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World File Search System中胚层
当前的药物生物技术
摘要：母乳（BRM）不仅是营养供应，而且还包含各种各样的细胞。据估计，人乳中多达6％的细胞具有间质干细胞的特征（MSC）。可用的数据还表明，这些细胞是多能的，并且能够自我更新和与其他单元的分化。在这篇综述中，我们比较了不同的特征，例如CD标记，分化能力和从人类母乳（HBR-MSC）与人骨髓（HBMSC），沃顿果冻（WJMSC）和人脂肪组织（HADMSC）的干细胞（HBR-MSC）（HBMSC）（HBMSC）（HBMSC）（HADMSC）进行了比较。文献综述表明，人类母乳衍生的干细胞专门表达一组细胞表面标记，包括CD14，CD31，CD45和CD86。重要的是，确定了一组CD13，CD29，CD44，CD44，CD105，CD106，CD146和CD166的标记物，在四个干细胞来源中很常见。WJM-SC，HBMSC，HADMSC和HBR-MSC有效地分化为中胚层，外胚层和内胚层细胞谱系。HBR-MSC在分化为神经干细胞，神经元，脂肪细胞，肝细胞，软骨细胞，骨髓细胞和心肌细胞的能力使这些细胞成为了再生药物中的干细胞来源，而从常用使用的bone bone Marrowsective conceptive则隔离了干细胞。，尽管自养母乳衍生的干细胞是哺乳期女性的可访问来源，但母乳可以被视为具有高分化潜力的干细胞来源，具有任何道德问题。
研究实验室小鼠肝脏发育的研究
1,2 <伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。 关键字：肝脏发育。 胚胎。 mus musculus。 胚胎发育。 引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。 Pritchett，2007）。）。 Bossard and Zaret，（2000年）。<伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。 关键字：肝脏发育。 胚胎。 mus musculus。 胚胎发育。 引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。 Pritchett，2007）。）。 Bossard and Zaret，（2000年）。<伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。 关键字：肝脏发育。 胚胎。 mus musculus。 胚胎发育。 引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。 Pritchett，2007）。）。 Bossard and Zaret，（2000年）。<伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。 关键字：肝脏发育。 胚胎。 mus musculus。 胚胎发育。 引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。 Pritchett，2007）。）。 Bossard and Zaret，（2000年）。<伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。 关键字：肝脏发育。 胚胎。 mus musculus。 胚胎发育。 引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。 Pritchett，2007）。）。 Bossard and Zaret，（2000年）。<伊拉克基地组织教育学院摘要：当前的研究旨在跟进瑞士白鼠穆斯科鲁斯（Mussculus）瑞士白鼠中的一些胚胎发展，以确定这些发展的本质，以确定从此方面提高科学知识，并为实验性的研究提供了众多的功能。胆汁，营养化合物的代谢，解毒，通过糖原储存来调节葡萄糖水平和通过分泌凝血因子和血清蛋白来控制血液平衡。