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World File Search System丙酮酸
在牛模型中通过 CRISPR/Cas9 技术修饰 TFAM 基因的后编辑细胞的表征
为了增加知识，必须深入研究大型动物模型中的基因编辑，以便将来将其应用于转化医学和食品生产。线粒体转录因子 A（TFAM）是 HMGB 亚家族的成员，可与 mtDNA 启动子结合。该基因维持 mtDNA，并且对于 mtDNA 转录的起始至关重要。最近，我们通过 CRISPR/Cas 9 技术破坏牛成纤维细胞中的 TFAM 基因，生成了一种新的细胞系。我们通过生成杂合突变克隆证明了 CRISPR/Cas9 设计是有效的。在这种情况下，一旦该基因调节 mtDNA 复制特异性，该研究旨在确定后编辑细胞是否能够在体外维持，并评估它们在培养中连续传代后是否会出现 mtDNA 拷贝数和线粒体膜电位的变化。编辑后的细胞在培养中扩增，我们进行了生长曲线、倍增时间、细胞活力、线粒体 DNA 拷贝数和线粒体膜电位测定。编辑过程并没有使细胞培养变得不可行，尽管与对照组相比，细胞生长率和活力有所下降，因为我们观察到在补充有尿苷和丙酮酸的培养基中培养时，细胞生长良好。它们还表现出典型的成纤维细胞样外观。用于确定 mtDNA 拷贝数的 RT-qPCR 表明，与不同细胞代次中未编辑的克隆（对照）相比，编辑后的克隆有所减少。用 Mitotracker Green 和 red 进行细胞染色表明，与未编辑的细胞相比，编辑后的细胞中的红色荧光有所减少。因此，通过表征，我们证明了 TFAM 基因对于线粒体的维持至关重要，因为它会干扰不同细胞传代中线粒体 DNA 拷贝数和膜电位的稳定性，从而证实了杂合编辑的细胞中线粒体活性的降低。
在牛模型中通过 CRISPR/Cas9 技术修饰 TFAM 基因的后编辑细胞的表征
为了增加知识，必须深入研究大型动物模型中的基因编辑，以便将来将其应用于转化医学和食品生产。线粒体转录因子 A（TFAM）是 HMGB 亚家族的成员，可与 mtDNA 启动子结合。该基因维持 mtDNA，并且对于 mtDNA 转录的起始至关重要。最近，我们通过 CRISPR/Cas 9 技术破坏牛成纤维细胞中的 TFAM 基因，生成了一种新的细胞系。我们通过生成杂合突变克隆证明了 CRISPR/Cas9 设计是有效的。在这种情况下，一旦该基因调节 mtDNA 复制特异性，该研究旨在确定后编辑细胞是否能够在体外维持，并评估它们在培养中连续传代后是否会出现 mtDNA 拷贝数和线粒体膜电位的变化。编辑后的细胞在培养中扩增，我们进行了生长曲线、倍增时间、细胞活力、线粒体 DNA 拷贝数和线粒体膜电位测定。编辑过程并没有使细胞培养变得不可行，尽管与对照组相比，细胞生长率和活力有所下降，因为我们观察到在补充有尿苷和丙酮酸的培养基中培养时，细胞生长良好。它们还表现出典型的成纤维细胞样外观。用于确定 mtDNA 拷贝数的 RT-qPCR 表明，与不同细胞代次中未编辑的克隆（对照）相比，编辑后的克隆有所减少。用 Mitotracker Green 和 red 进行细胞染色表明，与未编辑的细胞相比，编辑后的细胞中的红色荧光有所减少。因此，通过表征，我们证明了 TFAM 基因对于线粒体的维持至关重要，因为它会干扰不同细胞传代中线粒体 DNA 拷贝数和膜电位的稳定性，从而证实了杂合编辑的细胞中线粒体活性的降低。
在T细胞恶性肿瘤中代谢重新布线的调节剂
褪黑激素（N-乙酰基-5-甲氧基氨胺）吲哚胺会发挥多割作用，并调节与昼夜节律，免疫调节和季节性繁殖有关的许多细胞途径和分子靶标，包括T细胞恶性期间的代谢复活。t细胞恶性肿瘤包含一组血液癌，其特征是恶性T细胞的生长和增殖。这些癌细胞表现出独特的代谢适应性，这是癌症的标志，因为它们可以重新连接其代谢途径，以满足恶性肿瘤所必需的能量需求和生物合成的增强，这是Warburg效应，其特征在于朝着糖酵解的转变，即使氧气也可以使用。此外，T细胞恶性肿瘤通过抑制丙酮酸酶脱氢酶激酶（PDK）而导致代谢转移，从而导致乙酰基COA酶产生和细胞糖酵解活性增加。此外，褪黑激素在负责营养摄取和代谢重新布线的必需转运蛋白（GLUT1，GLUT2）的表达中起调节作用，例如T细胞中的葡萄糖和氨基酸转运蛋白。这种调节显着影响T细胞的代谢性，因此影响了它们的分化。此外，已经发现褪黑激素调节参与T细胞激活的临界信号分子的表达，例如CD38和CD69。这些分子是T细胞粘附，信号传导和激活不可或缺的。本综述旨在提供有关褪黑激素抗癌特性机制，涉及在T细胞恶性肿瘤期间代谢的机理。本综述涵盖了致癌因子的参与，肿瘤微环境和代谢改变，标志，代谢重编程以及褪黑激素对各种癌细胞的抗核/癌症影响。
