 s 1 M 3 S 1 M 3 S 1 1 1 #######临床科学体系系统疾病简介300_V泌尿生殖系统疾病讲座医学药理学药物，影响子宫和勃起功能障碍所有教授AydınBarlas博士M 3 S 1 1 1 1 1 ##########小管和际块状所有教授AhmetMİDİM3 S 1 1 1 ####### 300临床科学体型系统疾病疾病MED 300_V中午3 S 1 1 1 #######临床科学身体系统疾病MED 300_V泌尿生殖系统疾病讲座医学遗传学y染色体y r.R博士。üyesiSüleymanEserdağM3 S 1 1 #######üyesiAyşetJaneIonözcanm 3 s 3 s 3 3 #######üyesiAyşetJaneIzcan m 3 S 3 3 3 ####### üyesiAyşetJaneIzcan m 3 S 3 3 3 ####### üyesisibelüstünelm 3 S 4 4 4 ####### üyesisibelüstünelm 3 S 4 4 ####### üyesisibelüstünelM 3 S 4 4 4 ####### üyesiBetülözbekM 3 S 5 1 #######üyesiAyşetJaneIzcan m 3 S 3 3 3 #######üyesiAyşetJaneIzcan m 3 S 3 3 3 #######üyesisibelüstünelm 3 S 4 4 4 #######üyesisibelüstünelm 3 S 4 4 #######üyesisibelüstünelM 3 S 4 4 4 #######üyesiBetülözbekM 3 S 5 1 #######üyesiBetülözbekM 3 S 5 1 #######üyesiBetülözbekm 3 S 5 1 ####### 12:40 MED 300临床科学体系系统疾病简介MED 300_VI中午3 S 5 S 5 1 ######## 1 #######肝疾病的讲座医学生物化学生化评估ii是Öğr博士。GörkemözgenM 3 S 5 1 ######## wednesd 14:40 Med 300临床科学体型系统疾病简介MED 300_VI胃肠道系统＆Disection＆Decution General Surgie Gerage Gruenth Surgery急性腹部All UZM。üyesiBetülözbekm 3 S 5 1 #######胃肠道系统和研究时间学习小时学习小时学习小时M 3 S 5 1 ######和体育技能练习G1教授EfseröztaşM3 S 5 S 5 1 ####### 300_VI中午M 3 S 5 1 ########星期三13:40 MED 300临床科学体型系统疾病简介MED 300_VI胃肠道系统＆Dise and Distecter and Decut necut General Surgergery Alt Alt uzm。GörkemIzgenM 3 S 5 1 ####### HOUR STUDY HOUR STUDY HOUR M 3 S 5 M 3 S 5 1 ######## THURSDAY 08:40 MED 300 INTRODUCTION TO CLINICAL SCIENCES-BODY SYSTEM DISEASES MED 300_VI GASTROINTESTINAL SYSTEM & DIS STUDY HOUR STUDY HOUR STUDY HOUR M 3 S 5 1 ######## THURSDAY 09:40 MED 300 INTRODUCTION TO CLINICAL SCIENCES-BODY SYSTEM DISEASES MED 300_VI GASTROINTESTINAL SYSTEM & DIS Lecture Medical git中的遗传遗传疾病所有博士。üyesifulyaKüçükcoukukcankurtm 3 s 5 1 ######## 11:40 MED 300临床科学系统疾病简介300_VI胃肠道系统和疾病讲座医学病理学自身免疫性胃炎，消毒性溃疡疾病均为AhmetMídiM 3 S 5 S 5 1 ########## #######胃肠道系统与迪斯研究小时学习小时研究小时M 3 S 5 1 ########星期四15:40 Med 300临床科学体型系统疾病简介MED 300_VI胃肠道系统＆Dis Dise System＆Dis and Dise研究小时研究小时研究小时
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为什么加拿大制造的Laribee吉他好？ Laribee吉他于1968年在加拿大多伦多开始制造，并于1977年搬到加拿大环太平洋沿岸的不列颠哥伦比亚省维多利亚，创造了我们独特的吉他。声音使用来自高森林的优质云杉和雪松。 当它于 20 世纪 70 年代末传入日本时，其高品质令人惊叹，并获得了想要像 Martin 和 Gibson 那样细腻声音的用户的支持。精美的镶嵌作品是Larrivee吉他的特色之一，是由Gene Larrivee的妻子Wendy创作的。今天十年级的情况仍然如此。 20 世纪 70 年代末，包括他的妻子 Wendy 在内的 8 名工匠每月生产约 30 瓶葡萄酒。 这一时期的吉他据说是Laribee的黄金时代，抵达日本的少数10级吉他售价超过了Martin的D-45。我想可以说，这为Somogi这样的手工吉他今天被日本乐迷所接受奠定了基础。 除了产品的质量和声音的质量之外，还应该考虑民族主义的方面。虽然他们的销量不如Martin和Gibson，但他们很早就在努力表达自己的加拿大特色，并且一直讲究在加拿大生产产品。他们融入了当时不符合美国时尚的东西，例如“木质装订”、“制作精美的玫瑰花饰”、“透明护板”和“具有欧洲文艺复兴风格的镶嵌设计”。这种叛逆精神吸引了那些厌倦了美国文化消极方面（例如越南战争和全球化）的人们。有一个轶事，在吉他发展的早期，一位美国自由主义音乐家在听到有关Laribee吉他的谣言后，在多伦多的街道上徘徊，寻找一把Laribee吉他。 2001 年 9 月，Larrivee 搬迁至加利福尼亚州的一家新工厂，以进一步扩张。由于美国市场是他们最大的客户，该公司自然希望降低出口成本。然而，这让粉丝们非常失望，他们认为这是一把值得骄傲的加拿大吉他，而不是前面提到的美国吉他，这一事实是有意义的。日本粉丝也是如此。如果您想要一把来自美国西海岸的吉他，泰勒吉他就足够了。未能立即提高加州工厂的质量也增加了现有粉丝的失望。 目前，创始人吉恩·拉里维（Gene Larrivee）、他的妻子温迪（Wendy）、次子马修（Matthew）和女儿克里斯汀（Christine）在加利福尼亚州的一家工厂工作。长子吉恩·拉里维 (Gene Larrivee Jr.) 负责加拿大温哥华的工厂。独自留在加拿大的他对于在工厂度过的时光有何感想？ 我无从了解他个人的挣扎，但他回应了我的评论“加拿大制造的10级吉他很好”，并为《LAST GUITAR》的开场制作了一把吉他，我不禁认为有。这不仅仅是简单地接受请求。熟练的工匠在一条单独的生产线上工作。 是的，我想他想证明这一点。自豪地在加拿大制造。第一批已经到了。使用温迪的镶嵌物，图案为留在加拿大的阿拉丁和神灯精灵，以及 AAA 级核心。
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