HHEPATOCTOCTOCTOCTES是肝脏中的主要细胞类型，占了成人器官质量，肝细胞和胆小性细胞的70％的元素，而这些细胞均来自肝脏，而embiary Endod secenercy severers extry secenercy serry secenercy secenercy se nive则是该细胞的启发。星形胶质细胞，kupffer细胞和血管细胞是中胚层起源的。发生内部受精后，受精卵开始分裂，直到胚泡分为滋养剂，将来形成了胎盘，并形成了后来形成胚胎的内部细胞的质量。关键字：肝脏发育。胚胎。mus musculus。胚胎发育。引言小鼠被认为是重要的实验动物之一，是标准模型，因为它们以高速和快速的方式总结了疾病和遗传发育的演变，这些疾病和遗传发育适合许多研究，并且它们的规模很小，而且价格较小，而且价格易于提高，易于提高，获得和处理（Wong et ai，2015年）。Pritchett，2007）。）。Bossard and Zaret，（2000年）。因为它们可以操纵遗传学，并且在病理生理学和治疗性方面与人具有相似的方面，这使它们成为研究中最广泛使用的模型。小鼠胚胎在科学实验中很重要，因为小鼠肝脏的细胞组织与其他哺乳动物的细胞组织完全相似，这证实了小鼠为研究肝脏结构和功能提供了有用的动物模型（Baratta等，2009）。对小鼠肝发育的研究已吸引了胚胎学研究人员已有60多年的历史，鼓励科学家研究肝脏在储存和释放营养中及其在去除有毒物质中的重要作用（Sigal等，1999）。胎儿肝脏在胚胎发育过程中导致红细胞的产生，并且肝脏经历了两个阶段，其特征是肝细胞的成熟以及通过形态变化的几个阶段的结缔组织增加（Khanna，2014）。肝脏，胆管系统和胰腺具有从人体中形成前肢的确定性腹侧内胚层共同起源。Cardinale等人，（2012年）肝脏是最大的内部器官，在妊娠发育过程中提供了造血的部位，以及在杜尔索迪（Adulthoodi）中的重要代谢，合成和排毒。肝发育受到一系列细胞和渐进性的细胞和分子相互作用的调节。肝母细胞从内胚层增殖，形成组织芽，然后进一步扩散到相邻的隔膜横向中，与内皮细胞混合。Asahina等人，（2006年）。ader等人，（2006年），肝发育始于尾尾前的憩室及其的一部分，在这种未成熟的肝细胞（肝素）开始形成肝细胞（Hepatoblasts）之后，随着肝脏的相互作用，在与内二硫代表的上皮细胞之间的相互作用后开始形成，以等体的表皮细胞之间的相互作用，并形成。上皮间质相互作用。肝形态发生需要肝细胞和血管内皮之间的相互作用。肝脏延伸到其独特的能力，以响应肝脏肿块或损伤而再生。作为针对有毒化学物质和重新加工或吸收底物的生化防御，肝脏可能会定期暴露于有害因素上。Mao等人，（2014年）。
流出区形成 - 孔子先天性心脏病的起源
摘要：心脏外流（OFT）中的异常是最常见的先天性心脏缺陷（CHD）之一。在胚胎发生过程中，心脏OFT是心脏动脉极的动态结构。心脏管伸长通过添加来自咽部，中胚层到两端的细胞。这些祖细胞被称为第二心脏（SHF），是20年前首次识别为对形成心管的生长和OFT的主要贡献者的生长至关重要。SHF开发的扰动会导致CHD的共同形式，包括大动脉异常。 oft的发育也取决于多种细胞类型之间的旁分泌相互作用，包括心肌，心内膜和神经rest谱系。 在本出版物中，专门针对安德里亚娜·吉滕伯格（Andriana Gittenberger-de Groot）教授及其对心脏发展和CHD领域的贡献，我们回顾了她对FAST开发的一些开创性研究，对许多促成OFT的多种细胞类型的多样性具有特别感兴趣。 我们还讨论了选定的关键发现的临床意义，以理解我们对CHD的病因，尤其是经常畸形。SHF开发的扰动会导致CHD的共同形式，包括大动脉异常。oft的发育也取决于多种细胞类型之间的旁分泌相互作用，包括心肌，心内膜和神经rest谱系。在本出版物中，专门针对安德里亚娜·吉滕伯格（Andriana Gittenberger-de Groot）教授及其对心脏发展和CHD领域的贡献，我们回顾了她对FAST开发的一些开创性研究，对许多促成OFT的多种细胞类型的多样性具有特别感兴趣。我们还讨论了选定的关键发现的临床意义，以理解我们对CHD的病因，尤其是经常畸形。
免疫检查点抑制剂诱导的免疫介导的肝炎：当前的更新和未来观点