靶向谷氨酰胺溶解显示出在泼尼松龙敏感的和代谢重新连接的抗泼尼松龙的抗性B细胞儿童急性急性淋巴细胞性白血病细胞
摘要：复发儿童急性淋巴细胞白血病（CALL）的患者的预后仍然很差。治疗失败的主要原因是耐药性，最常见于糖皮质激素（GC）。泼尼松龙敏感和耐药性淋巴细胞之间的分子差异未得到充分研究，从而排除了新型和靶向疗法的发展。因此，这项工作的目的是阐明匹配的GC敏感和耐药细胞系之间分子差异的至少某些方面。为解决这个问题，我们进行了整合的转录组和代谢组学分析，该分析表明，缺乏对泼尼松龙的反应可能是由于氧化磷酸化，糖溶解，氨基酸，丙酮酸和核苷酸生物合成的变化而受到的基础，以及MTORC1和MyC的激活以及Myc的激活，以及Myc的激活，以及Myc的激活。试图通过三种不同的策略探索我们分析中抑制一种打击的潜在治疗作用，以三种不同的策略为目标，它们针对谷氨酰胺 - 谷氨酸 - α-酮戊二酸轴轴，所有策略都受损了，这些策略都受损了，这些策略受损，线粒体呼吸和ATP产生和诱导了凋亡。因此，我们报告说，泼尼松龙的抗性可能伴随着相当大的转录和生物合成程序的重新布线。在这项研究中确定的其他可药物靶标的抑制作用抑制谷氨酰胺代谢在GC敏感的敏感性中呈现了一种潜在的治疗方法，但更重要的是，在GC耐药的呼叫细胞中。最后，在复发的背景下，这些发现可能在临床上具有相关性 - 在公开可用的数据集中，我们发现基因表达模式表明，体内耐药性的特征在于与我们在体外模型中发现的相似代谢失调。
胰岛素诱发的反复低血糖上调化学诱发糖尿病大鼠大脑皮层葡萄糖代谢
摘要：糖尿病是一种严重危害人类健康的慢性代谢疾病。各种研究都强调了维持大脑充足的葡萄糖供应并随后保障大脑葡萄糖代谢的重要性。本研究的目的是阐明和揭示长期高血糖背景下反复低血糖引起的代谢改变，以进一步了解除大脑损害之外的影响。为此，化学诱发的糖尿病大鼠经历了反复胰岛素诱发的低血糖发作。通过分光光度法测量了大脑皮层组织提取物或分离的线粒体中糖酵解、戊糖磷酸途径和克雷布斯循环的关键酶的活性。使用蛋白质印迹分析来测定葡萄糖和单羧酸转运蛋白的蛋白质含量，它们是胰岛素信号通路和线粒体生物合成和动力学的参与者。我们观察到复发性低血糖会上调线粒体己糖激酶和克雷布斯循环酶（即丙酮酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶）的活性以及线粒体转录因子 A (TFAM) 的蛋白水平。这两种损伤都会增加核因子红细胞 2 相关因子 2 (NRF2) 的蛋白含量，并引起线粒体动力学的不同影响。发现胰岛素信号下游通路被下调，并且发现糖原合酶激酶 3 beta (GSK3 β ) 通过 Ser9 磷酸化降低和 Y216 磷酸化增加而被激活。有趣的是，低血糖和/或高血糖不会导致在神经元可塑性和记忆中起关键作用的 cAMP 反应元件结合蛋白 (CREB) 水平发生变化。这些发现提供了实验证据，表明在慢性高血糖的情况下，复发性低血糖能够引发大脑皮层的协调适应性反应，最终有助于维持脑细胞健康。
药物交付科学与技术杂志