上皮可塑性，上皮细胞改变表型的能力，是一种令人着迷的现象，已被广泛研究了数十年。最常见的上皮可塑性是指上皮和间质表型之间的转化，称为上皮to-to-Emespoodymal Transition（EMT）和间质向上皮到上皮过渡（MET）。EMT和MET都是胚胎发育，组织对损伤的反应，例如炎症，修复和癌症的常见特征。收集了一系列原始研究文章和研究报告，以解决人类和其他模型系统中上皮可塑性，其区分和功能的迷人和复杂状态。上皮到间充质转变（EMT）已经过经典定义为一种发育程序，它在许多器官的早期胚胎图案中发挥了作用，其特征是上皮细胞失去细胞对细胞粘附，上皮紧密连接点和向脉炎。进化上，EMT过程使生物可以通过从原始外胚层产生中胚层的间充质细胞来获取更多复杂的结构。EMT是组织和器官的生理修复和病理纤维化的基本过程。最近，人们已经认识到，EMT在促进促肿瘤微环境的创造方面也起着至关重要的作用，从而促进肿瘤发生和转移。细胞间连接（尤其是紧密连接）的重组是肿瘤进展过程中EMT过程的关键事件。在本期内Neyrinck-Leglantier等。发表了他们的研究工作，调查了紧密的连接蛋白齐路coccludens-1（ZO-1）如何参与调节肿瘤微环境。使用体外和体内模型都证明，将膜相关的ZO-1迁移到细胞核区室可以调节促炎性趋上趋化因子的分泌，因此
综合症先天性心血管疾病的横向思维
综合性先天缺陷是罕见的疾病，可以表现为多效性合并症。主要的例子是罕见的先天性心脏和心血管异常，可能伴随前肢缺陷，肾脏疾病等。这种多器官缺陷是否共享发展联系仍然是与受影响患者的诊断，治疗干预和长期护理有关的关键问题。心脏，内皮和血统从外侧板中的中胚层（LPM）共同发展，这也携带着祖细胞的祖细胞，用于肢体结缔组织，肾脏，间皮和平滑肌。LPM的这种发育可塑性在不同后代谱系中的多种型祖细胞和共享转录因子表达上发现，具有解释罕见的先天性疾病中看似截然不同的综合缺陷的潜力。将患者基因组测序数据与模型有机体研究结合在一起，已经为复杂的LPM相关的先天缺陷（例如心脏病综合症）提供了丰富的见解。在这里，我们总结了早期LPM模式中的发育和已知引起疾病的机制，解决这些过程中的缺陷如何驱动多器官合并症，并概述了如何通过LPM相关疾病的疾病来概述几种具有复杂合并症的心血管和造血性出生缺陷。我们还讨论了将患者测序，数据聚集资源和建模有机体研究整合到机械学解码先天性缺陷的策略，包括潜在的LPM相关孤儿疾病。最终，将复杂的先天性表型与常见的LPM起源联系起来，为发现发育机制提供了一个框架，并预测先天性疾病的合并症影响了心血管系统及其他地区。
疟原虫的核糖体异质性和特化
20 世纪 30 至 50 年代，核糖体首次被发现。科学家们认识到核糖体是异质性的，因为他们注意到用电子显微镜观察到的颗粒大小和形状存在差异[4]。一个假说进一步发展了这一模型，该假说描述了每个核糖体如何包含翻译一种蛋白质所需的遗传信息[5]。然而，随着这个假说被推翻和忽视，核糖体异质性模型也被推翻。将外来噬菌体 RNA 引入大肠杆菌后，细菌核糖体会进行翻译，这一发现支持了人们不再依赖核糖体特化模型的观点[6]。科学界普遍认为，核糖体是非特化的机器，能将任何 mRNA 转化为蛋白质。研究方法和技术的进步使得人们能够对核糖体进行更细致的研究，更清楚地表明核糖体的核糖体蛋白质 (RP) 组成可能存在异质性。 RP 组成的差异可能是由于特定 RP 同源物在不同组织或器官中的表达所致，例如拟南芥增殖组织中的 RPS5A 和 RPS18A [ 7 ] 出现在果蝇 [ 8 ] 和小鼠 [ 9 ] 的性器官中，并且随着细胞的不断分化和发育 [ 10 ]。此外，在小鼠中，RP 同源物 RPL39L（核糖体大亚基 L39 样蛋白）掺入核糖体会通过改变多肽出口通道的大小和电荷来影响翻译速度 [ 11 ]，这有助于调节一组必需的雄性生殖细胞特异性蛋白质的折叠，而这些蛋白质是精子形成所必需的 [ 12 ]。在发育中的小鼠胚胎中，含有 RPL10A 的核糖体更倾向于经典 Wnt 信号通路成员的转录本，从而形成了一种特化，这对于发育过程中中胚层的正常产生至关重要 [ 13 ]。此外，虽然进化保守的核心 rRNA 在物种间保持高度保守，但人们认识到真核生物已经进化出包含扩展片段 (ES) 的 rRNA 序列。这些 ES 是从核心
解密人CD34