在二元聚合物系统中结合疏水聚合物，例如多丙酮酸酮（PCL）以及氢氨聚合物聚合物氧化物（PEO），可以通过允许出色的治疗性释放，抗微生物的可能性来实现生物医学工程中的一系列新型应用。在这项工作中，PCL和PEO均以六个不同的比例以15 W/V％溶解在氯仿中，以制备二元聚合物溶液。测量了奇异和二元聚合物溶液的流变特性，并使用加压回旋旋转纤维。使用扫描电子显微镜（SEM）研究了制备材料的纤维形态。通过将样品浸入去离子水中，使用光学显微镜开发并分析具有不同肿胀行为的二元聚合物纤维。结果用于鉴定氯仿中最佳的PCL：PEO二进制混合物。用布洛芬（IBP）的奇异/二元聚合物复合材料的化学组成通过傅立叶转换红外光谱（FTIR）进行了表征，并使用差分扫描量热法（DSC）检查了热分析。对PEO - IBP的体外研究在40 s中表现出90％的即时释放率，而PCL - IBP和PCL：PEO - PEO - IBP揭示了持续的释放，分别在72小时内持续释放87 - 96％。 结果用于讨论在生物医学应用中二元聚合物系统的潜在用途。对PEO - IBP的体外研究在40 s中表现出90％的即时释放率，而PCL - IBP和PCL：PEO - PEO - IBP揭示了持续的释放，分别在72小时内持续释放87 - 96％。结果用于讨论在生物医学应用中二元聚合物系统的潜在用途。
使用干细胞种子定制植入物在猫骨中处理大骨缺陷
Berner，A.，Henkel，J.，Woodruff，M.A.，Steck，R.，Nerlich，M.，Schuetz，M.A。，＆Hutmacher，D.W。（2015）。 延迟的微创注入同种异性骨髓基质细胞表可再生卵临床动物模型中的大骨缺陷。 干细胞转化医学，4（5），503-512。 Cheong，V。S.，Fromme，P.，Mumith，A.，Coathup，M.J。，＆Blunn，G。W.（2018）。 新型的自适应有限元算法，以预测添加剂生产的多孔植入物中的骨向内生长。 生物医学材料的机械行为杂志，87，230-239。 doi：https：//doi.org/10.1016/j.jmbbm.2018.07.019 Cipitria，A.，Reichert，J.C.，Epari，D.R.，D.R.，Saifzadeh，S. 。 。 Hutmacher，D。W.（2013）。 多丙酮酸支架和降低的RHBMP-7剂量，用于在绵羊胫骨中再生。 生物材料，34（38），9960-9968。 Dimitriou，R.，Jones，E.，McGonagle，D。和Giannoudis，P。V.（2011）。 骨骼再生：当前的概念和未来的方向。 BMC Medicine，9（1），66。DOI：10.1186/1741-7015-9-66 Emara，K。M.，Diab，R。A.和Emara，A。K.（2015）。 裂缝非工会管理的最新生物学趋势。 世界骨科杂志，6（8），623-628。doi：10.5312/wjo.v6.i8.623 Fitzpatrick，N.，Sajik，D。，＆Farrell，M。（2013）。 猫胸腔关节固定术使用根据经皮板关节固定术的原理应用的前轮廓背板。 兽医和比较骨科与创伤学，26（05），399-407。 当前的干细胞研究与治疗，3（4），254-264。Berner，A.，Henkel，J.，Woodruff，M.A.，Steck，R.，Nerlich，M.，Schuetz，M.A。，＆Hutmacher，D.W。（2015）。延迟的微创注入同种异性骨髓基质细胞表可再生卵临床动物模型中的大骨缺陷。干细胞转化医学，4（5），503-512。Cheong，V。S.，Fromme，P.，Mumith，A.，Coathup，M.J。，＆Blunn，G。W.（2018）。 新型的自适应有限元算法，以预测添加剂生产的多孔植入物中的骨向内生长。 生物医学材料的机械行为杂志，87，230-239。 doi：https：//doi.org/10.1016/j.jmbbm.2018.07.019 Cipitria，A.，Reichert，J.C.，Epari，D.R.，D.R.，Saifzadeh，S. 。 。 Hutmacher，D。W.（2013）。 多丙酮酸支架和降低的RHBMP-7剂量，用于在绵羊胫骨中再生。 生物材料，34（38），9960-9968。 Dimitriou，R.，Jones，E.，McGonagle，D。和Giannoudis，P。V.（2011）。 骨骼再生：当前的概念和未来的方向。 BMC Medicine，9（1），66。DOI：10.1186/1741-7015-9-66 Emara，K。M.，Diab，R。A.和Emara，A。K.（2015）。 裂缝非工会管理的最新生物学趋势。 世界骨科杂志，6（8），623-628。doi：10.5312/wjo.v6.i8.623 Fitzpatrick，N.，Sajik，D。，＆Farrell，M。（2013）。 猫胸腔关节固定术使用根据经皮板关节固定术的原理应用的前轮廓背板。 兽医和比较骨科与创伤学，26（05），399-407。 当前的干细胞研究与治疗，3（4），254-264。Cheong，V。S.，Fromme，P.，Mumith，A.，Coathup，M.J。，＆Blunn，G。W.（2018）。新型的自适应有限元算法，以预测添加剂生产的多孔植入物中的骨向内生长。生物医学材料的机械行为杂志，87，230-239。 doi：https：//doi.org/10.1016/j.jmbbm.2018.07.019 Cipitria，A.，Reichert，J.C.，Epari，D.R.，D.R.，Saifzadeh，S.。。Hutmacher，D。W.（2013）。多丙酮酸支架和降低的RHBMP-7剂量，用于在绵羊胫骨中再生。生物材料，34（38），9960-9968。Dimitriou，R.，Jones，E.，McGonagle，D。和Giannoudis，P。V.（2011）。骨骼再生：当前的概念和未来的方向。BMC Medicine，9（1），66。DOI：10.1186/1741-7015-9-66 Emara，K。M.，Diab，R。A.和Emara，A。K.（2015）。裂缝非工会管理的最新生物学趋势。世界骨科杂志，6（8），623-628。doi：10.5312/wjo.v6.i8.623 Fitzpatrick，N.，Sajik，D。，＆Farrell，M。（2013）。猫胸腔关节固定术使用根据经皮板关节固定术的原理应用的前轮廓背板。兽医和比较骨科与创伤学，26（05），399-407。当前的干细胞研究与治疗，3（4），254-264。Fröhlich，M.，Grayson，W。L.，Wan，L。Q.，Marolt，D.，Drobnic，M。，＆Vunjak-Novakovic，G。（2008）。 组织工程骨移植：生物学需求，组织培养和临床相关性。 Giannoudis，P.，Panteli，M。和Calori，G。（2014年）。 骨骼康复：钻石概念。 在G. Bentley中（ed。 ），欧洲教学讲座（第1卷 14，pp。 3-16）：施普林格柏林海德堡。 Gomez-Barrena，E.，Rosset，P.，Lozano，D.，Stanovici，J.，Emmthaller，C。和Gerbhard，F。（2015）。 骨断裂愈合：延迟的工会和不连接中的细胞疗法。 骨，70，93-101。 doi：10.1016/j.bone.2014.07.033Fröhlich，M.，Grayson，W。L.，Wan，L。Q.，Marolt，D.，Drobnic，M。，＆Vunjak-Novakovic，G。（2008）。组织工程骨移植：生物学需求，组织培养和临床相关性。Giannoudis，P.，Panteli，M。和Calori，G。（2014年）。骨骼康复：钻石概念。在G. Bentley中（ed。），欧洲教学讲座（第1卷14，pp。3-16）：施普林格柏林海德堡。Gomez-Barrena，E.，Rosset，P.，Lozano，D.，Stanovici，J.，Emmthaller，C。和Gerbhard，F。（2015）。 骨断裂愈合：延迟的工会和不连接中的细胞疗法。 骨，70，93-101。 doi：10.1016/j.bone.2014.07.033Gomez-Barrena，E.，Rosset，P.，Lozano，D.，Stanovici，J.，Emmthaller，C。和Gerbhard，F。（2015）。骨断裂愈合：延迟的工会和不连接中的细胞疗法。骨，70，93-101。 doi：10.1016/j.bone.2014.07.033
个人，集体，文化和社会结构因素