摘要：在体内监测的人CD34 +干细胞（SC）注射到心肌疤痕组织中显示出对心肌梗死患者恢复的真正好处。它们以前曾在临床试验中使用，并有希望的结果，并且有望在严重的急性心肌梗塞后对心脏再生药物有希望。然而，关于他们在心脏再生疗法中潜在的效率的一些辩论仍有待确定。为了阐明心脏再生中CD34 + SC的含义和贡献的水平，需要确定主要调节剂，对主要调节剂，途径和基因的潜在心血管分化和旁分泌分泌的水平。我们首先制定了一种考虑，可以将人类CD34 + SCS从脐带血到早期心血管谱系纯化。然后，通过使用基于微阵列的方法，我们在分化过程中遵循其基因表达。我们将未分化的CD34 +细胞的转录组与分化的两个阶段（即第三天和第十四天）与人类心肌细胞祖细胞（CMPC）以及心肌细胞作为对照的两个阶段进行了比较。有趣的是，在处理过的细胞中，我们观察到通常存在于心血管细胞中的主要调节剂的表达增加。与未分化的CD34 +细胞相比，在分化细胞中诱导的心脏中胚层的细胞表面标记，例如激酶插入域受体（KDR）和心源表面受体毛躁4（FZD4）。Wnt和TGF-β途径似乎参与了这种激活。这项研究强调了有效刺激CD34 + SC表达心脏标志物的实际能力，并一旦诱导，允许鉴定已知参与血管和早期心脏病的标记物，证明了它们对心血管细胞的潜在启动。这些发现可以补充其在心脏病细胞疗法中已知的旁分泌阳性作用，并可能有助于提高使用离体扩展的CD34 + SC的有效性和安全性。
水生生物疾病 67:191
摘要：传染性皮下和造血组织坏死病毒（IHHNV）在泰国养殖的斑节对虾和南美白对虾中广泛存在。它会导致南美白对虾出现身体异常和生长迟缓的矮小畸形综合征，但不会导致斑节对虾出现明显的疾病。在这两个物种中，该病毒可能会在外胚层和中胚层组织中产生 Cowdry A 型内含物，但这些在南美白对虾中很常见，而在斑节对虾中很少见。使用 IHHNV 特异性 PCR 引物可以更容易地在这两个物种中检测到该病毒。通过使用特异性 IHHNV 探针进行原位杂交（ISH），与心肌细胞相关的固定吞噬细胞在这两个虾种中往往表现出强烈的阳性反应。仅凡纳滨对虾的卵巢和神经组织（神经节中的神经元和神经索中的神经胶质细胞）对 IHHNV 呈 ISH 阳性。通过透射电子显微镜检查，在 IHHNV 感染的凡纳滨对虾的鳃中发现了坏死细胞，而在 IHHNV 感染的斑节对虾的淋巴器官中发现了病毒体的准晶状阵列和凋亡细胞而不是坏死细胞。因此，斑节对虾的细胞凋亡可能是 IHHNV 临床疾病缺失的原因之一。这些结果揭示了这两种虾对 IHHNV 感染的不同反应。斑节对虾 IHHNV 感染的一个奇怪特点是，通过 ISH 和实时 PCR 检测到的不同样本组织之间的比较病毒载量不一致。这种明显的组织偏好的不一致以及两种虾类之间不同细胞反应的原因仍然无法解释。
干细胞研究
转基因株系采用第二代 CRISPRa 系统，该系统携带与异源三聚体 VPR 反式激活因子融合的核酸酶缺陷型 dCas9，该异源三聚体 VPR 反式激活因子由 VP64、p65 和 RTA 结构域组成。该系统可用于解释任何所需细胞类型的内源性调控机制。使用基于 CRISPR/Cas9 的基因组编辑方法，我们以 AAVS1 人类基因组位点为目标，分别引入先前描述的 dCas9VPR-tdTomato（Schoger 等人，2020 年）和嘌呤霉素盒，这些盒受 CAG 和 EF1a 启动子的控制（图 1 A）。采用优化的核转染方案转染 LhiPSC-GR1.1 细胞。转染后，选择具有 tdTomato 表达的细胞并通过 PCR 进行基因分型（图 1B，引物结合如图 1A 所示，黑色引物仅扩增野生型 (WT) 片段；绿色引物扩增插入的构建体）。随后，扩增、分析和冷冻保存两个阳性克隆（#2 和 #3）。DNA 测序数据证实了 AAVS1 基因座中的正确和纯合敲入转基因整合（图 1C，显示为克隆#2）。PCR 结果显示，在筛选的 15 个克隆中，11 个克隆含有纯合插入（命名为 CRISPRa 细胞），1 个克隆是杂合的，3 个克隆不含有插入而是含有 WT 完整基因座（用作对照细胞）（数据未显示）。通过分析 PCR 和测序预测的前五个脱靶位点进行脱靶分析；在这些位点中均未发现任何编辑事件。对照电穿孔和非电穿孔 (参考) 系用于比较 (补充图 1A)。所有系的支原体检测均为阴性。