灯具从荧光灯向发光二极管（LED）的过渡促使植物生物技术中的当前实践重新评估。农业 - IUM介导的转化对于大豆（甘氨酸最大）中的基因工程和基因组编辑至关重要。大豆转化的临界共培养步骤发生在光条件下。当前用于大豆转化中共培养的方案缺乏光强度的标准。在本研究中，目的是研究共培养过程中光强度对大豆转化效率的影响。在共培养的五天内实现了五种光强度：50、100、150、190μmol m-2 s-1的白色LED之外，除了荧光100μmolm-2 s-1外。共培养后，所有外植体在均匀条件下以选择压力，生根和适应性进行了芽感应和伸长。分别使用两个可选标记HPPDPF-4PA和BAR进行了实验，研究了潜在的光效应是否由于标记相关途径而变化。植根于体外植物的阳性PCR分析，在两个可选标记物中都在所有光处理中都达到了成功的转化事件，范围为2.4％至6.9％。在共同培养过程中增加LED光强度会导致两个可选标记之间的不同转化效率。在亮舌蛋白选择下的处理中未检测到转化效率的差异。结果表明，在共培养过程中增加光强度导致芽再生在4-羟基苯基 - 丙酮酸二氧酶（HPPD）抑制剂的选择下的变化效率。此外，当使用HPPD抑制剂发生选择时，在100μmolm-2 s-1处的荧光光和白色LED之间也观察到转化效率的变化。结果突出了研究光对转化效率的影响的智能和潜在应用。
认知障碍中神经元特异性烯醇酶的研究进度：迷你综述
在1965年，科学家摩尔最初发现了具有酸性特性的可溶性蛋白质，该蛋白在大脑的神经组织中广泛存在，但在非神经组织中的存在有限。这种蛋白质（称为14-3-2蛋白质或NSE）是一种大分子物质，在正常的外周体液体中存在最小的物质（Bock and Dissing，2010年）。nse在脑组织中表现出最高的分布，构成约1.5％ - 3.0％的脑神经组织中所有可溶性蛋白，并且在人脑皮质中占40％-65％的烯醇酶。大脑的灰质具有大量神经元的群体，导致NSE浓度升高。相反，外周神经仅显示出中枢神经系统中观察到的NSE水平的1％-10％。因此，灰质表现出最高的NSE含量（Hein-née等，2008）。血液中NSE的量至少比大脑低30倍。当脑组织被缺血，中毒或创伤损害时，细胞膜的完整性被破坏并释放。将NSE释放到脑脊液中，随后进入血液，这是由于血脑屏障的崩溃而导致的，这是监测脑组织损伤后血液NSE水平改变的基础，这是由基本研究的发现所证明的（Angelov等，1994年）。nse是神经损伤的独特指标，并在调节神经细胞的生长和发育中起着至关重要的作用，这是由于其显着的神经特异性是在糖酵解过程中作为影响的烯醇酶（Hafner等人，2012年）。一旦神经元受损，它将迅速提高神经细胞的NSE合成速率，并在保护和修复受损的神经方面发挥补偿性作用。在丙酮酸激酶的作用下，NSE形成ATP并改善神经细胞来源的缺氧状态（Díaz-Ramos等，2012）。
线粒体载体在人肠寄生虫胚泡
抽象的杂种形成了各种真核生物的进化枝，包括多细胞藻类，鱼类和植物性的致病性卵菌，例如马铃薯枯萎病植物植物和人类肠道原生动物原生动物胚泡。在大多数真核生物中，糖酵解是一种严格的胞质代谢途径，将葡萄糖转化为丙酮酸，导致NADH和ATP的产生（三磷酸腺苷）。相比之下，斯流媒体具有分支的糖酵解，其中回报阶段的酶位于细胞质和线粒体基质中。在这里，我们在胚泡中确定了一个可以运输糖酵解中间体的线粒体载体，例如二羟基乙酮磷酸二羟基苯甲酸酯和3-磷酸甘油醛，穿越线粒体内膜，与细胞质和线粒体分支相关。与系统发育相关的人线粒体氧甲酸酯载体（SLC25A11）和二烷基化合物载体（SLC25A10）进行了比较分析，表明糖酵解中间载体失去了其经过跨性质底物疟疾和氧气的能力。胚泡缺少生成线粒体ATP所需的几个关键成分，例如复合物III和IV，ATP合酶以及ADP/ATP载体。线粒体矩阵中糖酵解的回报阶段的存在会产生ATP，该ATP可以为诸如型蛋白质i使用的蛋白质促进蛋白质和蛋白质和分解蛋白质的物质，从而为诸如大分子核酸菌合物以及NADH等动力提供动力。鉴于其在碳和能源代谢中的独特底物特异性和中心作用，此处鉴定出的糖酵解中间体的载体代表了针对斯特雷默培养病原体的特定药物和农药靶标，这是非常重要的。