通过基于 SNP 的核型分析和标准 G 带证明了 CRISPRa 克隆 #2 和 #3 以及对照细胞的基因组完整性。未检测到数值或结构异常的证据 (图 1D)。与核转染 (图 1Ei) 和非核转染对照相比，细胞生长和形态正常。与对照 hiPSC 相比，CRISPRa 中的 dCas9 和 tdTomato 表达证实了转基因表达，如 Western blot (补充图 1B，显示克隆 #2 和 #3) 和共聚焦显微镜 (图 1Eii，显示克隆 #2，n = 3 个不同传代) 所示。通过免疫荧光分析干性标记 OCT4 的表达（图 1 Eiii）和流式细胞术分析（显示 94.2% OCT4 和 99.9% TRA1-60 阳性细胞（图 1 Eiv）（显示克隆 #2））来评估多能性。通过在 CRISPRa 和对照系中形成胚状体 (EB) 和定向分化来测试向所有三个胚层的自发分化能力。免疫荧光分析证实了 AFP、β-III-Tu bulin 和 α-平滑肌肌动蛋白 (ACTA2) 的表达，进一步支持内胚层、外胚层和中胚层的命运（图 1 F，显示克隆 #2 和 #3）。转录水平分析表明配对盒 3 ( PAX3 ) 和微管相关蛋白 2 ( MAP2 ) 的表达表明外胚层分化；T-box 转录因子 T ( TBXT ) 表明中胚层命运，而 α-Feto-Protein ( AFP ) 表明内胚层分化（补充图 1 C，显示克隆 #2 和 #3）。我们研究了 CRISPRa 系用于研究通过定向 2D 分化产生的心肌细胞的适用性，这种分化产生了自发跳动的细胞（视频作为补充材料提供），具有强大的 α-辅肌动蛋白 2 (ACTN2) 和心脏肌钙蛋白 T (TNNT2) 心脏标志物表达（（补充图 1D，显示为克隆#2）。最后，我们通过确定与心脏肥大和代谢稳态有关的 KLF15 表达的诱导来测试 CRISPRa 系的功能。我们发现，与转染了非靶向 gRNA 的各自亲本系相比，设计用于结合 KLF15 转录起始位点 (TSS) 的 44 bp 5'-上游序列的单个指导 RNA 能够显着增强 CRISPRa 系（克隆#2 和#3）中 KLF15 的转录。对照细胞没有显示独立于转染的 gRNA 的活化（图 1G）。总之，使用完全表征的 hiPSC 系，我们生成了具有纯合靶向插入、正常核型和多能性的人类 CRISPRa 系，并显示出其激活
组织形态发生中的机制调节反馈回路：由机械应力调节的基因和顺式调节元件的功能分析
抽象的胃结构是胚胎发育的关键过程，是形成三线蛋白圆盘所必需的。这是囊泡细胞的分化和重新分布，形成三个胚胎层，这些胚胎将产生不同的功能组织（外胚层，中胚层和内胚层）。这种重组是通过涉及整个胚胎的特定细胞组的高度协调运动而发生的。Telest Medaka（Oryzias latipes）被选为实验动物模型。在该物种中，胃结构与Epibolia工艺同时发生。在此期间，细胞从动物极向植物极迁移，导致胚胎轴的形成，这是建立脊椎动物身体计划的基础。对表皮过程中发生的形态发生过程知之甚少。但是，与YAP家族成员一样，已经描述了某些要素的重要性。这些蛋白质是转录调节剂，从培养基接收信号和机械刺激，并将它们与遗传信号整合在一起。这是细胞正确迁移到胚胎中线的必要条件。如果这些信号受到放松管制，则可能无法正确发展胃，甚至可能会产生致命的影响。要更多地了解YAP在胃肠道中的作用，我们将研究YAP下游基因的参与（AFAP12，AKAP12B，EFS，EFS，GLIS2B，MARCKSL1A/B，ROCK2B，Synaptopodin和ved），在cytoskelet cytoskelectal重新组织中与细胞粘附和互动的互动过程中。为此，CRISPR-CAS9系统用于生成每个基因的敲除突变体。这种基因组编辑机制是一种根据细菌和古细菌的天然适应性免疫防御系统而适应的工具。该工具由两个组成部分组成：SGRNA，与基因组的靶序列相匹配的短片段和Cas9核酸内切酶，它们在同一位置引起双链DNA断裂。之后，细胞修复DNA的影响区域，导致基因组中的永久修饰。要执行数据分析，我们使用Stata统计软件。初步数据显示了AFAP12，MARCKSL1，VED和ROCK2B的研究中的特殊结果。在这些情况下，控制和敲除之间的表观进展似乎有所不同。